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1.
香蕉束顶病毒基因克隆和序列分析   总被引:11,自引:0,他引:11  
肖火根  HuJohn 《病毒学报》1999,15(1):55-63
对香蕉束顶病毒(BBTV)中国分离株DNA组份I(DNA-1)、外壳蛋白(CP)和运转蛋白(MP)基因进行了克隆和序列分析。BBTVDNA-1含有1103个核苷酸,与南太平洋和亚洲分离株分别有87%-88% 96.9-98%的核苷酸序列同源性。由DNA-1编码的复制酶含有186个在酸残基。与南太平洋和亚洲分离株分别有84.4%-95.8%和97.6%、98.0%的氨基酸序列同源性。外壳蛋白基因由5  相似文献
2.
香蕉束顶病毒基因Ⅰ的克隆及序列分析   总被引:5,自引:0,他引:5  
腊平  蔡文启 《病毒学报》2000,16(2):158-161
以中国漳州地区感染BBTV的香蕉组织总DNA为模板,根据我国台湾地区BBTV分离物基因组Ⅰ序列,设计并合成了一对引物,通过PCR扩增出约500bp的片段。利用pBluescriptⅡSK T-载体获得此片段的克隆,经测序表明为BBTV组分Ⅰ的部分序列。由已测知的BBTV基因组Ⅰ序列设计一对相邻引物,以我国漳州的感染BBTV香蕉组织总DNA为模板,通过PCR坟增出约1.1kb的片段。利用pBlues  相似文献
3.
香蕉束顶病毒DNA组分6的克隆和序列分析   总被引:5,自引:0,他引:5  
香蕉束顶病(banana bunchy top disease,BBTD)是香蕉生产上重要的病害之一,它威胁着世界约1/4香蕉产区的生产[1].到1998年7月,世界上报道发生该病害的国家和地区达20多个,遍及亚洲、南太平洋地区和少数非洲国家.  相似文献
4.
香蕉束顶病毒的纯化及理化特性   总被引:5,自引:0,他引:5       下载免费PDF全文
从具有典型香蕉束顶病(BBTD)症状的香蕉病组织中提纯了香蕉束顶病毒(Banana bunchy top virus,BBTV)。电镜下可观察到直径为18nm的球形病毒颗粒。最高紫外吸收在255nm,最低紫外吸收在240nm,A_(260)/A_(280)为1.30。用标准BBTV抗体通过ECL-Western转印法测定其外壳蛋白分子量为21kDa。其核酸经DNaseI、RNaseA和Mung Bean Nuclease分析,表明是约1kb的ssDNA。结果与国外文献报道一致。  相似文献
5.
香蕉束顶病毒研究进展   总被引:4,自引:0,他引:4  
香蕉束顶病毒(Bananabunchytopvirus,BBTV)引起的香蕉束顶病(Ban。bu。bytoPdisease)是香蕉一种严重的病毒病害。迄今此病已普遍分布在世界许多产区,诸如:亚洲、非洲、澳大利亚、南太平洋一些岛屿以及美国的夏威夷等地区[‘-’l。在我国广东、广西、福建、云南等省的部分产区的发病率约占5—25%左右,严重地块已发展到毁灭性程度卜]。1987年Dale曾对世界香蕉种植的地理分布和BBTV的流行范围之间的关系、病株症状、病毒病原学、流行病学、病毒诊断方法以及病害的控制作过全面的综述【门。然而由于BBTV存在于寄主植物的韧皮…  相似文献
6.
香蕉束顶病毒DNA组分4的克隆与序列分析   总被引:3,自引:0,他引:3  
香蕉束顶病毒(banana bunchy top virus,BBTV)基因组中至少含有6个DNA组分,我们实验室已经对BBTV广东两个株系(NS和NSP)基因组中的DNA组分1、3、6进行了测序和报道.现又对NS和NSP的DNA组分4分别进行了克隆和序列分析.  相似文献
7.
利用超低温保存方法脱除香蕉束顶病毒的研究   总被引:3,自引:1,他引:2  
香蕉束顶病毒(BBTV)是香蕉生产中的严重病害之一,主要通过感病材料和香蕉交脉蚜等昆虫进行传播,目前尚无有效防治方法.本研究以感染BBTV的巴西蕉(Musa AAA Cavendish)为材料,研究了感染BBTV的巴西蕉离体再生和超低温保存技术条件,表明离体茎尖在MS+6-BA 4 0 mg/L+NAA 0 4 mg/L的培养基上分化不定芽较好;采用玻璃化法超低温保存技术保存带有BBTV的香蕉茎尖,再生后植株BBTV脱除率达到60 6%,而常规的茎尖培养对BBTV的脱除率仅为26 7%.  相似文献
8.
应用PCR方法克隆了香蕉束顶病毒中国漳州分离物 (BananabunchytopvirusChineseZhangzhouisolate ,BBTV_ZZ)DNA 4。序列分析表明其序列全长为 10 39nt,归属于亚洲组。 5′RACE分析确定其转录起始位点是 2 6 9nt处的A。利用PCR方法亚克隆了BBTV_ZZDNA 4非编码区序列并将其插入到植物表达载体pCAMBIA 130 4中的gfp∶∶gus基因上游得到重组质粒pTA2。将含pTA2和pCAMBIA 130 4的根癌土壤杆菌 (Agrobacteriumtumefaciens)注射进烟草 (NicotianatabacumL .cv .XanthiNC)叶片 ,3~ 5d后剪下注射部位的叶片进行GUS和GFP的表达分析。pTA2 (含BBTV_ZZDNA 4非编码区 )、pCAMBIA 130 4 (含CaMV 35S启动子 )和未注射的烟草叶片的GUS活性分别为 1 0 0 70pmolMU·μg-1·min-1,2 .0 6 90pmolMU·μg-1·min-1和 0 .0 2 14pmolMU·μg-1·min-1。注射含pTA2和pCAMBIA 130 4植物表达载体根癌土壤杆菌以及未注射的烟草叶片的每毫克总蛋白的GFP间接ELISA在 4 90nm的吸光值分别为89 5 77、10 0 4 4 0和 3 2 87。  相似文献
9.
本研究以本实验室保存的含重组载体pDEST17-NSP的原核表达菌株E.coli BL21(DE3)为材料,于25℃、0.1 mmol/L IPTG条件下诱导4 h,集菌后超声波破碎,获得以包涵体形式表达的约20 kD的融合蛋白.实验结果表明,将沉淀的融合蛋白溶于含6 mol/L尿素的Binding Buffer中,再经Ni2+-NTA亲和层析纯化后,可获得高纯度的融合蛋白.将纯化融合蛋白经12%SDS-PAGE电泳,切胶回收目的带,液氮研磨并按1:1(W/V)混合佐剂,4次免疫家兔,获得BBTV病毒核穿梭蛋白的特异性抗血清.以融合蛋白作抗原,间接ELISA法测定其抗血清效价为1:5 000.田间检测样品的最佳抗血清工作浓度为1:500.Western Blot鉴定结果表明抗血清能与目的蛋白特异性结合.本研究的结果将为下一步NSP基因转录调控和蛋白功能研究奠定一定基础.  相似文献
10.
香蕉束顶病毒研究新进展   总被引:1,自引:0,他引:1       下载免费PDF全文
介绍香蕉束顶病毒从发现到诊断和检测,从分子生物学研究到抗病毒基因工程,探究香蕉束顶病毒100多年的研究历程,为香蕉束顶病毒的深入研究和有效防治奠定了坚实的基础。  相似文献
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