通过Cyt b基因同源序列比较评估厦门文昌鱼的分类学地位

白氏文昌鱼Branchiostomabelcheri (Gray)在我国和日本沿海均有分布 ,由于南、北方文昌鱼形态学上有一定差异 ,且二者间存在一些过渡类型 ,其分类地位问题仍有待进一步澄清。本文测定了厦门欧厝海域产的文昌鱼mtDNACytb基因序列 ,并与日本产的文昌鱼以及另外产于大西洋的两种文昌鱼Cytb基因序列比较。分子系统学分析结果表明 :厦门欧厝海域产的文昌鱼与日本产的文昌鱼平均遗传距离为 2 1 12 % ,达到了种间分化的水平 ;经过对已有文献和文昌鱼地理分布的综合分析 ,作者建议将原来的白氏文昌鱼青岛亚种B belcheritsingtauense提升为种 ,南、北方所产文昌鱼分别作为两个独立的种存在 ,即南方的B belcheri (Gray)和北方的B tsingtauenseTchangetKoo  

文昌鱼分类学研究及展望

文昌鱼是最接近脊椎动物直接祖先的现生动物,在脊椎动物起源与演化研究中占有极其重要的位置。近年来,对文昌鱼的研究已引起越来越多的科学家的兴趣,然而作为生命科学研究的重要基础,这类动物的分类学研究相对滞后。依据已有的中国文昌鱼资源调查资料,中国沿海文昌鱼的分布应当十分广泛,即只要有适合文昌鱼栖息的沙滩,均有文昌鱼分布的可能。根据目前的分类学研究成果和动物命名法中的优先权原则,建议将产于青岛等地的文昌鱼种名Brnachiostoma belcheri tsingtauense订正为B.japonicus,南方的文昌鱼保留其原种名B.belcheri。由此,目前分布在中国沿海的鳃口文昌鱼属(Branchiostoma)至少有2种,侧殖文昌鱼属(Epigonichthys)有1～3种,漂浮文昌鱼(Amphioxides pelagicus)1种。DNA分子标记技术在文昌鱼分类学研究中将会发挥更大的作用。  

性类固醇激素及其受体在文昌鱼性腺和神经系统中的分布

首次用雌二醇，睾酮及孕酮受体的多克隆抗体在文昌鱼性腺，脑泡和神经管中进行免疫细胞化学定位研究，结果表明，不同发育时期的卵原细胞和卵母细胞中都存在雌激素，雄激素和孕激素受体，在小生长期，3种受体通常定位在卵原细胞和早期初级卵母细胞的胞质或核膜，在大生长期和成熟期，则定位在胞质和核质，在雄性，3种类固醇激素受体分布在不同发育时期的精原细胞，精母细胞和精子细胞（雌激素受体例外）中，受体阳性物定位在胞质和核，另外，用免疫细胞化学方法和性类固醇激素抗体对文昌鱼不同发育时期的性腺和神经系统进行研究，结果揭示，免疫阳性物存在于不同发育时期的卵巢和精巢中，在卵巢发育是上期，卵原细胞和卵母细胞的胸质和核仁膜对紫二醇，睾酮和孕酮抗体显示强或中等强度免疫阳性反应，在大生长期和成熟期，卵母细胞胞质和核仁膜对睾酮和孕酮抗体的免疫阳性反应明显减弱，而对雌二醇则显著增强，在雄性，随着精原细胞和精母细胞对孕酮抗体发生强的免疫阳性反应，在成熟期则对雌二醇抗体发生免疫阴性反应，精子始终为免疫阴性，本文研究首次发现，文昌鱼脑泡和神经管中存在哺乳动物神经旮体激素样免疫阳性神经细胞及其纤维，免疫阳性物分布在神经细胞胸质，核显阴性反应，这些结果为证明文昌鱼性类固醇激素参与调节性腺发育成熟和生殖内分泌调控轴的功能成熟提供重要的形态学新证据。  

文昌鱼—研究脊柱动物起源和进化的模式动物

长久以来，文昌鱼一直被认为和生活在约5亿年前的脊椎动物的直接祖先相似。由于文昌鱼在进化上的重要性，它在动物学研究史上发挥着关键作用，近100多年来，文昌鱼作为研究对象曾数次受到动物学界青睐或冷落，大约10年前，随着分子生物学技术应用于文昌鱼研究，又激发了动物学家对文昌鱼的研究兴趣，又一次出现在文昌鱼研究的高潮，并且一直持续至今，分子生物学研究结果表明，文昌鱼样生物可能是环节动物样动物和最早的脊椎动物之间的进化中间体，因此，文昌鱼在动物学研究史上好像绕了个大圈又回到了原处，在被忽视一段时间之后，又重新占据脊椎动物起源和进化研究中心舞台的位置，成为研究脊椎动物起源和进化的模式动物。  

