旋转磁场治疗印^60CO辐射造血损伤小鼠生存分析的实验研究

目的：初步探讨旋转恒定磁场治疗急性骨髓型放射病的效果。方法：BALB／C小鼠按体重随机分为磁疗组和对照组，每组再各分为4组．分别接受0Gy、6．0Gy、8．0Gy、10．0Gy ^60COγ射线全身辐射，照后，对照组不作任何处理，磁疗组接受磁场处理30d，每天2次，每次1．5h，旋转磁场强度为0．6T，比较两组小鼠30d的存活率和存活期。结果：单纯磁场处理对正常小鼠生存状态及存活率无明显影响；10．0Gy组和8．0Gy组小鼠生存率磁疗组与对照组之间比较均无统计学差异（P〉0．05）；6．0Gy组生存率磁疗组和对照组之间比较有统计学差异（P〈0．05），其磁疗组30d平均存活率为71．43％，平均存活期为（24．93±8．43）d，对照组30d平均存活率21．4l％．平均存活期为（17．07±7．70）d。结论：旋转恒定磁场不能提高10．0Gy及8．0Gy剂量所致极重度急性骨髓型放射病小鼠的生存率，但对6．0Gy所致重度急性骨髓型放射病有明显的保护作用，从而为旋转恒定磁场应用于临床治疗重度急性骨髓型放射损伤提供了实验依据。     

P277多肽融合热休克蛋白65提高抗1型糖尿病的作用

为了提高P277肽抗1型糖尿病的作用, 把P277肽融合在卡介苗热休克蛋白65的C端, 构建了pET28a- HSP65-P277高效表达载体, 在大肠杆菌中高效可溶性表达。利用硫酸铵分级沉淀、阴离子交换柱层析分离纯化了融合蛋白HSP65-P277。使用HSP65-P277在没有任何佐剂存在的情况下免疫非肥胖性糖尿病(NOD)小鼠, 通过三次腹腔注射, 每月收集被免疫动物的血清, 血糖浓度用自动生化分析仪测定。结果显示HSP65-P277免疫组小鼠血糖平均值及糖尿病的累积发病率和其余组相比均有显著差异(P<0.01), 融合蛋白HSP65-P277抗NOD小鼠糖尿病的作用显著高于单独的P277和HSP65。为进一步开发能用于临床的1型糖尿病疫苗提供了良好的设计思路, HSP65-P277极有可能进一步发展成为新的抗I型糖尿病的疫苗。     

A型激酶锚定蛋白及其复合物结构与功能

A型激酶锚定蛋白(A-kinase anchoring proteins，AKAPs)是一类结构不同而功能相关的蛋白家族，其主要功能是将cAMP依赖性蛋白激酶A（PKA）锚定于特定的亚细胞结构.PKA是第二信使cAMP的主要效应器，而AKAPs在靶向定位和调节PKA介导的磷酸化事件方面扮演重要角色. AKAPs更为重要的功能是与多种信号分子形成信号复合物，从时间和空间上整合cAMP-PKA和其他信号途径.本文将对AKAPs及其信号复合物的结构特点和参与细胞信号转导的功能机制及其研究现状进行概述.     

大肠埃希菌耐药性水平传播实验研究

目的研究重症监护病房（ICU）患者标本中分离的大肠埃希菌的耐药情况以及耐药性水平传播的实验研究。方法采取双纸片法（K-B）检测细菌的耐药性；产超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）大肠埃希菌为供体菌，耐利福平大肠埃希菌（对其他抗生素敏感）作为受体菌进行接合实验；采用聚合酶链反应（PCR）技术扩增整合子和耐药基因。结果30株大肠埃希菌中产ESBLs菌株检出率为46．7％；接合培养后，接合菌携带23kb和25kb大质粒，而无供体菌中一系列小质粒；供体菌和接合菌均携带I型整合子。结论大肠埃希菌耐药性严重，且呈多重耐药性；产ESBLs菌株可通过质粒和整合子将耐药基因转移给敏感菌，导致耐药性传播。     

亚抑菌浓度头孢西丁对耐药质粒接合转移的影响

目的探讨亚抑菌浓度头孢西丁对耐药质粒接合转移的影响,研究病原菌耐药性播散的产生机制。方法采用聚合酶链反应（PCR）分析临床分离的63株产ESBLs肺炎克雷伯菌株SHV型β-内酰胺酶编码基因。质粒接合转移试验采用肉汤接合法。研究不同亚抑菌浓度头孢西丁（0、1、0.5、0.25、0.125μg/ml）和不同作用时间（2、4、6、8、10、12 h）下临床产ESBLs肺炎克雷伯菌株供体菌与受体菌E.coliC600接合转移频率的变化。结果63株临床分离的产ESBLs肺炎克雷伯菌株有41株扩增出SHV型基因,阳性率为65.08%。随着亚抑菌浓度头孢西丁作用时间的增加,接合转移频率有随之增加的趋势。在相同作用时间下,头孢西丁浓度0.125μg/ml作用下的接合转移频率高于其他亚抑菌浓度的作用。结论应合理使用抗菌药物,减少抗菌药物的选择性压力,防止耐药细菌传播。     

