大鼠慢性多重应激模型的建立

目的:建立大鼠慢性多重应激模型,为研究应激性疾病提供实验模型.方法:健康雄性SD大鼠随机分为模型组(n=10)和对照组(n=10).模型组采用脉冲随机变动的噪声、夜间光照、足底电击以及强迫游泳和束缚的复合刺激为应激源,对大鼠实施刺激,观察行为变化,检测心率、血压、体重增长速率、食物利用率,测定血清ACTH和皮质酮并进行分析.结果:慢性多重应激大鼠由实验之初的兴奋状态逐渐进入抑制状态,血压心率上升,体重增长缓慢,食物利用率降低,血清ACTH和皮质酮增高.结论:慢性多重应激大鼠一般行为、基本生理体征和下丘脑-垂体-肾上腺轴(HPA)功能发生改变,应激反应处于持续亢奋状态,该模型是较稳定较理想的应激模型.     

围栏条件下母体密度应激对根田鼠 F1代性器官指数的影响

为探讨自然条件下母体密度应激对根田鼠F1代性器官指数的影响,通过在围栏内建立不同密度的母体种群获得相应的F1代个体,以此建立了不同密度的子代种群,并测定了母体种群建群者的血浆皮质酮含量,将建立子代种群后剩余的F1代个体带回实验室饲养.实验结束后,测定了全部F1代个体的性器官指数及皮质酮含量.结果表明,高密度母体种群建群者的皮质酮含量显著高于低密度母体种群建群者;出生于高密度母体种群的F1代个体处于高密度子代种群,其性器官指数显著低于出生于低密度母体种群且处于低密度子代种群的F1代个体,而皮质酮含量显著高于后者;出生于高密度母体种群的F1代个体处于低密度子代种群,其性器官指数及皮质酮含量与出生于低密度母体种群且处于低密度子代种群的F1代个体间无显著差异.此外,实验室饲养条件下,出生于高密度和低密度母体种群的F1代个体间的睾丸指数无显著差异.本研究结果说明,在根田鼠种群中,单一的母体密度应激对子代的性器官指数无影响,但生前应激子代在性成熟后,当再次遭遇密度应激时,其性器官指数显著降低,母体密度应激和当前环境对种群的未来繁殖能力具有耦合效应.     

繁殖期杂色山雀应激水平的皮质酮浓度 与繁殖投入的关系

皮质酮是鸟类重要的糖皮质激素,在其适应环境变化及压力应激反应中起重要的调节作用。非应激状态时,鸟类血浆皮质酮浓度处于基线水平,当鸟类面对应激刺激时,血浆皮质酮浓度迅速升高,应激水平的皮质酮对鸟类个体生存至关重要。然而,目前繁殖季鸟类血浆应激水平的皮质酮浓度变化及其与繁殖投入关系的研究结果存在种间差异,仍需在不同的物种中进行实验研究。本研究分析了繁殖季杂色山雀（Sittiparus varius）血浆应激水平的皮质酮浓度在繁殖阶段的变化,及育雏期亲鸟血浆应激水平的皮质酮浓度与繁殖参数和亲鸟育雏投入的关系。结果显示,与求偶期相比,育雏期杂色山雀亲鸟血浆应激水平的皮质酮浓度极显著升高（P < 0.001）,雌性与雄性亲鸟之间无显著性差异（P > 0.05）;雌性与雄性亲鸟血浆应激水平的皮质酮浓度与繁殖参数、亲鸟递食投入、巢防卫行为均无显著相关性（P > 0.05）。     

皮质酮诱导的PC12细胞梯度应激损伤模型的构建及评价*

目的: 建立皮质酮诱导的PC12细胞梯度应激损伤模型,为细胞应激水平的评估和细胞应激损伤调控研究提供实验基础和对象。方法: 通过检测不同浓度皮质酮(0~1 000 μmol/L)在经过不同干预时间(8~48 h)后PC12细胞活力,观察皮质酮对细胞活力的影响,筛选最佳干预条件的细胞模型。分光光度法和微量法检测细胞模型的关键应激指标(MDA、SOD、NADH、LDH),对模型进行评价。结果: 当皮质酮浓度在200 μmol/L以下且干预时间为12 h时,细胞活力在半数失活率以下,可减少各组由于细胞活力下降而产生的混杂因素。 与空白对照组比较,皮质酮浓度依赖性地升高模型组的MDA、NADH和LDH水平,降低SOD水平(P＜0.01),符合梯度应激模型的构建要求。结论: 成功建立了PC12细胞梯度应激损伤模型,在干预时间为12 h的情况下,干预浓度为0 μmol/L、25 μmol/L、50 μmol/L、100 μmol/L、150 μmol/L、200 μmol/L,使得细胞模型应激损伤程度梯度增加,可作为开展细胞应激损伤评估及调控实验的基础和对象。     

