超短脉冲技术测量癌细胞荧光光谱与荧光寿命

研究用于癌症诊断与治疗的光敏剂血卟啉（hematoporphyrin derivative,HPD）的超快光动力学过程,采用超短脉冲激光光谱技术和皮秒时间相关单光子计数系统,测量经血卟啉培养的活体癌细胞与正常细胞的荧光光谱、荧光寿命特性及荧光峰值强度随时间变化曲线,并测量单一细胞内部不同位置的荧光寿命特性,观测到：癌细胞样品在645 nm处具有特有的光谱谱峰;癌细胞样品荧光寿命的快成分约150 ps慢成分约1200 ps,而正常细胞样品快成分约300 ps慢成分约2500 ps;癌细胞样品的荧光峰值强度经12小时衰减约10%,而正常细胞样品衰减约55%;在细胞内部荧光寿命300 ps的快成分十分显著,且中心部位血卟啉浓度最高.癌细胞与正常细胞的荧光光谱、荧光寿命特性及荧光峰值强度随时间变化曲线相差十分明显,反映了癌细胞与正常细胞对血卟啉亲和特性有显著的差异,测量结果确认了荧光光谱技术诊断与治疗癌症的可行性,并对发展超短脉冲激光光谱技术早期诊断与治疗癌症具有重要的指导意义和临床应用价值.     

华南地区瓜类疫霉对甲霜灵的田间抗药性

【目的】了解华南地区瓜类疫霉(Phytophthora melonis)对甲霜灵的田间抗药性。【方法】2007-2010年从广西、广东两省(区)9个市冬瓜和黄瓜产区采集疫病样品,分离纯化瓜类疫霉,分别采用菌落生长速率法和叶盘漂浮法测定瓜类疫霉对甲霜灵的敏感性,并用药剂驯化方法从敏感性菌株诱导瓜类疫霉抗甲霜灵突变体。【结果】从9个市24个样点共分离纯化获得193株瓜类疫霉,抗药性检测结果表明,敏感菌株、中等抗性菌株和抗性菌株分别占测试菌株的29.0%、18.1%和52.8%;不同地区、不同寄主分离的菌株的抗性频率和抗性水平差异较大,来源于广东的菌株抗性频率和抗性水平一般高于来源广西的菌株,分离自黄瓜的菌株高于分离自冬瓜的菌株,大部分样点抗性菌株占据优势群体,个别菌株的抗性指数高达4226.9,叶盘漂浮法测定结果和菌落生长速率法相似;在含药平板上对敏感菌株进行甲霜灵抗性诱导结果表明,从60%的敏感菌株中成功诱导出对甲霜灵抗性稳定的突变体,突变体的抗性水平为敏感性亲本的189-407倍;9株来源于未施用过甲霜灵等苯基酰胺类杀菌剂样点的菌株均为敏感性菌株,其EC50值为0.0429-0.5461μg/mL,将它们EC50的平均值0.3200±0.1617μg/mL确定为华南地区瓜类疫霉对甲霜灵的敏感性基线;对两个样点的监测结果表明,瓜类疫霉抗甲霜灵菌株的频率及抗性指数有逐年增高趋势。【结论】华南广西和广东两省(区)瓜类疫霉对甲霜灵抗性普遍发生,瓜类疫霉对甲霜灵抗药性产生与其和药剂的接触密切相关。瓜类疫霉敏感性基线的建立,可为今后瓜类疫霉抗甲霜灵的评价和进一步监测提供科学依据。     

狭基线纹香茶菜中一个新的木脂类素化合物

从狭基线纹香茶菜（Ｉｓｏｄｏｎ ｌｏｐｈａｎｔｈｏｉｄｅｓ ｖａｒ．ｇｅｒａｒｄｉａｎｕｓ「Ｂｅｎｔｈａｍ」Ｈ．Ｈａｒａ）的乙酸乙酯部分分离得到两个木脂类素化合物,经１Ｄ、２Ｄ－ＮＭＲ技术鉴定,分别为１－ａｃｅｔｏｘｙｌ－２ｅ,６ｅ－ｄｉｐｉｐｅｒｏｎｙｌ－３,７－ｄｉｏｘａｂｉｃｙｃｌｏ－「３,３,０」－ｏｃｔａｎｅ（１）和１－ａｃｅｔｏｘｙｌ－２ｅ－ｐｉｐｅｒｏｎｙｌ－６ｅ－「６－ｍｅｔｈｏｘ     