猴T淋巴细胞趋向性病毒1型双抗原夹心ELISA检测试剂盒的研制

目的研制灵敏度和特异性高的检测实验猴血清中T淋巴细胞趋向性病毒-1型（STLV-1型）／E体的双抗原夹心ELISA（dsELISA）检测试剂盒。方法采用经原核表达系统表达并纯化的人T淋巴细胞白血病病毒-1型（HTLV-1型）的Env蛋白作为包被用抗原，建立了检测STLV-1的dsELISA诊断方法。通过优化反应条件和筛选试剂，确定了dsELISA诊断试剂盒的相关条件，并经敏感性、特异性和重复性试验考查该试剂盒质量。结果试剂盒特异性好，批内重复试验变异系数（CV）〈7％，批间重复试验CV〈10％。对200份猴血清进行随机检测，与国际公认的诊断试剂盒（美国BioReliance公司）的符合率为97％。结论本试剂盒可初步应用于临床上实验猴STLV-1型抗体的检测。     

转水稻粗缩病毒运动蛋白缺陷型基因玉米的二重PCR检测

以外源基因(RDV MP-)和玉米内源基因Zein作为PCR扩增对象,旨在建立一种简便有效的转基因玉米及其产品的二重PCR检测技术.转外源基因(RDV MP-)材料的常规PCR检测结果证明外源基因在转基因材料中可稳定遗传;对常规PCR检测的阴性结果材料进行二重PCR检测,扩增结果除进一步证实常规PCR检测的阴性结果结论外,还证明提取的植物总DNA质量符合试验要求,进而从二重PCR检测结果还得出常规PCR检测的阴性结果出错率为1.4%.此方法简单,实用,结果可靠,可适用于转基因植物及产品的检测.     

质粒pRSET-A前导肽串联多聚体的构建及其多克隆抗体制备*

质粒pRSET-A是一个常用的高效原核表达载体，编码一N端含组氨酸标签（6×His）的34aa前导肽序列，以方便利用抗组氨酸标签抗体鉴定或纯化所表达的重组蛋白。本实验设计一对两侧含编码疏水性氨基酸密码子的引物，经过扩增前导序列10~34aa基因序列，并重新克隆入质粒pRSET-A构建串联二聚体后，再利用质粒pRSET-A的BamH I / Bgl II同尾酶克隆位点，经一系列简单的酶切和连接，快速构建这一前导肽中不含组氨酸标签序列的串联多聚体基因，并成功表达其六聚体重组蛋白。将此重组蛋白主动免疫山羊，获得了能够特异地识别pRSET-A编码的N端前导肽序列的抗体。结果显示，所制备的羊抗10~34aa前导肽抗体能够识别pRSET-A指导表达的含有完整前导肽的重组蛋白，但不能识别不含10~34aa序列的重组蛋白；同时，利用同位酶技术可以快速高效构建短肽的串联多聚体以制备具有高免疫原性的亚单位疫苗或免疫调控物质。     

短期胰岛素泵强化治疗对2型糖尿病患者血脂血糖水平的影响

目的:探讨短期胰岛素泵强化治疗对2型糖尿病患者血脂血糖代谢的影响。方法:选取76例2型糖尿病患者,按给药方式不同分为两组,对照组(38例)给予门冬胰岛素常规治疗,观察组(38例)给予胰岛素泵强化治疗,依据两组治疗前后的血糖、血脂指标变化及治疗前、治疗后1周、2周的ADL量表评分评价短期胰岛素泵强化治疗对2型糖尿病患者血脂血糖代谢的影响。结果:治疗后,两组患者的空腹血糖(FPG)、糖化血红蛋白(Hb Alc)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平均较治疗前显著降低,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平均明显升高,且观察组FPG、Hb Alc、TC、TG、LDL-C水平均明显低于对照组,HDL-C水平显著高于对照组(P0.05)。治疗后1周、2周,两组ADL评分均较治疗前明显提高,且观察组显著高于对照组(P0.05)。结论:短期胰岛素泵强化治疗能显著改善2型糖尿病患者的血糖血脂代谢紊乱,并提高患者的日常生活能力。     

马桥园艺场植Ⅰ型智能温室计算机自控系统实施方案

介绍了植Ⅰ型智能温室计算机自动控制系统的实施方案。该方案设置了31个传感器、16路监视单元和45路控制执行机构。自控的分析和应答可在单板机和中心控制软件两个层次上实现。根据上海的地理位置，夏季防止温度过高是该方案考虑解决的主要工况。