猴T淋巴细胞趋向性病毒1型双抗原夹心ELISA检测试剂盒的研制

目的研制灵敏度和特异性高的检测实验猴血清中T淋巴细胞趋向性病毒-1型（STLV-1型）／E体的双抗原夹心ELISA（dsELISA）检测试剂盒。方法采用经原核表达系统表达并纯化的人T淋巴细胞白血病病毒-1型（HTLV-1型）的Env蛋白作为包被用抗原，建立了检测STLV-1的dsELISA诊断方法。通过优化反应条件和筛选试剂，确定了dsELISA诊断试剂盒的相关条件，并经敏感性、特异性和重复性试验考查该试剂盒质量。结果试剂盒特异性好，批内重复试验变异系数（CV）〈7％，批间重复试验CV〈10％。对200份猴血清进行随机检测，与国际公认的诊断试剂盒（美国BioReliance公司）的符合率为97％。结论本试剂盒可初步应用于临床上实验猴STLV-1型抗体的检测。     

假单胞菌DLL-E4尿黑酸降解基因的克隆与功能的初步分析

通过接合转移将质粒pSC123上的转座子Tn5随机插入到DLL-E4基因组DNA中,从大约8,000个突变子中筛选到1株在LB培养基上积累红褐色物质的突变株M18,该突变株不能以L-苯丙氨酸(L-Phenylalanine, Phe)为唯一碳源生长。SEFA-PCR扩增转座子侧翼序列发现其与已报道的尿黑酸1,2-双加氧酶基因hmgA的同源性为92%。将hmgA定向克隆至表达载体pET-29a中,转化至Escherichia coli BL21,经IPTG诱导后可表达分子量约为48kD的蛋白;诱导后转化子粗酶液对尿黑酸有很好的降解效果。将hmgA连入自杀性载体pEX19Gm,通过同源重组整合至M18染色体中,使其恢复了DLL-E4利用Phe的能力,证实了HmgA是尿黑酸苯环裂解酶。     

皇甫川流域中国沙棘树干液流日变化及其相关因子

运用热耗散(TDP)法对皇甫川流域中国沙棘(Hippophae rhamnoides L.subsp.sinensis Rousi)的树干液流速率进行测定,用自动气象站同步连续监测太阳总辐射、空气温度、空气相对湿度、风速、10 cm处土壤温度等环境因子,用LI-6400系列光合仪同步测定每日6:00-18:00的沙棘叶蒸腾速率.结果表明:非降雨时段,沙棘树干液流速率日进程变化呈现明显的昼高夜低的起伏趋势,白天液流速率变化有波动,夜间液流速率变化缓慢;降雨时,在降雨的开始时段,沙棘树干液流速率明显增大,降雨中后期,液流速率明显减小并趋于平缓;以环境因子作自变量,以单位叶干质量的液流量为因变量,经过逐步回归,建立了多元线性模型,回归方程显著.     

CLUE-S模型在南京市土地利用变化研究中的应用

土地利用/覆盖变化模型是研究区域景观动态并解释其驱动机制的重要技术手段.应用CLUE-S模型,在Landsat TM影像等相关数据支持下,对南京地区1998-2006年土地利用的时空动态变化进行了研究.结果表明:各土地利用类型变化受地形因素影响最大,人均GDP与城镇用地和农业用地的分布呈显著相关,城乡主干道对土地利用变化的贡献显著大于省级及以上道路;海拔较高区域林地的发生比率较高,而地形低平区域农田、城建用地的发生比率较高.经检验,在300 m空间分辨率水平,对南京地区2003年、2006年土地利用状况模拟的精度分别达到了85.7%和84.1%;而通过将研究区分成若干子区,分别修正模型参数并重新模拟,准确率提高到89.7%和88.3%,分区赋值法有效地提高了模拟精度.研究表明,CLUE-S模型对城市发展的空间结构也有较强的预测能力,对指导城市规划、分析景观动态的驱动机制有重要参考价值.     