草原矿区土壤环境损害基线评估判定的应用研究——以内蒙古草原矿区为例

草原生态环境损害评估鉴定中,土壤基线是重要的评价标准。如何确定土壤基线,寻找适宜的基线判定方法,进而判定草原土壤的受损害程度,已成为草原生态系统损害评估鉴定、生态系统保护及修复工作中的关键。基于科学、务实、准确的原则,对内蒙古2个草原矿区土壤的总有机质（TOM）、N、P、K含量进行采样分析,采用历史数据法、参考点位法和统计点位法来判定土壤基线。结果表明,胜利矿区土壤养分均值与参考点位法基线值差异较小,采矿对胜利矿区土壤养分含量未见直接的影响。宝日希勒矿区土壤中TOM含量均值明显低于3种方法得出的基线值,N、K均值与参考点位法基线值相似,P均值位于3种基线值之间。可见采矿对宝日希勒矿区土壤中TOM的含量造成了直接影响,对N、P、K含量未见直接的影响。最适宜该地区的方法取决于样本质量和评估尺度,建议以参考点位法为主,历史数据法和统计点位法作为验证工具,3种方法共同使用。     

生态环境损害鉴定评估业务化技术研究

随着社会经济的不断发展和人类需求的不断提高,我国生态环境损害事件屡有发生,由于人类活动导致的典型生态系统结构和功能退化、生态系统服务降低等生态环境损害严重威胁到我国的生态安全。系统研究典型生态系统生态环境损害基线、因果关系及损害程度的判定技术方法对保障国家生态安全和实现可持续发展具有重要的理论和实践意义。根据国家"十三五"《典型脆弱生态修复与保护研究专项指南》的要求,中国科学院大学牵头组织6家课题牵头单位联合申报了"生态环境损害鉴定评估业务化技术研究"项目,通过了专业机构组织的评审,获准立项。本文对该项目的研究背景、总体目标、主要内容及预期产出进行了介绍。该项目的开展将对典型生态环境损害评估提供决策支持,为国家在政策层面解决环境损害追责、环境执法与管理提供科学技术和平台支撑。     

我国韭菜主产区韭菜迟眼蕈蚊田间种群的抗药性监测

【目的】建立韭菜迟眼蕈蚊Bradysia odoriphaga Yang et Zhang对10种常用药剂的敏感基线,并对4省7个主要韭菜产区的田间种群进行6种常用杀虫剂的抗药性水平监测。【方法】采用胃毒触杀联合毒力法对韭菜迟眼蕈蚊3龄幼虫进行室内生物测定。【结果】建立了敏感品系对新烟碱类、有机磷类、菊酯类、昆虫生长调节剂类、吡咯类药剂的敏感基线。对7个地区的田间韭菜迟眼蕈蚊种群监测结果表明:其对有机磷类药剂均产生了抗药性,其中河南郑州种群对毒死蜱和辛硫磷产生了极高水平抗性;河南郑州种群对高效氯氰菊酯产生了中等水平抗性,其他各地区均处于敏感状态;大部分种群对新烟碱类药剂处于低等或中等水平抗性,但山东李坡种群对噻虫嗪产生了高水平抗性。【结论】本文建立的韭菜迟眼蕈蚊对10种杀虫剂的敏感基线及抗药性监测数据为抗性治理提供一定参考。     

