一种新的内源性钠泵抑制因子前海葱苷原A样物质在牛体内的分布

为了建立一种蟾蜍二烯羟酸内酯（ｂｕｆａｄｉｅｎｏｌｉｄｅｓ）前海葱苷原Ａ免疫方法，并对哺乳动物体内的前海葱苷原Ａ样物质进行检测，我们制备了兔和羊前海葱苷原Ａ抗体。利用ＥＬＩＳＡ法检测了一种新的内源性钠泵抑制因子前海葱苷原Ａ样物质在牛的肾上腺、丘脑、心脏、肾脏、肝脏、小脑、骨骼肌和血液中的分布。研究发现这种前海葱苷原Ａ样物质在肾上腺及下丘脑的含量高于其它腺体组织，其具有抑制人红细胞８６Ｒｂ摄取的特性，可与前海葱苷原Ａ抗体发生免疫交叉反应，但几乎不与哇巴因抗体交叉反应，是一种新的类固醇激素     

用抗体稳定活性蛋白质的研究进展

蛋白质类药物在体内的半衰期短，主要原因是体内蛋白酶降低。利用抗体稳定活性蛋白质是一种较有前途的解决方法。本文介绍该方法的理论基础，以及随着抗体技术的进展（血清我克隆抗体→单克隆本→基因工程抗体）而提出的新的研究策略，这样为抗体稳定活性蛋白质开辟一条新的途径。     

肿瘤特异性蛋白B7-H4纳米抗体的筛选和鉴定

羊驼体内存在天然缺少轻链的重链抗体,克隆重链抗体可变区(VHH),即可构建单域抗体(single-domain antibodies,sdAbs),又称纳米抗体(nanobody,Nb)。利用非免疫羊驼噬菌体文库筛选肿瘤特异性蛋白B7-H4的纳米抗体,经过4轮淘选,ELASE鉴定阳性克隆噬菌体,测序获得其DNA序列后体外转录为mRNA,将修饰纯化后的mRNA转染到肿瘤细胞,利用细胞免疫荧光检测mRNA在肿瘤细胞内是否表达,Western印迹进一步验证其表达情况;通过CCK-8法鉴定其对肿瘤细胞的增殖抑制能力;划痕实验鉴定其对肿瘤细胞迁移能力的影响;Transwell法鉴定其对肿瘤细胞的侵袭能力的影响;裸鼠荷瘤模型瘤旁注射mRNA,鉴定其在体内实验对肿瘤组织的作用。结果显示,通过淘选获得1个高亲和性的噬菌体株菌H6;DNA测序并导出的氨基酸序列符合羊驼纳米抗体结构;将其mRNA导入肿瘤细胞,能有效表达出纳米抗体H6;转染H6-mRNA的肿瘤细胞(0.84±0.08)与未转染H6-mRNA的对照组(1.83±0.04)相比,其增殖能力明显受到抑制,P<0.01,其迁移和侵袭能力(78.60±5.36)明显低于空白对照组(197.80±21.04),效果优于B7-H4 mRNA的siRNA(95.40±16.56);在裸鼠乳腺癌模型中能有效抑制肿瘤生长,效果优于紫杉醇和B7-H4 mRNA的siRNA。这说明筛选所得抗B7-H4纳米抗体H6能特异结合B7-H4蛋白并封闭其功能,导致肿瘤细胞的增殖、迁移和侵袭受到抑制。该结果为利用B7-H4作为治疗癌症的靶点提供了实验基础。