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1.
农杆菌介导的玉米遗传转化   总被引:51,自引:0,他引:51  
Several maize inbreds were transformed with Agrobacterium tumefaciens EHA101 (pGIH). Transgenic maize plants were obtained. Frequency of transformation of maize inbred Suyu No. 1 can reach 8.1%. Results of PCR and Southern blot analysis proved that T-DNA was stably integrated into the genome of maize. Staining with X-gluc confirmed the expression of GUS gene in maize cells. The band amplified by inverse PCR showed that the copy number of transgene in three transformants was single. After long term of subculture, some hygromycin resistant calli lost their regeneration ability. Although Southern blot probed the integration of gusA gene in their genome, GUS activity cannot be detected in those calli. Southern blot analysis of HpaII digest DNA showed that transgenic gusA gene was highly methylated.  相似文献
2.
农杆菌介导的小麦遗传转化几个影响因素的研究   总被引:42,自引:1,他引:41  
王永勤  肖兴国  张爱民 《遗传学报》2002,29(3):260-265,T001
采用携带gus和(或)bar基因双元表达载体(p3301,pBTAaB)的3个根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)菌株(AGL-1,EHA105和LBA4404)对普通小麦(Triticum aestivumL.)冬性栽培品种农大170和农大146的幼胚及幼胚愈伤组织进行了遗传转化,结果表明,菌液浓度OD6001.0和侵染时间1h对外植体的生存和转化最为有利;侵染前对外植体进行高渗处理较明显地提高了抗性愈伤获得率;乙酰丁香酮(AS)对小麦转化的作用随菌株和外植体的不同而异;菌株/质粒组合,受体基因型及外植体的类型,年龄和生理状态对转化效率有很大的影响,条件优化后,得到大量具有PPT抗性的愈伤和一些抗性植株,抗性愈伤的GUS染色阳性率在50%-60%之间,所检测的抗性苗呈GUS阳性,对6株抗性苗的PCR和Southern检测初步证明,外源基因已经整合到其中3株的基因组中。  相似文献
3.
建立低能离子束介导小麦转基因方法并获得转GUS基因植株   总被引:41,自引:0,他引:41  
研究了注入离子种类、能量、剂量等参数对于低能离子束介导的遗传转化的影响,建立了适于小麦成熟胚转化的组培条件和筛选程序。以携带GUS基因的质粒为供体,进行了报告基因转化研究。分子生物学证据表明GUS基因已整合到小麦基因组中。3个小麦品种的抗性愈伤转化率分别为9.5%、10.8%、11.2%,再生植株转化率分别为1.4%、3.4%、1.7%,首次证明了离子束介导小麦遗传转化是可行的,为离子束介导小麦遗  相似文献
4.
油菜的遗传转化及抗溴苯腈转基因油菜的获得   总被引:38,自引:0,他引:38  
以油菜(Brassica napus L.)的下胚轴和子叶为转化受体,建立了油菜的高效转化系统。在此基础上,将抗除草剂溴苯腈基因(bxn基因)导入油菜,获得了抗溴苯腈转基因油菜。分子检测实验证明,转基因油菜中含有bxn基因。转基因油菜可抗高达10~(-3)mol/L的溴苯腈。  相似文献
5.
抗虫的转AaIT基因杨树的获得   总被引:32,自引:1,他引:31       下载免费PDF全文
通过根癌农杆菌叶盘法将构建在双元载体上的昆虫特异性神经蝎毒素AaIT基因转化至中国南方杨树N106(小叶杨×美洲黑杨,P.deltoides×P.simonii)中,共获得了62株再生植株。PCR分析及PCR产物Southernblotting的分析结果表明,AaIT基因整合在再生植株的基因组上。对部分转AaIT基因植株进行了杀虫实验,转基因植株A5对一龄舞毒蛾(Lymantriadispar)幼虫有明显的抗性,饲喂转基因杨树叶片的幼虫死亡率显著高于未转基因对照植株,其取食面积小,存活幼虫体重明显小于对照。ELISA分析证明了AaIT蛋白的表达。  相似文献
6.
根癌土壤杆菌介导的水稻高效转化和转基因植株的高频再生   总被引:29,自引:0,他引:29  
利用根襄封杆菌(Agrobacterum tumefaciens(Smith et Townsend)Conn)介导的转化方法对4个粳稻(Oryza sativa L.ssp.japonica)品种和2个灿稻(O.sativa ssp.indica)品种进行了转化。在对影响根癌土壤杆菌转化水稻效率的多种因素进行比较研究后,建立了根癌土壤杆菌介导的水稻高效转化和再生系统。将水稻成熟胚和未成熟胚来源的  相似文献
7.
大豆遗传转化研究进展   总被引:24,自引:0,他引:24  
近年来大豆的遗传转化取得了较大的进展.文章结合作者实验室的工作介绍了几种主要的大豆遗传转化系统及其操作方法,并探讨了影响农杆菌介导大豆遗传转化的因素.  相似文献
8.
农杆菌介导的植物遗传转化进展   总被引:23,自引:0,他引:23  
9.
冷诱导转录因子CBF1转化草莓及其抗寒性鉴定   总被引:23,自引:0,他引:23  
以草莓栽培品种哈尼"为材料,利用根癌农杆菌介导的叶盘法将拟南芥冷诱导转录激活因子CBF1(C-re-peat binding factor)导入草莓中.转化植株经25 mg/L Km筛选后进行PCR和Southern杂交鉴定,结果显示CBF1基因整合进草莓基因组中.采用电解质渗漏法和生长恢复法对转基因株系进行抗寒生理鉴定,结果显示,转基因株系的电导率普遍低于对照;将转基因株系和对照于-2-0℃放置7 d,在转基因株系83中有65%的植株出现了萎蔫,而对照植株有91%出现了萎蔫,经22-25℃下进行恢复生长,转基因株系83有74%完全恢复,而对照株系只有18%恢复.结果表明CBF1基因导入草莓中可以提高草莓对低温胁迫的抵抗力.  相似文献
10.
牟红梅  刘树俊 《遗传学报》1999,26(6):634-642
慈菇蛋白酶制剂(ArrowheadProteinasInhibitor,API)是来源于慈菇(Sagittariatrifolia)储藏器官的一种天抗虫物质,属于丝氨酸蛋白酶抑制剂类,能抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶和激肽释放酶,对某些鳞翅目,双翅目以及鞘翅目等昆虫有毒杀作用。  相似文献
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