蛋白质纯化虚拟仿真课程的教学设计

目的 蛋白质纯化是医学与生物学实验教学课程中的一个重要内容，本文通过设计新的蛋白质纯化虚拟仿真教学内容，开发虚拟仿真教学系统，希望学生能够更有效率地掌握蛋白质纯化技术的要点，提升教学质量。方法 利用3D虚拟仿真技术，构建虚拟仿真实验室。结合线下教学经验，确定虚拟仿真教学中需要体现的教学内容、教学重点、核心仪器的特色、评分指标、考核方式、操作体验等。结果 本文基于3D虚拟仿真技术构建了蛋白质纯化虚拟仿真实验室，和传统教学相比，虚拟仿真教学可以提高教学效率，节省教学成本和场地占用；教学设计和虚拟仿真教学系统融合了教学、练习和考核模块，根据以往的教学经验优化了评分体系，保证学生更加有效、严谨地掌握技术细节；涵盖了全新的教学内容——荧光检测联用的分子排阻层析，添加了蛋白质层析的常用案例，保证了内容的新颖与实用；完全再现了现实实验室中仪器设备的搭建模式，实现虚拟学习与实际操作的无缝衔接。结论 蛋白质纯化虚拟仿真教学系统由虚及实，由点及面，把控细节，保证学生动手能力和探索能力的提高，学以致用，并且拥有传统教学模式不可比拟的优势。     

蒜香藤叶挥发油的化学成分

蒜香藤（Pseudocalymma alliaceum Sandw．）又名紫铃藤,为紫葳科（Bignoniaceae）常绿藤状灌木,原产于南美洲的圭亚那和巴西。蒜香藤花、叶在搓揉之后,有浓浓的大蒜香味,其叶深绿富有光泽,花形大而优美,中国许多地方已引种栽培,一般作为篱笆、围墙美化或凉亭、棚架装饰之用。蒜香藤具有浓郁的蒜香,甚至可作为蒜的替代物用于烹饪。但有关其叶挥发性成分研究尚未见报道。本文利用气相色谱-质谱联用技术（GC—MS）分析了西双版纳植物园引种栽培的蒜香藤叶挥发油的化学成分,以期为合理开发和利用蒜香藤植物资源提供科学依据。     

巴戟天挥发性成分研究

目的：研究巴戟天中的挥发性成分。方法：利用水蒸气蒸馏法提取巴戟天（Radix morindae offtcinalis）挥发油,用GC—MS进行测定,结合计算机检索技术对分离的化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果：鉴定出34个化学成分,其中相对百分含量大于2％的分别确定为L-龙脑（Bomeol L）29．28％,α-姜烯（Alpha—Zingiberene）4．88％,2-甲基-6-对甲基苯基-2-庚烯（Ar-Cureumene）4．49％,1-己醇（1-Hexanol）3．40％,β-倍半水芹烯（beta—sesquiphellandrene）3．34％,2-戊基呋喃（2-Amylfuran）3．32％,正壬醛（n—nonanal）2．17％,樟脑（L—camphor）2．07％,β-没药烯（bete—Bisabolene）2．06％。结论：34个挥发性成分均为首次从该植物中得到。     

3种碱蓬属植物种子含油量及其脂肪酸组成研究

应用重量法和气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）对吉林省西部盐碱地生长的碱蓬、角碱蓬和翅碱蓬3种野生植物的种子含油量及脂肪酸成分进行了测定和分析。结果表明：碱蓬、角碱蓬和翅碱蓬种子含油量分别为24．39％、15．67％和15．80％。不饱和脂肪酸含量分别为88．65％、88．30％、88．50％。尤其是亚油酸含量较高,分别达56．94％、59．35％和60．86％。利用盐碱荒地种植碱蓬属植物。充分开发其在食用、医疗保健方面的应用价值。具有巨大潜力和广阔前景。     

三桠苦叶挥发油的化学成分

利用GC-MS联用技术研究了云南西双版纳产三桠苦(Euodia lepta)叶挥发油的化学成分,并应用色谱峰面积归一化法计算了各成分的相对含量。共分离出63个峰,确认了其中的43种成分,占挥发油总量的92．45％。三桠苦叶挥发油主要是单萜、倍半萜类化合物,其中马鞭草烯酮的含量最高,占挥发油总量的30．05％。     

