鹰嘴豆种质资源对Ascochyta rabiei的抗性评价及遗传多态性分析

以25 个鹰嘴豆品系为试验材料,通过叶面喷雾的方式进行Ascochyta rabiei菌悬液室内外人工接种,评价不同鹰嘴豆种质资源的抗病性;同时利用RAPD方法进行基因型鉴定,采用NTSYSpc 2.10t软件对分子标记结果进行遗传相似性的统计分析并建立各品系间的亲缘关系聚类图,探讨不同鹰嘴豆品系对A.rabiei抗性与遗传多态性间的关系。通过室内和田间鹰嘴豆抗A.rabiei鉴定结果综合分析表明：在25个鹰嘴豆供试品系中,“系选 03”和“216”品系均表现出稳定抗性特性;北园春品系表现出稳定中抗特性。通过RAPD多态性引物对这25 个供试品系进行PCR扩增,共获得129 个扩增条带,其中多态性条带共有67 条,多态性比例达51.94%,遗传相似系数为0.3731-0.9254。结合抗病性和遗传多态性,经方差分析表明,本研究所采用的鹰嘴豆品系对A.rabiei的抗性强弱与其遗传相似性之间无显著相关性。     

应用SSR标记分析鹰嘴豆种质资源遗传多样性

种质资源的遗传多样性是育种工作的基础,本研究利用SSR标记对鹰嘴豆资源进行遗传多样性分析,旨在发掘鹰嘴豆资源中丰富的遗传变异。从48对鹰嘴豆SSR引物中筛选出18对核心多态性引物,对96份不同来源的鹰嘴豆种质资源进行SSR标记的遗传多样性分析。结果表明,18对SSR引物共检测到115个等位变异,占总检测位点的52.99%,每对SSR引物可检测出3~10个等位变异,平均6.39个;平均每个位点多态信息量(PIC)为0.8107,变化范围为0.6661~0.8984。Shannon's信息指数平均为1.4769,变化范围为0.0607~1.9584。PGMA聚类结果表明,在遗传相似系数0.59处,可将96份鹰嘴豆资源分为6个类群,类群Ⅰ包含9份资源,类群Ⅱ包含2份资源,类群Ⅲ包含28份资源,类群Ⅳ包含4份资源,类群Ⅴ包含40份资源,类群Ⅵ包含13份资源。本研究对我国鹰嘴豆种质资源的评价与利用、优异基因的挖掘、育种亲本材料的选择等提供科学依据。     

鹰嘴豆种子胰蛋白酶抑制剂的分离纯化与鉴定

为了寻找具有药物作用的天然胰蛋白酶抑制物,采用硫酸铵分级沉淀、离子交换层析(DEAE-纤维素52)及Sephadex G-100凝胶层析等方法, 从鹰嘴豆种子中分离出一种鹰嘴豆胰蛋白酶抑制剂（CPTI）. 研究表明：CPTI对胰蛋白酶有较强的抑制作用,抑制率达80%,而对胰凝乳蛋白酶抑制作用较弱,抑制率为32%, 对胃蛋白酶、木瓜蛋白酶及枯草杆菌蛋白酶均无抑制作用; 用SDS-PAGE测得CPTI近似分子质量为25.7 kD; CPTI具有较高的热稳定性,在100 ℃下加热60 min,对胰蛋白酶活性仍保持78%抑制率; Lineveaer-Burk作图得知该抑制剂属竞争性抑制类型. 动力学测定显示,来自鹰嘴豆中的CPTI对胰蛋白酶的抑制作用常数(Ki)为3.99×10^-7 mol/L.     

鹰嘴豆孢克鲁维酵母利用菊芋原料同步糖化与发酵生产乙醇

菊芋含有大量的菊粉多糖,且种植简单、产量高,是极具开发价值的替代玉米等粮食作物生产燃料乙醇的原料。文中研究了鹰嘴豆孢克鲁维酵母Y179利用菊芋原料同步糖化与发酵生产乙醇。鹰嘴豆孢克鲁维酵母Y179具有高效分泌菊粉酶的能力,摇瓶试验显示Y179酵母能够利用完全由菊芋原料配制而成的培养基良好生长并发酵产生乙醇。通气及温度对乙醇产量影响明显,相对厌氧环境对Y179酵母发酵产乙醇具有促进作用,30℃发酵温度相对37℃和42℃更有利于乙醇产量提高。种子液培养时间及接种量对乙醇产量影响较小。在5 L发酵罐中以10%(V/V)量接入预培养36 h的Y179种子液,发酵液完全由菊芋干粉配制而成,总糖含量22%(W/V),30℃不通气,300 r/min搅拌,发酵144 h时,乙醇浓度达到12.3%(V/V),糖醇转化效率86.9%,糖利用率大于93.6%。初步研究结果显示鹰嘴豆孢克鲁维酵母Y179在利用菊芋原料生产乙醇方面具有良好应用前景。     

花梨木叶中鹰嘴豆芽素A的提取工艺研究

以花梨木的可再生资源—叶子为原料,利用微波辅助酶提取技术进行提取,在单因素试验的基础上对提取条件进行了考察,根据BBD(Box-Behnken design)实验设计原理,采用3因素3水平的响应面分析法,以花梨木叶子中主要异黄酮鹰嘴豆芽素A(biochanin A)为指标,对提取过程进行优化,得到最佳工艺参数为:提取时间15 min,微波辐射功率300 W,提取温度34℃,pH值5.2,酶的加入量3.5 mg.g-1。在最佳提取条件下,鹰嘴豆芽素A的提取率可达1.579 mg.g-1。     