不同剂量右美托嘧啶对胸腔镜下食管癌根治术患者心肌氧供及血流动力学的影响

目的:探讨不同剂量右美托嘧啶(DEX)对胸腔镜下食管癌根治术患者心肌氧供及血流动力学的影响。方法:选取66例我院拟行腔镜下食管癌根治术患者,随机分为三组,每组各22例:低剂量右美托嘧啶组(L组)(0.5μg/kg)、高剂量右美托嘧啶组(H组)(1.0μg/kg)、对照组(N组)(与L组和H组同等速率输注生理盐水),而后H组和L组均以0.5μg/kg/h维持输注DEX。记录各组输注前(T1)、输注后5 min(T2)、输注后10 min(T3)、输注后15 min(T4)、输注后30 min(T5)各组血流动力学指标:心率(HR)、收缩压(SBP)、平均动脉压(MAP)、每搏输出量(SV)、中心静脉压(CVP)、心排量(CO),计算HR与SBP的乘积RPP,抽取挠动脉和肺动脉血进行动脉血气分析,采用反向FICK法计算氧供(DO2)和氧耗(VO2)。结果:HR:H组和L组患者HR随时间的推移呈下降趋势,H组T3、T4、T5时间点HR较T1时间点显著降低(P0.05);与N组相比,H组和L组T3、T4、T5时间点HR显著降低(P0.05)。MAP:H组T3、T4、T5时间点MAP显著低于L组(P0.05);H组T3、T4时间点MAP显著低于N组(P0.05);H组T5时间点MAP显著低于同组T1、T2时间点(P0.05)。SBP:H组T3、T4、T5时间点SBP与L组和N组比较显著降低(P0.05);H组T5时间点SBP较同组T1、T2时间点显著降低(P0.05)。RPP:H组T3、T4、T5时间点RPP与同组T1、T2时间点和N组比较显著降低(P0.05)。DO2:H组T5时间点DO2与L组和N组比较显著降低(P0.05)。VO2:L组患者VO2T3、T4、T5时间点与组内T1、T2时间点和N组相比显著降低(P0.05);H组VO2T3、T4、T5时间点与组内T1、T2时间点和N组相比显著降低(P0.05)。结论:小剂量(0.5μg/kg)输注DEX能降低胸腔镜下食管癌患者心肌氧耗,维持血流动力学稳定,高剂量(1.0μg/kg)输注DEX降低心肌氧耗的同时会降低心肌氧供,存在一定风险,对于患有冠心病以及心肺功能低下的老年患者,建议给予小剂量输注DEX,并监测血流动力学指标,及时调整DEX用量。     

高寒生态脆弱区农户的气候变化适应策略评价——以甘南高原为例

气候变化加剧了高寒生态脆弱区农户的生计脆弱性,为应对气候变化,农户已采取了各种响应措施,当前急需评估农户所采取适应策略的效果,以便选择更有效的适应策略。以甘南高原为研究区,基于入户调查数据分析了农户所采取适应策略的特征,采用模糊综合评价法分析现行适应策略的效果,并利用多准则决策模型确定了最优的气候变化适应策略。结果显示:(1)甘南高原农户多采取组合型策略应对气候变化,尤以调整+扩张型策略为主;(2)甘南高原农户所采取气候变化适应策略的效果较好,效益指数为3.43。其中,农区农户的适应策略效果最好、半农半牧区次之、纯牧区最差;(3)甘南高原不同区域农户筛选的最优策略存在差异。其中,纯牧区和半农半牧区农户筛选的最优策略为调整农牧业结构,而农区农户为完善农牧业基础设施。最后,提出了提高农户适应策略效果的对策建议及未来研究中需进一步关注的问题。     