GnRH在文昌鱼脑和哈氏窝的分布

用免疫细胞化学方法和抗哺乳动物ＧｎＲＨ抗体研究了ＧｎＲＨ免疫活性细胞在文昌鱼脑和哈氏窝的分布。ＡＰＡ免疫染色法证明了哺乳动物ＧｎＲＨ免疫活性结构分布在文昌鱼端脑前端和靠近中脑的背部，中脑中部，神经管和哈氏窝中。ＧｎＲＨ－ｉｒ胞体有多种类型，一种是大脑胞体，可见在端脑和中脑，另一种为中等和小型胞体，这些胞体聚集在中脑中部（相当于鱼类下丘脑）以及端脑。长的念珠状ＧｎＲＨ－ｉｒ神经纤维从端脑腹外侧面延伸  

昌黎海区文昌鱼初步调查

描述了秦皇岛昌黎海区文昌鱼栖息的自然生态环境，测定了文昌鱼的种群结构、生物学特征等，并进一步对秦皇岛文昌鱼的分类地位进行了研究。结果认为，秦皇岛文昌鱼与厦门文昌鱼及青岛文昌鱼同属于一个种，从亲缘关系上，秦皇岛文昌鱼与青岛文昌鱼要更近些。  

雌雄文昌鱼同工酶的表型差异

本文应用聚丙烯酰胺凝胶电泳结合生化染色方法分析了雌雄文昌鱼中苹果酸酶、苹果酸脱氢酶、酸性磷酸酶和酯酶四种同工酶的酶谱。首次发现苹果酸酶、苹果酸脱氢酶和酸性磷酸酶表型在文昌鱼雌性和雄性个体之间存在差异 ,而在同一性别不同个体之间无差异。酯酶表型较复杂 ,不但在不同性别个体之间而且在同一性别不同个体之间都出现一定差异  

文昌鱼秦皇岛、青岛和厦门地理种群形态特征的分化

把分别采自秦皇岛、青岛和厦门(各25尾)的文昌鱼种群的形态特征分为计数性状8个和计量性状10个,然后对18个形态特征进行ANOVA、聚类和主成分分析。结果表明:3地种群全长、体高和背腹鳍条数等18个形态特征的平均值均存在显著差异(P<0·05),且种群间的变异大于种群内。进一步比较秦皇岛和青岛种群,除在口笠触须、背鳍条数、腹鳍条数和肌节总数4个特征较为相似外,其余14个特征均存在显著差异(P<0·05);而青岛和厦门种群在全长、体高、腹孔肛门间肌节数、生殖腺数、吻鳍高、背鳍高、上尾鳍高等7个特征上更为相似(P>0·05);此外,秦皇岛和厦门种群在腹鳍高、上尾鳍长和高、下尾鳍长和高等5个特征上存在相似性(P>0·05)。聚类分析结果表明,75个样本明显分成两个类群:第二类群主要由厦门样本构成,而第一类群则主要由秦皇岛和青岛样本构成。由前3个主成分分析结果表明,所有样本可大致分为3个类群:秦皇岛、青岛和厦门类群。其中来自厦门的个体聚成一个明显的独立类群,而来自秦皇岛和青岛的样本在主成分分析图上则存在一定的交叉和重叠。总之,厦门地理种群分化最为明显,而秦皇岛和青岛种群在总体分化的趋势下,个体间形态特征仍存在相似性。  

多巴胺(DA)和去甲肾上腺素(NE)在文昌鱼神经系统和性腺中的免疫细胞化学定位

用免疫细胞化学ABC法对多巴胺（DA）和去甲肾上腺素（ＮＥ）的文昌鱼神经系统和性腺中进行定位研究。免疫反应结果显示：ＤＡ和ＮＥ免疫阳性神经细胞广泛分布在文昌鱼端脑后部、中脑前部和中部以及脊髓，我们还观察到，在文昌鱼漏斗部也有ＤＡ免疫阳性神经细胞及其纤维；在中脑中部，ＮＥ免疫阳性神经细胞及其纤维与另一个神经细胞相接触。此餐，文昌鱼精巢和卵巢中也存在ＤＡ和ＮＥ免疫阳性物，研究结果表明，ＤＡ和ＮＥ可有像在鱼类中那样，参与调节文昌鱼哈氏窝上皮细胞的分泌活动以及性腺发育。  

文昌鱼卵子发生中成熟分裂时卵母细胞的超微结构研究

首次观察文昌鱼卵发生进入和一次成熟分裂前期联合会丝复合粗线期，双线期和网状期卵原细胞及卵母细胞生发泡及胞质的超微结构特点，在生发泡内同源染色体配对，联会丝复合体中央出现重组节。不同发育类型的核样体及其相关线粒体是这一时期卵母细胞胞质的主要特征