独岛枝芽胞杆菌MCCC 1A00493产生的4-乙烯基苯酚鉴定和作用南方根结线虫特性研究

【目的】根结线虫危害严重,难防难控,前期研究发现一株深海来源的独岛枝芽胞杆菌(Virgibacillus dokdonensis) MCCC 1A00493对南方根结线虫具有良好的体外拮抗效果,本研究分离鉴定菌株发酵液中杀线虫活性物质,对其作用线虫的多种模式进行研究,为菌株有效控制植物病原线虫的应用奠定理论基础。【方法】采用硅胶柱层析和半制备高效液相色谱对独岛枝芽胞杆菌发酵上清液中的杀线虫活性物质进行分离纯化,采用液相色谱质谱联用、核磁共振对纯化物进行结构鉴定;并对其趋避、诱杀、熏杀和卵孵化抑制活性进行检测。【结果】结构鉴定确定独岛枝芽胞杆菌MCCC 1A00493发酵液中分离的杀线虫活性物质为4-乙烯基苯酚。4-乙烯基苯酚对线虫具有触杀、熏杀、卵孵化抑制和高浓度驱避低浓度引诱活性,15μg/mL 4-乙烯基苯酚72 h触杀线虫校正死亡率为71.23%±9.06%;20 mg/mL 4-乙烯基苯酚24 h熏杀线虫死亡率达100%;100μg/mL4-乙烯基苯酚作用线虫卵10d后,卵孵化抑制率达66.2%;在琼脂平板上,10mg/mL的4-乙烯基苯酚对线虫有驱避作用,1 mg/mL的4-...     

金属硫蛋白的功能及应用前景

金属硫蛋白(Mt)是科学家margoshes和vallee发现的,它是一种低分子量,富含半胱氨酸可结合重金属的蛋白质.与调节细胞生长与增殖的金属调节蛋白有关,分布在哺乳动物组织器官中.人们为了能清肿瘤产生的过程,尝试了各种生物标记物,例如,癌基因、p53抑癌基因、waf1蛋白质、多育细胞核抗原、端粒转移酶、小随体标记物.人们发现在人类各种肿瘤中都有分泌Mt,因此它也可以作为生物标记物.人们对Mt的检测是利用免疫组织化学的方法,将肝切片放置在用石蜡密封的冷丙酮中保藏,用抗生物素蛋白链菌素免疫过氧化物酶的方法进行检测.     

法夏内生菌株D126产细胞毒活性物质布雷菲德菌素A的研究(英文)

药用植物法夏内生真菌D126,当进行液体培养时能产细胞毒活性物质,经核磁共振氢谱、碳谱和快原子轰击质谱确定,该物质为布雷菲德菌素A(BFA).进一步研究表明,BFA对人Burkitt's 淋巴瘤细胞株Raji、人肝癌细胞株HepG2和人非小细胞肺腺癌细胞株A549具有较强的抑制活性,对植物病原真菌黑曲霉和杨桃炭疽菌等具有抑菌活性.最后,对植物内生真菌产细胞毒活性物质BFA的生态意义进行了探讨.     

携带杀白细胞素基因金黄色葡萄球菌的研究进展

杀白细胞素(Panton-Valentine leukocidin,PVL)是金葡菌产生的重要外毒素之一,PVL在其感染所致的坏死性皮肤损害和坏死性肺炎等疾病中起重要作用,并且能在社区和医院传播。现在国内外对PVL阳性金葡菌的研究日益重视,本文就其感染的致病机制、感染状况、检测方法和防治措施等问题研究作一陈述。     