鹰嘴豆种质资源农艺性状遗传多样性分析

以100份鹰嘴豆种质资源为材料,应用聚类分析和主成分分析方法,对15个主要农艺性状的遗传多样性进行分析。结果表明,参试材料存在广泛的遗传多样性。其中,多样性指数最高的是株高,其次是百粒重;性状变异系数最大的是单株荚数,其次是单株粒重;基于各种质间形态标记的遗传差异,将100份鹰嘴豆种质聚类并划分为4大类群。第Ⅰ类群可作为选育丰产中粒型和株高适中的品种,第Ⅱ类群可作为选育矮秆耐密及特异粒色(型)品种,第Ⅲ类群丰产性较差可作为选育子粒球型、光滑的品种,第Ⅳ类群可作为选育大粒型、适宜机械化收获的品种。9个数量性状的主成分分析结果表明,前4个主成分累计贡献率达73.91%,各主成分性状载荷值反映了主要数量性状的育种选择潜力。综合分析种质资源农艺性状,为鹰嘴豆的有效利用提供一定的科学依据。     

鹰嘴豆素A对病理脱发模型小鼠毛发生长影响的初步研究

本文初步研究了鹰嘴豆素A对毛发生长的影响和机制。实验分为空白对照组、脱发模型组、鹰嘴豆素A组和米诺地尔组。以睾酮诱导的C57BL/6小鼠为脱发模型,通过对比空白对照组与其毛长、毛重以及皮肤中毛囊的差异性来判断脱发模型是否构建成功,对比两组之间激素含量的差异以研究此脱发模型对激素的影响;对比鹰嘴豆素A组与脱发模型组毛长、毛重、皮肤中毛囊和血液中激素含量的差异性来研究鹰嘴豆素A对脱发小鼠毛发生长情况和激素水平的影响;利用体外微量酶反应体系研究鹰嘴豆素A对5α-还原酶活性的抑制作用。结果显示,与空白对照组相比,脱发模型组小鼠毛长、毛重、毛囊数目显著减少,血液中雄激素含量显著升高;与脱发模型组相比,鹰嘴豆素A组小鼠毛长、毛重、毛囊数目显著增加,血液中雄激素含量显著降低。鹰嘴豆素A具有一定抑制5α-还原酶活性,相对抑制率达到50%的浓度(IC50)为94.45±6.92μmol/L。结果表明脱发模型构建成功,鹰嘴豆素A对毛发生长具有一定的促进作用,其机制可能与睾酮的转化过程或抑制5α-还原酶活性有关。     

鹰嘴豆芽素A糖苷类衍生物的合成及其结构表征

为了改善鹰嘴豆芽素A代谢稳定性,提高其生物利用度,本文以乙酰溴代糖和鹰嘴豆芽素A为原料,采用相转移催化法在鹰嘴豆芽素A 7位羟基处引入糖苷,合成12个鹰嘴豆芽素A糖苷类衍生物,方法简单,条件温和,产率较高。产物结构通过1H NMR、13C NMR、IR和ESI-MS分析确认,为进一步对其进行生物活性研究奠定了基础。     

萌芽鹰嘴豆主要异黄酮变化规律及分布研究

目的：考察鹰嘴豆萌芽过程中鹰嘴豆芽素A和芒柄花素含量的变化规律及豆芽不同部位2种成分含量的差异。方法：将鹰嘴豆在22 ℃萌芽,分别于萌芽的0、1、2、3、5、7、9d取样品测定鹰嘴豆芽素A和芒柄花素含量,取萌芽7d鹰嘴豆,分别取其子叶、胚根和胚芽测定上述2种成分含量,分析2种成分含量变化规律和豆芽不同部位含量差异。 结果：鹰嘴豆芽素A 和芒柄花素含量自发芽后呈现不断增长的趋势,第3～7d增长迅速、第7～9d后增速放缓,不同部位含量大小依次为胚根＞胚芽＞子叶。结论：鹰嘴豆萌芽过程中鹰嘴豆芽素A和芒柄花素含量呈不断上升趋势,成分主要集中在胚根和胚芽中。     

鹰嘴豆种子的化学成分研究

摘要 目的：探究维药鹰嘴豆种子的化学成分，从药效物质基础的角度为阐明鹰嘴豆的营养功能与药用价值奠定基础。方法：将鹰嘴豆75%乙醇提取物分散于水中，分别通过石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取获得不同的萃取段。对正丁醇萃取段通过正相硅胶、凝胶柱层析，以及半制备高效液相色谱进行分离纯化，通过核磁共振氢谱和碳谱对分离纯化的单体化合物进行结构鉴定。结果：从鹰嘴豆种子中分离鉴定了8个化合物，分别为：(+)松醇(1)、乙基α-D-半乳糖苷(2)、L-色氨酸(3)、β-谷甾醇(4)、β-胡萝卜苷(5)、亚油酸甲酯(6)、亚油酸(7)和槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(8)。结论：亚油酸甲酯(6)和槲皮素-3-O-βD-吡喃葡萄糖苷(8)为首次从鹰嘴豆中分离鉴定。对鹰嘴豆中之前报道的乙基α-L-半乳糖苷的化学结构确证为乙基α-D-半乳糖苷(2)。