马尾松花粉多糖中单糖组分的HPLC分析

目的：从马尾松花粉中分离得到40％、60％、80％浓度乙醇沉淀的三种多糖，对其单糖组成进行比较分析。方法：多糖经H2SO4水解后，用1-苯基-3-甲基-5-吡唑啉酮（PMP）柱前衍生，KH2PO4（pH5．6）-乙腈梯度洗脱，高效液相250nm紫外检测，其中单糖的色谱峰分离清晰，达到基线分离。结论：实验结果显示松花粉多糖中单糖系以葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸为主的杂多糖。并通过峰面积计算得到各单糖含量的摩尔比。     

内源性药物生物等效性试验的问题与对策

本文综述了内源性药物生物等效性试验常见的一些问题,如测定准确度、内源性物质基线水平差异、自身反馈调节等,并探讨了这些问题的解决对策。     

Is Tetranychus urticae suitable prey for development and reproduction of nafve Coleomegilla maculata？

The lady beetle Coleomegilla maculata De Geer is an omnivorous predator that could help suppress aphid and spider mite populations on plants in greenhouses, plantscapes or interiorscapes. We are assessing the nutritional requirements and feeding behavior of C. maculata on target prey （spider mites） and factitious （unnatural） food. Our ultimate goal is to develop an efficacious diet to mass produce C. maculata. In this study, we tested the hypothesis that Tetranychus urticae Koch （two-spotted spider mite） is not suitable prey for development and reproduction of naive C. maculata （i.e., with no prior exposure to T. urticae）. Our objectives were to （i） provide baseline data on the effects of consuming T. urticae on C. maculata life history, （ii） to compare the effects of consuming all stages of T. urticae versus eggs ofMusca domestica L. （common housefly）, and （iii） to determine if the consumption of plant products was beneficial. We used C. maculata from a colony reared only on Ephestia kuehniella Zeller （Mediterranean flour moth） eggs. In experiments, C. maculata larvae were reared from the first instar to adult stage with prey/food in replicated arenas; adult females were paired with a single male with prey/food. The results showed that naive C. maculata readily attacked and consumed T. urticae. Nevertheless, T. urticae was less suitable than M. domestica eggs for C. maculata development and reproduction. Applying a synthetic pollen-Chlorella alga powder （SPCA） in arenas containing T. urticae appeared to boost C. maculata female development and reproduction.     

分子串联重复策略用于制备超短肽

超短肽具有更好的稳定性、组织渗透性、生物相容性以及更低的免疫原性。GHK(glycyl-l-histidyl-l-lysine)和GQPR(glycyl-l-glutamyl-l-prolyl-l-arginine)具有刺激胶原蛋白产生、减缓胶原蛋白降解的作用,作为抗皱成分广泛应用于化妆品。超短肽一般都是通过固相合成方法制备,其缺陷是制备过程中大量使用有机化学试剂而造成环境负担,故本文探讨了一种设计和制备超短肽的新方法。因序列短而无法直接重组表达,文中首先构建了适用于融合表达的载体骨架pET28a-Trxm。以GHK和GQPR串联重复基因作为滚环扩增的基本单元(tandem repeat of short peptides,TRSP),反应时随机掺入5-甲基胞嘧啶获得长基因片段,然后经Acc65 Ⅰ和Apa Ⅰ消化产生随机长度的基因。胶回收500 bp到1500bp的DNA片段,克隆得到表达载体pET28a-Trxm-(TRSP)_n并转化获得重组菌。双酶切及测序结果表明,成功构建获得串联重复数n=1、2、3、4、6、7、8、9的阳性克隆。蛋白表达结果显示,当串联重复数n=1、2、3、4、8、9时均有相应融合蛋白表达,表达水平随着重复数增加而降低。Trxm-(TRSP)₁表达水平最高,达总蛋白的50%,而Trxm-(TRSP)₂表达水平为总蛋白的30%。进一步地,含Trxm-(TRSP)₁的清液先后经肠激酶和胰蛋白酶切割后,HPLC分析结果表明,成功获得超短肽GHK和GQPR。该结果对于超短肽重组制备的工业化应用具有重要价值。