金黄色葡萄球菌所致肺部感染的耐药特点及其Panton—Valentine杀白细胞素基因的携带状况分析

目的分析金黄色葡萄球菌所致肺部感染的耐药性特点及其Panton—Valentine杀白细胞素基因的携带状况。方法回顾性调查了温州医学院第一附属医院2005年1月至2006年1月医院感染的金黄色葡萄球菌所致肺部感染患者132例，对其体外药敏试验进行分析；并利用多重PCR检测其PVL基因，应用多位点基因序列分型（multilocus sequence typing，MLST）技术对PVL基因阳性的菌株进行序列分型。耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（methicillin-resistant Staphylococcus aureus，MRSA）的SCCmec基因分型采用多重聚合酶链反应。结果致肺部感染的132株金黄色葡萄球菌的耐药现象较为严重，仅对万古霉素、呋喃妥因及复方新诺明等药物的敏感率较高；其中经多重PCR筛选出10株携带PVL基因的金葡菌，全部为MRSA菌株，3株为ST239-SCCⅢ，2株为ST398-SCCmecⅢ，2株为ST398-SCCmecⅣ，ST25-SCCmecⅢ、ST59-SCCmecⅠ和ST88-SCCmecⅢ各1株。结论肺部感染的金黄色葡萄球菌对多种抗生素耐药，呈多重耐药性；其携带PVL基因占一定比例。     

STZ诱导的糖尿病模型小鼠肾脏的上皮-间质转分化研究

目的:探讨STZ诱导的糖尿病小鼠肾脏发生上皮-间质转分化(EMT)的情况。方法:将80只C57BL小鼠随机分为正常对照组(NC组)和糖尿病组(DM组),每组40只。DM组小鼠用1%STZ(streptozotocin,链脲佐菌素)溶液按60mg/kg体质量的剂量进行腹腔注射,每天1次,连续6天。NC组小鼠平行腹腔注射同等体积0.1mol/L的柠檬酸钠缓冲液。再将成模小鼠随机分为A、B批次,A批次用于动态观察生存率、小鼠体质量及随机血糖的监测;B批次用于在造模后第4、8、12周末观察肾组织的病理变化,并用Western blot、免疫荧光染色的方法观察肾组织中EMT标志蛋白α-SMA和E-cadherin的表达。结果:STZ诱导的糖尿病模型小鼠出现糖尿病典型症状如多饮、多尿等,血糖持续在高水平状态,体质量增长缓慢。在造模后12周末,DM组小鼠较NC组小鼠累积生存率显著降低,两组比较差异具有统计学意义(P0.001)。在造模后的第8周末,DM组小鼠肾脏出现明显的病理改变,到第12周末时,绝大部分肾小管上皮细胞被梭形的肌成纤维细胞取代,肾小球空泡,基底膜增厚。造模后的第4、8、12周末时,DM组小鼠E-cadherin表达量均显著低于NC组小鼠(P=0.004,0.026,0.004);而在第8和12周末时,DM组α-SMA表达量显著升高(P=0.009,0.015)。在第12周末,肾组织冰冻切片E-cadherin和α-SMA、免疫荧光染色结果与上述结果一致。结论:STZ诱导的糖尿病模型小鼠有较典型的糖尿病临床改变,且肾组织发生了EMT。     

苏云金芽孢杆菌的cry2A芽孢期启动子和分子伴侣ORF1-ORF2对Cry11Aa蛋白表达的影响

[目的]分析苏云金芽孢杆菌的cry2A型芽孢期启动子对晶体蛋白Cry11Aa的协调作用和分子伴侣ORF1-ORF2对Cry11Aa表达的促进功能.[方法]3个包括cry11Aa编码区的重组质粒pHcy1、pHcy2和pHcy4被构建并电激转化到苏云金芽孢杆菌晶体缺陷株4Q7中,其中pHcy1质粒携带cry11Aa基因自身启动子和分子伴侣p19基因,pHcy2携带cry2A型芽孢期启动子和分子伴侣orf1-orf2基因,pHcy4质粒在pHcy1的上游插入了cry2A型芽孢期启动子和分子伴侣orf1-orf2基因.SDS-PAGE分析了Cry11Aa蛋白在各重组苏云金菌株中的表达情况,并通过生物测定确定了其对蚊虫的生物活性.[结果]SDS-PAGE结果表明,Cry11Aa蛋白在4Q7(pHcy1)和4QT(pHcy4)均获得了表达,在4Q7(pHcy2)中未检测到Cry11Aa蛋白,推测晶体蛋白Cry11A不能利用cry2A型启动子进行表达调控;Cry11Aa蛋白在等体积4Q7(pHcy4)培养液中的表达量是4Q7(pHcy1)菌株的1.25倍,暗示着分子伴侣ORF1-ORF2在某种程度上能提高Cry11Aa的蛋白表达量.4Q7(pHcy1)和4Q7(pHcy4)形成的Cry11Aa蛋白晶体的形状和大小相似,两者对致倦库蚊的生物活性没有明显差异,LC50s分别为59.33 ng/mL和66.21 ng/mL,.[结论]推测晶体蛋白Cry11A能否成功表达与其使用启动子的类型和两者的协调配合有关.分子伴侣ORF1-ORF2虽然在某种程度上能提高Cry11Aa的蛋白表达量,但对提高Cry11Aa蛋白的杀蚊毒力没有显著性帮助.     

