抑制RANKL诱导破骨细胞分化的DNA适配子的筛选

目的:筛选能高特异性、高亲和力结合RANKL蛋白并有效抑制RANKL对破骨细胞诱导分化作用的DNA适配子。方法:首先,采用原核系统表达并纯化RANKL蛋白,通过SELEX(Systematic evolution of ligands by exponential)技术从人工合成的单链随机寡核苷酸文库中筛选能高特异性、高亲和力结合RANKL蛋白的DNA适配子。然后,用RNAfolding sever software分析适配子空间结构,以ELISA检测DNA适配子和RANKL亲和力大小并筛选出亲和力最高的一组DNA适配子用以验证DNA适配子对RANKL诱导破骨细胞分化的抑制作用。结果:(1)成功在原核系统表达并纯化RANKL蛋白;(2)筛选出能高特异性、高亲和力结合RANKL蛋白的12个DNA适配子。(3)与对照组相比,不同浓度DNA适配子能明显抑制TRAP阳性破骨细胞数量(P0.05),且浓度越高抑制效果越明显。结论:成功筛选出的DNA适配子能特异性结合RANKL蛋白并有效抑制RANKL对破骨细胞的诱导分化功能。     

脂肪酶假单胞菌的分离培养及最佳产酶条件研究

以麻疯树油为唯一碳源,从以粉碎的麻疯树种子处理过的土壤中分离筛选出1株脂肪酶活性较高的菌株,初步鉴定为假单胞菌属(Pseudomonas).实验观察了碳源、氮源、无机盐及发酵工艺对产酶的影响,摇瓶发酵结果表明.该菌株最适产酶培养基的组成是(%,w/v):橄榄油2,酵母膏0.5,(NH4)2SO4 0.5,MgCl2·6H2O 0.5,最适产酶温度为30℃,最佳产酶pH为6.5,转速180r/min,发酵培养36h酶活达到最高,为14.17U/mL.本研究为以麻疯树油为原料酶法生产生物柴油奠定了一定的基础.     

培养人皮下脂肪干细胞纵向分化的实验研究

目的:建立人脂肪干细胞(adipose-derived stem cells,ADSCs)分离、培养的方法,观察其生物学特性,探讨其纵向分化的能力.方法:自皮下脂肪组织获得梭形细胞,观察细胞生物学特征,免疫组化鉴定波形蛋白和CD44.以含有胰岛素、地塞米松、1.甲基-3-异丁基-黄嘌呤的无血清混合培养基诱导其向脂肪细胞纵向分化,以细胞形态学变化.油红O染色和测定甘油磷酸脱氢酶活性判定分化是否成功.结果:人皮下脂肪中能够分离培养出生长旺盛的脂肪干细胞,诱导培养7d后细胞由梭形逐渐变圆,胞质内出现脂滴后逐渐增多融合为脂泡,并与甘油磷酸脱氢酶活性变化相吻合.油红O染色显示约(78.6±2.2)%细胞转变为脂肪细胞.结论:人皮下脂肪中分离的脂肪干细胞在体外诱导条件下能纵向分化为脂肪细胞,可能成为修复软组织缺损及整形美容的又一干细胞来源.     

施用生石灰对精养池塘浮游细菌群落结构和多样性的影响

为研究施用生石灰对池塘浮游细菌群落结构和多样性的影响，采用基于16S rRNA的高通量测序技术比较分析了施用生石灰前后精养池塘浮游细菌群落结构和多样性差异。研究结果显示，施用生石灰进行处理1d后，池塘优势浮游细菌在门和属水平上均与施用前相同，但相对丰度产生变化。在门水平上，蓝细菌门（Cyanobacteria）的相对丰度由53.80%显著降低至47.57%，拟杆菌门（Bacteroidetes）的相对丰度由7.00%显著降低至5.24%，变形菌门（Proteobacteria）的相对丰度由19.72%显著降低至17.60%，而放线菌门（Actinobacteria）的相对丰度由6.76%显著上升至13.47%，浮霉菌门（Planctomycetes）的相对丰度由8.24%显著上升至11.10%。另外，在属水平上，分枝杆菌属（Mycobacterium）的相对丰度由0.73%显著降低至0.49%，浮丝藻属（Planktothrix）的相对丰度由0.041%显著降低至0.0074%。施用生石灰后池塘浮游细菌群落的物种丰富度指数（ACE和Chao 1）和Shannon多样性指数均显著提高，且Simpon指数显著降低（P < 0.05）。研究结果可为施用生石灰管理池塘水质和进行疾病预防提供理论解释，并可为更加科学合理地利用生石灰管理池塘提供科学指导。     

基于学习兴趣激发的生物教育潜能开掘研究

以上世纪八十年代初的改革开放为契机,我国的经济和社会发展完成了几次重大的转型,文教事业的改进和完善也在按部就班的进行。国家教育部在对相关工作改革的过程中注重知识的实际应用价值,提倡素质教育,广大教育工作者在生物学科教学的过程中也应该贯彻素质教育的理念,提高学生学习的兴趣和自主性。本文通过一定的分析和说明,对生物学科教学工作改进提出了一定的建议。     

核电站管道系统中碳钢管道安装前表面清洁工艺

本文探讨了成功完成当前世界首堆AP1000核岛工程柴油机厂房ZOS/DOS系统及厂区DOS系统管道表面预处理系统过程,提出运用于所有核电碳钢管道安装前的表面预处理清洁工艺,具有非常典型的指导意义。     

南海南沙海域沉积物中可培养微生物及其多样性分析

【目的】为了从南沙海域中分离获得微生物菌种资源，【方法】本文通过沉积物采样、可培养菌分离及16S rRNA鉴定，【结果】从22个站点的沉积物样品中获得349株细菌，分属于87个种。发现产芽孢细菌分布最广，并在10个站点的分离株中占多数；它们是Bacillus，Halobacillus，Brevibacillus，Paenibacillus，Pontibacillus和Thalassobacillus。其中芽孢杆菌（Bacillus）无论在数量上还是种类上都最多，分别属于34种，其中有8个可能的新种。此外，g-Proteobacteria是分离率较高的另一亚群；其中，假单胞菌（Pseudomonas），海杆菌（Marinobacter），食烷菌（Alcanivorax）属的细菌最多。统计还发现，在深度750~2000 m之间，低GC含量的细菌最丰富，而深度2000 m以下，分离株则全部为g-Proteobacteria。【结论】南沙沉积物可培养微生物中产芽孢细菌及 g-Proteobacteria比较丰富；其中，产芽孢细菌的多样性最高，具有进一步研究开发价值。