光化学法脑缺血后细胞凋亡及其相关基因bcl-2表达的变化

采用ＴＵＮＥＬ染色及免疫组织化学技术对光化学法脑缺血后细胞凋亡及其相关基因ｂｃｌ－２表达的变化进行了研究。结果发现，缺血后１２ｈ，损伤侧皮层缺血区内凋亡细胞数及ｂｃｌ－２免疫反应阳性细胞数明显增加，一直持续至缺血后７２ｈ；并呈现下列时程变化：在缺血后３ｈ每张切片上几乎无凋亡细胞出现，以后逐渐增加，缺血后１２ｈ达到峰值，缺血后２４ｈ和缺血后７２ｈ逐渐减少，但仍高于假手术组水平。凋亡相关基因ｂｃｌ－２的表达在缺血后３ｈ以前不明显，缺血后１２ｈ逐渐增加，缺血后２４ｈ最多，以后逐渐下降。上述结果提示，缺血后凋亡细胞的时程变化可能与缺血后梗塞灶的发生和发展有关，而ｂｃｌ－２表达的变化可能与抑制细胞凋亡、发挥内源性细胞保护作用有关。     

基于Desirability函数法对米根霉发酵制备富马酸的多目标优化

以富马酸产量和生产速率为目标，通过正交实验考察了种龄，接种量，葡萄糖和尿素浓度对两者的影响，进一步利用基于响应曲面方法的Desirability函数确定了葡萄糖和尿素的最佳浓度。结果表明，最佳的种龄和接种量分别为36h和15%，葡萄糖和尿素的优化浓度为132.73和0.0586g/l，此时模型预测的富马酸产量和生产速率达到71.42g/l和0.804g/(l.h)，Desirability的函数值高达0.966。该条件下在5L发酵罐水平上进行验证试验，经过88h的发酵最终生成富马酸66.5g/l，生产速率达到0.755 g/(l.h)，与未优化前相比，产量和生产速率分别提高了13.9%和15.8%，取得了理想的效果，实现了产量和生产速率的同时优化，为发酵法制备富马酸的工业化放大奠定了基础。     

补肾温阳化瘀法对子宫内膜异位症患者子宫内膜腺上皮细胞OPN与MMP-9的影响

目的:探讨补肾温阳化瘀法对子宫内膜异位症患者子宫内膜腺上皮细胞骨桥蛋白(OPN)与基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响。方法:选择我院2013年4月~2016年4月收治的92例子宫内膜异位症患者,分为对照组与观察组,各46例,对照组行常规西医治疗,观察组行补肾温阳化瘀法治疗,比较两组OPN及MMP-9,雌二醇(E2)、促黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8),CD3~+、CD4~+、CD8~+、CD4~+/CD8~+,临床疗效及安全性。结果:治疗后,观察组OPN、MMP-9,TNF-α、IL-6、IL-8,CD8~+低于对照组,观察组CD3~+、CD4~+、CD4~+/CD8~+高于对照组,差异有统计学意义(P0.05)。观察组总有效率高于对照组,不良反应率低于对照组(P0.05)。结论:补肾温阳化瘀法可下调子宫内膜异位症患者子宫内膜腺上皮细胞OPN及MPP-9表达。     

普伐他汀大鼠在体肠吸收动力学

目的:研究普伐他汀在大鼠小肠的吸收情况。方法:采用大鼠在体小肠回流实验装置,利用HPLC紫外检测的方法测定肠循环液中酚红和普伐他汀的含量。采用XTerra@MS C-18色谱柱(5μm,150mm×2.1 mm.ID),流动相为3.5 mmol/L磷酸二氢钠溶液—乙腈(70:30,用磷酸调至pH 3.0),流速为0.2ml/min;结果:普伐他汀在大鼠小肠全肠段的吸收速率常数和吸收百分率分别为0.110±0.023(h~(-1))和18.21±2.50%。普伐他汀在小肠中吸收量与时间呈线性关系,但吸收速率较低。结论:普伐他汀可以通过增加药物的脂溶性,进而提高药物的生物利用度。