30%强力杀蚧防治梅园朝鲜球坚蚧试验

30%强力杀蚧(Omethoate)微乳剂防治梅园朝鲜球坚蚧DidesmococcuskoreanusBorchs试验结果表明:800,1200倍液药后1～7d的防效均保持在94.5%以上,击倒力强,杀蚧效果快;药效期长,药后14d,防效仍达99%以上;其600,800和1200倍液之间防效差异不明显。600,800和1200倍液的防治效果与25%蚧死净乳油在药后3,5,7,14d的防效有显著差异,25%蚧死净乳油的持效时间均较短,药后3d防效就陆续下降,分别从89.92%降到88.56,81.41%和61.82%。而与40%杀扑磷(速扑杀)乳油相比其防治效果之间无显著差异。30%强力杀蚧微乳剂具有作用速度快,持效期长、对青梅安全性高,防治成本底的特点。     

水华杀藻微生物的分离与分子生物学鉴定

除藻方法一般分为工程物理方法、化学药剂法和生物方 法三大类。作为庞大的富营养化湖泊的藻类控制技术,利用 工程物理方法和化学药剂法显然是行不通的,对环境友好的 生物控藻技术受到越来越多的关注,国内外许多富营养化湖 泊水华的控藻技术的研究热点转向生物控藻技术。在利用 生物控藻上,目前主要有三个方面,一是以鱼类控制藻类的 生长;二是以水生高等植物控制水体富营养盐及藻类; 三是以微生物来控制藻类的生长。其中由于微生物易于繁 殖的特点,使得微生物控藻是生物控藻里最有前途的一种控 藻方式。这些杀藻微生物主要包括细菌(溶藻细菌)、病毒 (噬藻体)、原生动物、真菌和放线菌等五类。国内外对杀藻 微生物的分离和鉴定有一些报道,但都不够系统和全面, 本文以本实验室的工作为基础,较全面、系统地介绍前三类 水华杀藻微生物的分离与纯化及其分子生物学鉴定方法。     

30%己乙水剂对玉米根系伤流液及其组分的影响

以玉米3138为材料,在大田和PVC管栽条件下研究了应用植物生长调节剂30％己乙水剂对玉米根系伤流量、伤流中无机离子流量、氨基酸组分及流量、激素流量等的影响,结果表明：30％己乙水剂可提高玉米根系伤流量,特别是大喇叭口期和籽粒形成期;提高了伤流中K,P,Ca,Mg,Si,Zn,Mn,Fe,B,Mo,Cu等无机元素流量,氨基酸总流量提高,主要的运输形式氨基酸Ser,Clu,Lys．Arg,Val,Ala,Leu,I1e,His,Try,Phe流量均明显增加,非蛋白质氨基酸GAba大幅度增加,伤流液中IAA在籽粒形成和灌浆期提高,授粉后伤流中Gas提高,CTKs在籽粒形成期提高,ABA在灌浆期提高,吐丝前低于对照。表明30％已乙水剂可促进根系吸收和合成物质向地上部分的输送,对促进地上部发育有重要作用。