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相邻的反向重复DNA片段有形成单链内二级结构的倾向,属于一种测序困难的DNA模板。解决RNAi载体插入的反向重复片段的测序问题,为该类载体正确性的测序验证奠定基础。采用常规分子克隆方法构建表达小麦TaATG2串联反向重复片段的RNAi载体,设计2种策略对经菌落PCR初步鉴定的载体进行测序验证:一种是以完整的载体质粒为模板进行测序;另一种是先对载体进行酶切处理,切除反向重复片段中的一个后对保留另一个片段的线性载体进行测序。结果表明,第一种测序策略受到串联反向重复片段形成的单链内部二级结构的影响,测序信号在反向重复片段处出现衰减或乱峰,无法读取序列。第二种测序策略排除了2个反向重复片段之间的干扰,保留在载体上的片段测序信号清晰,序列准确。采用酶切切除一个片段后进行测序的方法,经过2次酶切和2次测序可以有效地对载体上的2个反向重复片段分别进行序列测定,进而确认构建载体的正确性。 相似文献
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生物技术药物,顾名思义,是指通过生物技术(涉及DNA重组技术)所生产的用于治疗疾病的药物。从最早的疫苗、重组蛋白药物(如生长素、促红细胞生成素、白介素等)到近年来的单克隆抗体、干扰性核酸(siRNA)、纳米抗体(nanobodies)、基因治疗、干细胞(stemcells)等。这些药物的陆续问世,已经或正在为人类健康、防病治病、社会经济发展等发挥举足轻重的作用。而靶向药物的出现,更是生物技术药物领域的一朵奇葩,以其独特的疗效、极高的安全性、良好的耐受性,在重大疾病药物市场上脱颖而出,获得了包括患者及医生在内的广泛而高度的认可。 相似文献
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目的 通过对医疗卫生机构2002-2009年获科技进步奖情况的统计分析,客观评价卫生机构科研工作的优势及问题,为进一步促进卫生科研工作提供借鉴. 方法 通过查阅徐州市科技局科技进步奖成果档案及各单位科技档案,对医疗卫生机构获徐州市科技进步奖的等级、研究类型等情况进行统计分析. 结果 2002-2009年14家医疗卫生机构获徐州市科技进步奖239项,呈逐年增长之势,特别是近4年明显上升.学科分布以基础医学、临床医学成果为主. 结论 在成果数量增加的同时更应该注重成果的含金量;应加强学科建设及各重点学科间的联合,获取大成果. 相似文献