川产苦丁茶的挥发油成分分析

本文采用GC-MS联用技术分析了粗壮女贞Ligustrum.Robustum(Roxb)Blume、丽叶女贞L．henryi Hemsl.、总梗女贞L.pedunculare Rehd叶挥发油的化学成分及相对含量,主要为萜烯类化合物等并做了比较。     

里氏木霉纤维二糖水解酶Ⅱ在毕赤酵母中的高效表达

本工作采用巴氏毕赤酵母Pichiapastoris表达系统进行了里氏木霉Trichodermareesei纤维二糖水解酶Ⅱ(CellobiohydrolaseII)的表达。用RT-PCR的方法从经稻草粉诱导的里氏木霉培养物中分离出纤维二糖水解酶Ⅱ的基因,将其插入到巴氏毕赤酵母的表达载体pPICZαA中,并使之处于α-因子信号肽序列的下游,得到重组质粒pPICZαA-cbh2。通过电穿孔的方法用线性化的pPICZαA-cbh2转化巴氏毕赤酵母GS115菌株,经过大量筛选后得到可以高效表达纤维二糖水解酶的毕赤酵母菌株P.pastorisCBHⅡ1。在甲醇诱导的条件下培养P.pastorisCBHⅡ1,培养液中的CMC活性可达到3.82U/mL,SDS-PAGE分析结果表明纤维二糖水解酶在P.pastorisCBHⅡ1中的表达量远远高于里氏木霉。对表达产物进行了LC-MS分析,结果表明所表达的蛋白为里氏木霉的纤维二糖水解酶。     

播娘蒿种子脂肪油组分的GC-MS分析

播娘蒿[Descurainia sophia（L．）Webb ex Prantl]为十字花科（Cruciferae）播娘蒿属（Descuainia Webb et Berth）1～2年生草本植物,其成熟的种子俗称南葶苈子,为临床常用中药材。葶苈子味辛、苦、大寒,具泻肺降气、祛痰平喘、行水消肿之功效。用于痰涎壅肺、喘咳痰多、胸肋胀满、胸腹水肿、小便不利、肺原性心脏病水肿等症。     

土茯苓挥发性成分研究

目的:研究土茯苓中的挥发性成分。方法:利用水蒸气蒸馏法提取土茯苓(Smilax glabraRoxb.)挥发油,用GC-MS进行测定,结合计算机检索技术对分离的化合物进行结构鉴定,应用色谱峰面积归一化法计算各成分的相对百分含量。结果:分离了40个化合物,鉴定出22个化学成分,占总挥发性成分的47.88%,其中相对百分含量大于1%的分别确定为棕榈酸17.87%,萜品烯-4-醇7.533%,亚油酸6.775%,正壬烷4.509%,8,11-十八碳二烯酸甲酯2.215%,α-雪松醇1.81%,甲基棕榈酯1.293%。结论:22个挥发性成分均为首次从该植物中得到。     

气相色谱-质谱联用技术及其在代谢组学中的应用

代谢组学是以高通量、高灵敏度、高分辨率的现代仪器分析方法为手段,对细胞、体液、组织中所有代谢物进行无偏向的定性与定量分析的一门学科。气相色谱-质谱联用技术具有较高的检测灵敏度和鉴定准确度,通过标准谱图库的比对可对代谢物进行快速的鉴定,因此被广泛应用于生物样品的代谢产物的检测中。文中对近年来气相色谱-质谱联用技术的发展以及在代谢组学研究中取得的成果进行了综述。首先介绍了气相色谱-质谱联用技术的分类和常用的样品衍生化方法;继而从样品预处理、定性与定量分析、数据分析三方面介绍了气相色谱-质谱联用技术分析代谢物的方法,并系统地对该技术在微生物、植物、疾病诊断领域的应用实例进行了评述;最后提出了当前气相色谱-质谱联用技术在代谢组学研究中存在的问题并对后续的研究进行了展望。