基于系统发育分析的DNA条形码技术在澄清芍药属牡丹组物种问题中的应用

清晰的物种概念是材料正确鉴定的基础,是DNA条形码技术应用的前提.本文通过芍药属牡丹组植物DNA条形码数据的系统发育分析,揭示牡丹组植物的进化谱系及其与分类上“物种”的关系.在此基础上分析DNA条形码技术在牡丹组植物中应用的可能性.同时,以芍药科芍药属牡丹组植物为例,讨论DNA条形码技术在应用中存在的问题与解决方案.研究材料包括牡丹组植物目前已知的几乎所有的变异类型（种或种下分类群）共40份.DNA序列来自叶绿体基因组ndhF,rps16-trnQ,trnL-F和trnS-G4个基因,共有（含插入/缺失）5040个位点,包含96个变异位点,其中信息位点69个;核基因组GPAT基因2093~2197bp,变异位点（含插入/缺失）总数279个,其中信息位点148个.叶绿体基因组与核基因组所揭示的包括四川牡丹、矮牡丹、卵叶牡丹和紫斑牡丹在内的进化线与根据形态所建立的物种限定不吻合：（ⅰ）叶绿体基因分化明显但核基因没有明显分化——四川牡丹和紫斑牡丹的各居群系统;（ⅱ）核基因分化显著而叶绿体基因分化很小——矮牡丹和卵叶牡丹.因为这些居群系统之间存在一定程度的地理隔离,但不存在生殖隔离,出现这种两个基因组数据背离的现象可能是由于不同居群系统在进化历史中捕获了其他居群系统的叶绿体基因组.这些基因作为牡丹组植物DNA条形码的适合性分析显示,叶绿体基因在种间或居群系统之间的变异是种或居群系统内变异的4.82倍,GPAT基因在种间或居群系统之间的变异是种或居群系统内变异的2.21倍,说明这些基因可作为牡丹组植物的DNA条形码.种间或居群系统之间完全分化位点的统计结果表明,这些种或居群系统之间存在相互区别所必需的位点.通过牡丹组植物DNA条形码分析,认为：（ⅰ）物种概念对DNA条形码技术能否成功应用有十分重要的影响,拟应用DNA条形码的类?     

马立克氏病病毒pp38／pp24聚合体结构及其对pp38基因上游双向启动子活性的影响

前期以氯霉素乙酰转移酶（CAT）活性为指标的研究证明了，马立克氏病病毒（Marek’s disease virus，MDV）的pp38和pp24的同时表达可显著增强基因组中pp38基因与1．8kb mRNA转录子之间双向启动子的转录活性．本研究又以增强型绿色荧光蛋白（EGFP）表达水平作为pp38基因上游双向启动转录活性的标志，更直观地证明了只有当同一细胞内同时表达pp38和pp24时，该启动子活性才有完整的启动活性．为了证明这两个蛋白能否相结合，分别以单独表达pp38或pp24的重组质粒pcDNA-pp38或pcDNA-pp24及能同时表达这两个基因的重组质粒pBud-pp38-pp24质粒转染鸡胚成纤维细胞（CEF），用pp38特异的单克隆抗体H19对转染细胞的裂解标记物进行免疫沉淀实验．结果表明，H19可沉淀pp38，但pp24只是在pp38同时存在时才被H19沉淀，而在pcDNA-pp24单独转染的处理样品中不能显示pp24的条带．这证明了，pp24是通过与pp38的结合而被共沉淀下来的，显示pp24和pp38在天然状态下可以形成异二聚体或多聚体．上述两个独立的实验结果表明，pp38和pp24是以聚合体的形式结合于该双向启动子发挥作用的．     

以油体作为生物反应器的研究进展

获得安全、经济、稳定具有生物活性的重组蛋白,应用于基础研究及临床应用是一个重大的战略课题,现在可以利用酵母、细菌和动物细胞生产多种药物蛋白,但这些蛋白的生产过程还存在许多问题.利用植物作为生物反应器生产药用蛋白和疫苗是目前生物反应器研究的热点.油体蛋白在油料作物种子中高水平表达且易于分离,经过改造后是生产目的蛋白的一种理想栽体.介绍了油体、油体蛋白的结构以及利用植物油体蛋白表达体系这一新型植物生物反应器生产目的蛋白的研究进展和前景.     

