巯基蛋白酶抑制肽对体外培养细胞生长的影响

本文研究了鸡巯基蛋白酶抑制肽C二型——CPIc-Ⅱ对NC3 H10,TC3 H10,2BS,SHR,WKY和乳鼠心肌细胞的生长的影响,发现CPIc-Ⅱ对所有研究过的细胞都有促生长作用,无一例外。促进作用表现为三方面:(1)促进细胞总蛋白量增加;(2)促进DNA合成:(3)促进细胞数增加。并且转化细胞均比相应的正常细胞对CPIc-Ⅱ更敏感,至此可以得到初步的结论,CPIc-Ⅱ在细胞代谢调节方面是一个正调节因素。     

重组水蛭素HV2的稳定性

重组水蛭素ＨＶ２是凝血酶的特异性抑制剂,是一种非常稳定的蛋白质。温度的升高（１００℃水浴）和ｐＨ（１─１３）的改变不影响其活力,在某些变性剂（８ｍｏｌ／Ｌ尿素、１％ＳＤＳ和６ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍）存在的条件下也非常稳定,０．１ｍｏｌ／Ｌ的ＤＴＴ在７０℃时使其部分失活,只有ｐＨ和温度同时升高其活力才开始下降,ｐＨ１３、８０℃处理１５ｍｉｎ即完全失活,氨基酸组成和活性分析发现失活样品的Ｃｙｓ和Ｌｙｓ被破坏。重组水蛭素ＨＶ２含有一个结构紧密的Ｎ端核心区和一个无序的Ｃ端尾部。其Ｎ端的３个Ｌｙｓ－Ｘａａ键均不被胰蛋白酶水解;胃蛋白酶及糜蛋白酶消化后,分离所得片段,氨基酸组成分析发现Ｎ端核心区依然保持很高的抗凝血酶活性,继续消化２４ｈ,核心区不被进一步降解。     

金属螯合亲和层析纯化金属硫蛋白

将二价铜离子螯合在Chelating Sepharose Fast Flow凝胶上制成亲和层析柱,锌诱导兔肝和镉诱导小鼠肝经匀浆、乙醇处理后上柱,用pH4.0的醋酸盐缓冲液平衡,再用pH5.2不同浓度的醋酸盐缓冲液分别洗脱,可得两个金属硫蛋白(MT)洗脱峰,经确定先后为MT-2和MT-1.分离方法比传统的凝胶过滤-离子交换法简单、省时,适于实验室规模分离纯化.     

镉诱导威廉环毛蚓（Pheretima guillelmi）金属硫蛋白的分离纯化…

蚯蚓威廉环毛（Ｐｈｅｒｅｔｉｍａ ｇｕｉｌｌｅｌｍｉ）经皮下注射ＣｄＣｌ２溶液诱导后,整体匀浆,再经热沉淀、乙醇沉淀后,经凝胶过滤ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－５０柱层析,得两个镉结合蛋白峰,分子量依次为４３ｋＤ及１９ｋＤ。这两个组份再分别经ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅ Ｆａｓｔ Ｆｌｏｗ柱层析,各得三个镉结合蛋白峰。根据光谱学特征、疏基含量及氨基酸组成等分析,表明凝胶过滤第二峰为金属硫蛋白（ＭＴ）,其经ＤＥ     

力竭性游泳对大鼠睾丸金属结合蛋白的诱导及其与睾酮和锌…

本研究通过观察大鼠力竭性游泳后睾丸金属结合蛋白（ＴＭＢＰ）、睾酮和锌含量的动态变化,探讨ＴＭＢＰ的被诱导性、诱导特点以及与睾酮合成和锌代谢的关系。结果显示：大鼠力竭性游泳后,ＴＭＢＰ呈一过性升高,峰值在游泳后６ｈ处,达安静时４ １６倍;游后１２ｈ已降回原有水平。这表明ＴＭＢＰ可被力竭性游泳所诱导,并减期不至６ｈ。ＴＭＢＰ诱导性的发现对认识ＴＭＢＰ的功能具有重要的意义。大鼠睾丸酮在力竭性游泳后即刻急     

琥珀酰—CCK7对大鼠胰腺腺泡细胞分泌α淀粉酶和蛋白酶的影响

琥珀酰－ＣＣＫ７为新合成的ＣＣＫ８的一种类似物,当琥珀酰－ＣＣＫ７的浓度为１×１０＾－１１ｍｏｌ／Ｌ－１×１０［－７］ｍｏｌ／Ｌ时,能促使大鼠胰腺离体腺泡细胞分泌α淀粉酶和蛋白酶,其最有效浓度为１×１０＾－９ｍｏｌ／Ｌ。在相同摩尔条件下,琥珀酰－ＣＣＫ７的促分泌效应明显大于ＣＣＫ８,且这种效应在３小时内随着作用时间的延长而增加,这为开发高活性ＣＣＫ８的类似物提供了依据。     

剑麻蛋白酶的分离纯化及其部分特性的研究

采用乙醇分步沉淀和 DEAE-纤维素柱层析,可从剑麻 Agave sisalana 叶汁中分离到一个均一的蛋白酶组分,其结晶为平面六边形。该酶可为半胱氨酸和 EDTA 所激活,受 PCMB(p-chloromercuribenzoatc)、DTNB(5,5′-dithiobis(2-nitrobenzoic acid))及 Hg~(2 )、Ag~( )、Cu~(2 )的可逆抑制和碘乙酸(pH 7.5)的不可逆抑制。该酶以酪蛋白为底物时,酶反应的最适 pH 值约为7.5,最适温度为50℃,Km 值为0.0625%酪蛋白,该酶在45℃(含45℃)以下较为稳定。且在6.0—10.0的 pH 值范围内稳定。     

丝氨酸蛋白酶抑制剂的研究及应用

丝氨酸蛋白酶抑制剂（serpin）是一类结构、序列同源的蛋白酶抑制剂,它是体内许多蛋白水解级联反应的调节因子,其遗传性结构或分泌异常将导致许多疾病．因此对于其结构及作用机理的研究将为临床应用提供依据．     

水稻巯基蛋白酶抑制剂的分子修饰与其对稻瘟病菌的抑制作用

水稻巯基蛋白酶抑制剂（ＣＰＩ）经用二硫苏糖醇,对氯汞苯甲酸和碘乙酸修饰后,对木瓜蛋白酶的抑制活性并无改变;用Ｎ－乙基顺丁烯二酰亚胺与ＣＰＩ反应,可以测出ＣＰＩ分子内有１９个巯基被修饰,被修饰后,抑制活性仍无改变,表明水稻ＣＰＩ的抑制活性不需要巯基参与;应用Ｎ－溴代丁二酰亚胺与ＣＰＩ反应,可测出ＣＰＩ分子内有２个Ｔｒｐ被修饰,修饰后,抑制活性全部丧失,表明Ｔｒｐ是保持抑制活性所必需的基团。水稻巯基蛋白酶抑制剂和丝氨酸蛋白酶抑制剂对稻瘟病菌丝体的生长均有抑制作用,但后者的抑制作用比前者更强,若将两种抑制剂混合使用,则对稻瘟病菌丝体的抑制作用非常强烈;当抑制剂加入量达７２μｇ时,即可产生明显的抑制作用。