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1.
非典型肺炎病例标本中新型冠状病毒的分离与鉴定   总被引:108,自引:0,他引:108       下载免费PDF全文
目的对非典型肺炎的病原体进行分离鉴定,为该病的诊断、预防和治疗提供依据。方法采用细胞培养和乳鼠接种法,从非典型肺炎病例标本中分离致病病原体,通过电镜形态学、血清学和动物致病性观察及RTPCR扩增与部分基因序列分析,对分离的病原体进行鉴定。结果成功地从死亡病例尸解的肺组织标本和患者鼻咽拭子标本中采用细胞培养法分离出病原体。通过电镜在病变细胞及其培养上清中观察到大量冠状病毒样颗粒。免疫荧光染色检测非典型肺炎患者血清,表明分离的病毒与此次流行的非典型肺炎密切相关。分离的病毒可对乳鼠致病,并在发病乳鼠的肺组织标本中通过电镜同样观察到冠状病毒样颗粒。从非典型肺炎病例尸解肺组织、传代发病小鼠肺组织及分离物感染的细胞培养物中,通过RTPCR可分别扩增出冠状病毒的cDNA片段,测序结果显示其核苷酸序列与已知冠状病毒的同源性在60%左右。结论从非典型肺炎病例标本中已成功分离出一种新的冠状病毒,它与此次流行的非典型肺炎密切相关,很可能是此次流行的非典型肺炎的主要病原体 。  相似文献
2.
入侵中国大陆的红火蚁的鉴定及发生为害调查   总被引:74,自引:5,他引:69  
根据形态特征鉴定结果首次证实红火蚁.Solenopsis invicta Buren入侵中国大陆,并调查了广东省吴川市红火蚁发生为害情况。调查结果表明,发生区内部分地点红火蚁发生密度较高,主要发生于较稳定的生态环境中,如荒坡、草地、长满杂草的田埂等。红火蚁已对当地农业生产、人们的身体健康、日常生活等造成了不利影响。此外,Cyt b基因序列分析结果表明,采自美国佛罗里达和广东吴川的红火蚁与采自广东4个地方的热带火蚁S.gemninata(Fabr.)两物种间有61个变异位点,种内变异为0。限制性酶切多态实验(RFLP)的结果显示,BamHI酶在红火蚁的特异扩增片段中有一个识别位点,而在热带火蚁中无酶切位点;MspI酶在热带火蚁的扩增片段中也有一个识别位点,而在红火蚁中无识别位点。有酶切位点的扩增产物在酶切后分别获得近200bp与250bp的片段各一带。因此,用PCR-RFLP的方法可以简单快速地鉴别红火蚁和热带火蚁。  相似文献
3.
ISSR分子标记技术及其在植物遗传多样性分析中的应用   总被引:70,自引:0,他引:70  
ISSR分子标记技术是近年发展而来的一种DNA多态性分子标记,具有简单、经济、信息量大、稳定性高等特点。本文论述了ISSR的反应原理及ISSR实验过程中的技术要点.并总结了ISSR在植物品种鉴定、亲缘关系分析,群体遗传结构、遗传多样性检测,以及植物育种研究中的应用。  相似文献
4.
微卫星及其应用   总被引:58,自引:7,他引:51       下载免费PDF全文
微卫星是广泛分布于真核生物基因组中的短串联重复序列(1-5bp),具有突变速率快、多态性高等特性,已被广泛应用于生物遗传作图、群体遗传研究、个体间亲缘关系鉴定等方面。简要论述了微卫星的突变、位点的分离、数据的收集、在生物学中的应用及其存在的缺陷。  相似文献
5.
木麻黄小枝提取物的分离鉴定及其对幼苗的化感作用   总被引:48,自引:6,他引:42  
木麻黄是我国华南沿海重要的防护林树种,易衰退.从化感作用角度探讨其衰退原因.结果表明,木麻黄小枝提取物显著地抑制其幼苗的生长,具有化感作用.利用色谱和波谱技术从提取物中分离鉴定了5种化感物质:A.山奈黄素-3-α-鼠李糖苷;B.懈皮黄素-3-α-阿拉伯糖苷;C.樨草素-3',4'-二甲氧基-7-β-鼠李糖苷;D.山奈黄素-3-β-双鼠李糖苷;E.懈皮黄素-3-β-葡萄糖苷,均为黄酮类化合物.用A、B和C对木麻黄幼苗进行生物测定表明,3种化感物均显著地抑制木麻黄幼苗生长,尤其是抑制根生长.  相似文献
6.
