P277多肽融合热休克蛋白65提高抗1型糖尿病的作用

为了提高P277肽抗1型糖尿病的作用, 把P277肽融合在卡介苗热休克蛋白65的C端, 构建了pET28a- HSP65-P277高效表达载体, 在大肠杆菌中高效可溶性表达。利用硫酸铵分级沉淀、阴离子交换柱层析分离纯化了融合蛋白HSP65-P277。使用HSP65-P277在没有任何佐剂存在的情况下免疫非肥胖性糖尿病(NOD)小鼠, 通过三次腹腔注射, 每月收集被免疫动物的血清, 血糖浓度用自动生化分析仪测定。结果显示HSP65-P277免疫组小鼠血糖平均值及糖尿病的累积发病率和其余组相比均有显著差异(P<0.01), 融合蛋白HSP65-P277抗NOD小鼠糖尿病的作用显著高于单独的P277和HSP65。为进一步开发能用于临床的1型糖尿病疫苗提供了良好的设计思路, HSP65-P277极有可能进一步发展成为新的抗I型糖尿病的疫苗。     

集胞藻PCC6803 priA基因的突变体

目前对蓝藻的高温耐受性研究主要集中在热激蛋白和光系统II放氧蛋白复合体的外周蛋白基因,如放氧蛋白复合体的3个外周蛋白基因psbO、psbU和psbV[1-4],热激蛋白基因htpG[5]和hsp17[6],而对于是否存在其他耐受高温所需基因尚未进行系统的筛选.     

皇甫川流域中国沙棘树干液流日变化及其相关因子

运用热耗散(TDP)法对皇甫川流域中国沙棘(Hippophae rhamnoides L.subsp.sinensis Rousi)的树干液流速率进行测定,用自动气象站同步连续监测太阳总辐射、空气温度、空气相对湿度、风速、10 cm处土壤温度等环境因子,用LI-6400系列光合仪同步测定每日6:00-18:00的沙棘叶蒸腾速率.结果表明:非降雨时段,沙棘树干液流速率日进程变化呈现明显的昼高夜低的起伏趋势,白天液流速率变化有波动,夜间液流速率变化缓慢;降雨时,在降雨的开始时段,沙棘树干液流速率明显增大,降雨中后期,液流速率明显减小并趋于平缓;以环境因子作自变量,以单位叶干质量的液流量为因变量,经过逐步回归,建立了多元线性模型,回归方程显著.     

系统理论指导下辩证思维模式与抗休克决策

休克是由于有效循环血量不足引发的微循环障碍而表现一系列症候群,作为一种系统性疾病,病因十分复杂多样,诊疗过程中的临床决策应全面而富有针对性,并充分考虑到救治措施的协调一致和互相配合。系统论主张整体大于部分之和强调的就是措施之间的整体化效果,充分考虑到患者个体间差异,辩证分析不同类型休克、不同个体间不同表现,在系统理论指导下的富有针对性措施间协调一致的决策模式才是较为完整的休克救治临床决策模式。     

从海洋生物鲎血中提取超氧化物歧化酶及其抗菌作用的研究

目的 综合利用鲎试剂生产的废料血浆提取超氧化物歧化酶 (Superoxide dismutase,SOD),探讨鲎血SOD对耐甲氧西林金色葡萄球菌(MRSA)、对甲氧西林敏感金色葡萄球菌(MSSA)、野生型绿脓杆菌(PAO1)、大肠杆菌(E.coli)的抑菌作用.方法 采用离心分离、丙酮沉淀、热变性去杂蛋白的方法从生产鲎试剂废料血浆中提取SOD,然后把SOD加入菌液培养,24 h后观察结果.结果 SOD对耐甲氧西林金色葡萄球菌、对甲氧西林敏感金色葡萄球菌、野生型绿脓杆菌、大肠杆菌的最低抑菌浓度分别为20.02,40.05,20.02,20.02 μg/ml.结论 本方法可成功地从生产鲎试剂废料血浆中提取得到SOD粗品,实验表明鲎血SOD具有抗菌作用.     

酸中毒条件下脓毒性休克大鼠胸主动脉对多巴胺反应性的变化

目的:观察不同酸中毒条件下正常大鼠和脓毒性休克大鼠胸主动脉对多巴胺反应性的变化。方法:采用离体血管灌流方法,观察对照组和脓毒性休克组大鼠胸主动脉在不同pH条件下的反应性变化。结果:pH值依次降低,对照组及脓毒性休克组离体胸主动脉对多巴胺反应性均下降,在相同pH值条件下脓毒性休克组比对照组离体血管对多巴胺反应性下降更为明显。结论:①环境pH值的下降会导致正常大鼠和脓毒性休克大鼠离体动脉对多巴胺反应性的下降。②在相同的酸性环境中脓毒性休克大鼠的血管对多巴胺刺激的反应性更差,更易失去活性。     

Q热疫苗研究进展

本文对Q热疫苗的研究进行了回顾、总结。灭活疫苗能刺激机体产生较强的抗Q热特异性体液免疫和细胞免疫，免疫保护效果好且持续时间长。但是，灭活疫苗有较强的副反应，可引起局部脓肿等副反应。减毒疫苗虽然免疫保护效果好，但可能有毒力恢复的危险。亚单位疫苗主要有CMR、TCAE和LPS，其中CMR和TCAE具有与灭活疫苗相近的保护效果，副反应很小，已进入临床研究。目前研究较多的保护性抗原蛋白有27kD、30kD、34kD、热休克蛋白等主要表面抗原，它们有可能发展成为重组亚单位疫苗。多价亚单位疫苗、DNA疫苗以及以活菌为载体的重组菌苗将是有前途的新型Q热疫苗。     

一种新的用于提高lea3基因扩增特异性和产量的增强剂（英文）

在对目的DNA序列尤其是高GC含量的片段进行PCR扩增的时候,经常需要对一些试验条件进行优化。在一定条件下,二甲基亚砜、甲酰胺、甘油、NP-40和Tween20等可以在某种程度上提高PCR的特异性和效率。我们在对禾本科lea3基因进行分离克隆时发现了一种新的可以提高PCR产量和特异性的物质——极高热稳定单链结合蛋白（ETSSB）,研究发现在每50μlPCR反应体系中加入200ng的ETSSB,可以有效地抑制DNA片段的非特异性条带的产生,并可以提高目的片段的产量。     

热休克预处理对TNF-α诱导的RAW264.7巨噬细胞迁移的影响

热休克反应是机体中一个重要的内源性保护机制,但其对TNF-α诱导的单核/巨噬细胞迁移有无影响目前尚不清楚.采用酶联免疫吸附实验观察TNF-α(20μg/L)刺激RAW264.7巨噬细胞4h后炎症因子IL-1β、IL-6、IL-15的表达情况;Western blot验证热休克预处理诱导热休克蛋白表达的增加;利用细胞趋化实验观察热休克预处理(42℃,1h)对TNF-α所致巨噬细胞迁移的影响.研究发现,TNF-α可明显促进RAW264.7细胞株中IL-1β、IL-6、IL-15等炎症因子的释放;热休克预处理诱导热休克蛋白HSP70、HSP90、HSP25表达增加;细胞趋化实验发现TNF-α处理的RAW264.7细胞迁移能力较正常对照组明显增强,而热休克预处理组巨噬细胞的迁移能力较单纯TNF-α处理组明显减弱.上述结果表明,热休克预处理抑制TNF-α所致巨噬细胞的迁移.