杀虫剂不同施用方式对烟蚜抗药性发展和羧酸酯酶活力的影响

室内模拟田间杀虫剂施药方式,研究3种杀虫剂连用及其顺序轮用对烟蚜Myzus persicae(Sulzer)抗药性发展和羧酸酯酶活力的影响。结果表明,氧化乐果、灭多威、高效氟氯氰菊酯连续施药9次后,其抗性分别增长73.3,8.9,10.4倍;氧化乐果→灭多威→高效氟氯氰菊酯顺序轮用3次(施药9次)后,氧化乐果抗性指数增长了47.3倍,灭多威抗性指数增长了6.7倍,高效氟氯氰菊酯抗性指数增长了5.0倍。羧酸酯酶活力检测结果表明,3种杀虫剂连用9次后,烟蚜种群的α-NACarE活力分别增长了20.0,24.0和15.6倍,酶活力在0.6(OD600nm/aphid/min)以上的个体比例分别增加了73.4%,87.6%和43.8%;而3种杀虫剂顺序轮用3次(施药9次)后,烟蚜种群的α-NACarE活力增长了10.2倍,酶活力在0.6以上的个体比例增加了4.8%。结果证实杀虫剂轮换施用能延缓烟蚜抗药性的发展和烟蚜种群α-NACarE活力及高活力个体频率的增加。     

解除休眠处理对凤丹种子萌发和幼苗生长的影响

凤丹种子具有很深的休眠特性。本实验以AgNO3、GA3、KT、TDZ和4℃低温处理凤丹种子，探讨解除其上胚轴休眠的途径。结果表明，AgNO3、GA3和低温（4℃）处理能加快凤丹种子萌发并提高发芽率，且不同程度地改善幼苗的鲜重、株高、根系等生长指标。     

利用DNA ISSR分子标记技术对芍药属植物栽培品种的分类鉴定方法

以利用DNA ISSR分子标记逐级区分品种为主要研究目标,通过ISSR引物的设计与实验筛选,取得了进展。该方法类似于经典的植物形态检索表式的分类策略,不同之处在于利用基因组DNA分子性状作为品种分类的依据,即"ISSR引物结合位点"与"DNA ISSR片段长度差异"的组合信息。该方法不仅可以有效鉴定品种,而且可以很容易地生成富含遗传变异信息的0、1矩阵,通过运算揭示品种间的遗传关系与演化规律。该方法成本低廉、操作便捷,对于建立客观、科学的牡丹及芍药品种分类体系,对于芍药属品种种质资源的保存、评价与合理利用具有重要价值。应该加大支持力度推进其实际应用。     

浅析补碘的误区

在教学中经常遇到这样的问题：最有效、安全、方便的补碘方法是什么?多数学生回答为服用碘油丸。由此可见，多数同学对补碘还存在着许多误区，具体分析如下：     

用海建设项目海洋生态损失补偿评估方法及应用

海洋生态补偿是一种防止海洋生态破坏、增强和促进海洋生态系统良性发展的环境政策,是用海者履行海洋资源有偿使用责任,对因开发利用海洋资源造成的海洋生态价值损失进行的货币化补偿。基于快速化、定量化和差别化补偿评估原则,编制了山东近海海域生态价值基准值表、生态损害系数表以及补偿系数表,建立了一种新的用海建设项目海洋生态损失补偿评估方法体系,包括占用海域和邻近影响海域的海洋生物资源和海洋生态系统服务两个方面的海洋生态价值损失补偿评估。针对2016年山东省5个典型用海项目,核算了其需要缴纳的海洋生态补偿资金,并与旧标准《山东省海洋生态损害赔偿和损失补偿评估方法》(DB37/T 1448—2009)的评估结果进行了对比。结果表明,按照本评估方法,用海企业需要缴纳的生态补偿资金会不同程度地提高,这将有利于用海企业增强资源有偿使用意识,引导企业理性用海,市场经济条件下这有利于海洋资源的优化配置,提高用海效率;另外,按照产业政策不同、受影响海域的生态脆弱性不同对用海建设项目造成的海洋生态损失进行差别化补偿,使得海洋生态补偿标准的评估结果更加科学合理。目前,该方法已经应用于山东海域7个沿海地市9个海区的海洋生态损失补偿评估中,被新发布的山东省地方标准《用海建设项目海洋生态损失补偿评估技术导则》(DB37/T 1448—2015)吸收采用。该评估方法可为海洋管理部门的生态资本核算、生态补偿核算、环评审批和发放许可证提供科学基础,对我国海洋生态环境保护和海洋经济绿色发展以及生态补偿制度实施具有积极推动作用。