Identification and characterization of new plant microRNAs using EST analysis   总被引:46,自引:0,他引:46  
Seventy-five previously known plant microRNAs (miRNAs) were classified into 14 families according to their gene sequence identity. A total of 18,694 plant expressed sequence tags (EST) were found in the GenBank EST databases by comparing all previously known Arabidopsis miRNAs to GenBank‘s plant EST databases with BLAST algorithms. After removing the EST sequences with high numbers (more than 2) of mismatched nucleotides, a total of 812 EST contigs were identified. After predicting and scoring the RNA secondary structure of the 812 EST sequences using mFold software, 338 new potential miRNAs were identified in 60 plant species, miRNAs are widespread. Some microRNAsmay highly conserve in the plant kingdom, and they may have the same ancestor in very early evolution. There is no nucleotide substitution in most miRNAs among many plant species. Some of the new identified potential miRNAs may be induced and regulated by environmental biotic and abiotic stresses. Some may be preferentially expressed in specific tissues, and are regulated by developmental switching. These findings suggest that EST analysis is a good alternative strategy for identifying new miRNA candidates, their targets, and other genes. A large number of miRNAs exist in different plant species and play important roles in plant developmental switching and plant responses to environmental abiotic and biotic stresses as well as signal transduction. Environmental stresses and developmental switching may be the signals for synthesis and regulation of miRNAs in plants. A model for miRNA induction and expression, and gene regulation by miRNA is hypothesized.  相似文献
7.
植物多倍体诱导育种研究进展   总被引:43,自引:0,他引:43  
概述了多倍体中领域中多倍体产生途径,特征、特性及鉴定方法等研究现状,展望了植物多倍体诱导育种的应用和发展前景。  相似文献
8.
RAPD标记在紫菜遗传多样性检测和种质鉴定中的应用   总被引:41,自引:0,他引:41  
用RAPD技术对4类紫菜(Porphyra yezoensis,P.haitanensis,P.katadni var.hemiphylla和P.oligospermatangia)的15个无性系丝状体进行了遗传多样履分析,从50个OPERON引物中经过初筛,其中6个引物可以扩增出稳定的可重复的图谱。这6个引物共扩增出了60条带,多态性比例达97.1%。根据RAPD结果将这15个无性了紫菜的DNA  相似文献
9.
虎纹捕鸟蛛毒的生物学活性鉴定   总被引:38,自引:0,他引:38       下载免费PDF全文
本文报道了采集广西产虎纹捕鸟蛛(Selenocosmia huwena)毒液的方法,并对粗毒进行了部分生物学活性的测定,该粗毒对小鼠和蜚蠊的LD50分钟为1.16mg/kg和300ug/g,该粗毒具有透明质酸酶,碱性磷酸酶,蛋白水解酶和脱氧核糖核酸酶活性,未测到磷脂酶A和胆碱脂酶性,通过电生理实验发现该粗毒含有阻断蟾蜍神经肌肉接头传递的毒素,并观察到当小鼠接受腹腔注射致死剂量(5mg/kg)粗毒后便迅速出现呼吸麻痹。  相似文献
10.
采用倍性分析仪鉴定柑橘愈伤组织的遗传变异   总被引:38,自引:1,他引:37  
使用倍性分析仪,对48种培养多年不同基因型的柑橘愈伤组织的细胞NDA含量进行了测定。结果发现,除了路比葡萄柚,尾张和金诺橘等3种愈伤组织变异较小,未出现第二个峰以外,有93.8%的基因型的愈伤组织的细胞均出现了DNA含量加倍的细胞,通过DPAC分析软件分析得知,凤梨甜橙三倍体,宁波金钳,长沙橘,鲁斯脐橙,国庆4号和卡特夏橙等6愈伤组织的细胞DNA含量还出现了三倍增加及非整倍增加的现象。在待测的48种愈伤组织中,DNA含量变异细胞的百分率最大者为凤梨甜橙三倍体,达18.51%,最小者为暗柳橙,为4.70%,通过取肯氏新复极差分析得知,不同基因型的DNA含量变异细胞的百分率之间存在差异显著性,在相同继代培养基和相同继代周期的条件下,培养时期对愈伤组织变异大小影响不显著。  相似文献
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