ACh受体在皮质酮引起的大鼠延髓腹外侧区前交感神经元反应中的作用

目的：研究乙酰胆碱（ACh)受体在皮质酮（CORT）对大鼠头端延髓腹外侧区（RVLM）前交感神经元快速效应中的作用,探讨糖皮质激素在交感心血管活动调节中的非基因组机制。方法：本研究采用细胞外记录和微电泳等方法观察CORT对氨基甲酸乙酯麻醉大鼠RVLM前交感神经元的作用,观察分别给予ACh受体拮抗剂阿托品（ATR）、筒箭毒（d-TC)或六烃季铵（C6）后CORT对RVLM前交感神经元的影响。结果：在RVLM共记录到33个前交感神经元,CORT能导致25（76％）个前交感神经元快速兴奋,且具有剂量依赖性,余8个前交感神经元没有反应;其中被CORT兴奋的10个单位微电泳ART后神经元的放电明显下降,但对CORT导致的兴奋作用没有明显的影响。分别向7和6个被CORT兴奋的前交感神经元微电泳d-TC和C6后,单位放电没有变化,同时对CORT导致的兴奋作用无影响。结论：CORT对RVLM前交感神经元具有快速的兴奋作用,这种作用可能并不通过ACh受体介导。     

皮质酮对高钾诱导PC12细胞内钙升高的非基因组调节作用

目的：分析皮质酮快速抑制高钾诱导PC12细胞内钙升高的机制。方法：使用荧光影像系统,实时检测细胞内钙变化。结果：①在预处理PC12细胞5min后,皮质酮可呈量－效关系抑制高钾诱导的PC12细胞内钙升高。②牛血清白蛋白耦联的皮质酮（B－BSA）可模拟皮质酮快速抑制高钾诱导PC12细胞内钙升高的作用,并呈现量－效关系。③糖皮质激素的细胞内受体拮抗剂RU38486对皮质酮快速抑制效应无明显拮抗作用。④蛋白合成抑制剂放线菌酮预处理细胞3h后,皮质酮对高钾诱导PC12内钙升高仍有较强抑制作用。结论：①皮质酮的作用点位于细胞膜上。②皮质酮的快速作用不直接依赖细胞内蛋白合成和不依赖细胞内糖皮质激素受体。③皮质酮对高钾诱导PC12内钙升高的快速抑制作用属非基因组作用。     

锌对体外应激海马神经元MTs亚型表达的影响

目的:观察不同锌水平对体外应激海马神经元金属硫蛋白(MTs)亚型表达的影响。方法:取新生1dWis-tar大鼠海马组织进行体外神经元培养,无血清培养24h后,分别向培养液中加入皮质酮、Zn2+特异鳌合剂TPEN,使二者的最终浓度均为1×10-5mol/L,然后加入不同浓度的ZnSO4溶液,使Zn2+的最终浓度分别为1×10-5mol/L、1×10-4mol/L和2×10-4mol/L,作用24h后检测培养液中IL-6和NO含量,以蛋白印迹法检测细胞MTs含量,以RT-PCR检测细胞MT-1mRNA和MT-3mRNA的表达水平。结果:在海马神经元培养液中加入TPEN后,MTs的表达出现明显降低,皮质酮刺激也未见其表达升高。在补锌组,MTs的含量均明显增加,其中以10-4mol/LZn2+组的表达量最高。海马神经元MT-1mRNA和MT-3mRNA的表达水平在皮质酮应激组和补锌组均出现明显升高。另外,锌缺乏和皮质酮刺激可使海马神经元培养上清中的IL-6和NO水平均出现明显升高。结论:不同锌水平对应激海马神经元金属硫蛋白及其亚型mRNA的表达具有调控作用,缺锌可降低金属硫蛋白的表达,而补锌可增加金属硫蛋白的表达。     

模拟高原低氧对新生大鼠肾上腺皮质功能发育的影响

本文探讨新生大鼠肾上腺皮质对高原低氧的应签及模拟高原低氧对其功能发育的影响。结果表明,当不同日龄大鼠于５ｋｍ及７ｋｍ海拔２４ｈ,７ｄ,１４ｄ龄大鼠肾上腺皮质无明显应答反应。２１ｄ及２８ｄ龄大鼠肾上腺皮质酮水平随海拔增高而增加,血浆皮质酮表现为抑制作用。     

根田鼠肾上腺皮质酮水平的日节律及急性低氧的影响

根田鼠肾上腺皮质酮水平的日节律及急性低氧的影响ＴＨＥＣＩＲＣＡＤＩＡＮＲＨＹＴＨＭＯＦＣＯＲＴＩＣＯＳＴＥＲＯＮＥＬＥＶＥＬＡＮＤＥＦＦＥＣＴＯＦＨＹＰＯＸＩＡＯＮＲＯＯＴＶＯＬＥ（ＭＩＣＲＯＴＵＳＯＥＣＯＮＯＭＵＳ）根田鼠（Ｍｉｃｒｏｔｕｓｏｅｃ...