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1.
抗凝良药水蛭素的研究进展   总被引:48,自引:0,他引:48  
从水蛭素的分子生物学性质,克隆表达研究,以及临床应用研究等主要方面论述抗凝防栓良药水蛭素的研究进展,并对水蛭的临床应用价值,开发研究成为抗栓领域的一大热点进行了论述。  相似文献
2.
影响大肠杆菌中外源基因表达的因素   总被引:40,自引:1,他引:39       下载免费PDF全文
大肠杆菌已经被广泛地应用于表达各种外源基因,但是,不同的外源基因在表达效率上却有很大的差异,文章综述了影响大肠杆菌中外源基因表达的因素,这将有助于认识大肠杆菌中外源基因表达的规律,以便采取有效的方法提高外源基因在大肠杆菌中的表达效率.  相似文献
3.
重组大肠杆菌高密度发酵研究进展   总被引:32,自引:0,他引:32  
重组大肠杆菌的高密度发酵是提高基因工程产品产量的一个非常有铲的手段,是现代发酵工程研究的一个热点。本文就高密度发酵中影响重组大肠杆菌发酵产率的几个因素,包括宿主菌、培养基、培养条件、补料方法以及高密度发酵过程中存在的问题和对策加以讨论,着重探讨了高密度下大肠杆菌产生的有害代副产物--乙酸的产生机制、抑制作用机理,以及控制乙酸机累的技术方法。  相似文献
4.
乳糖作为诱导剂对重组目的蛋白表达的影响   总被引:31,自引:0,他引:31       下载免费PDF全文
将重组粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子/白细胞介素3(GM-CSF/IL-3)融合蛋白表达菌BL21(DE3)(pFu)作为研究对象,对于以乳糖作为诱导剂时重组目的产物的诱导表达规律进行了深入的研究。分析比较了不同培养基中,不同生长阶段进行诱导对于产物表达的影响。对诱导所需的乳糖浓度、诱导持续时间长短等因素亦进行了研究。实验结果表明,在对诱导条件进行优化控制的前提下,利用乳糖作为诱导剂可以达到与IPTG类似的诱导效果。随后的研究中,将乳糖作为诱导剂应用于高密度发酵过程。这些研究结果为乳糖作为诱导剂最终应用于重组基因工程药物的工业化生产提供了有益的参考和借鉴。  相似文献
5.
细菌mtl—D基因的克隆及在转基因八里庄杨中的表达   总被引:30,自引:1,他引:29  
刘凤华  孙仲序 《遗传学报》2000,27(5):428-433
运用PCR方法克隆了大肠杆菌-1磷酸甘露醇脱氢酶(mtl-D)基因,序列分析表明与已发表序列相比,除第416位密码子由AAA代替CAT、相应的氨基酸由Lys代替His外,其他部分均相同,该基因插入植物双元载体中,经土壤农杆菌介导导入地 杨,经卡那霉素筛选后再经盐胁迫筛选猁一批较高耐卤性的转化植株,在附加0.6%NaCl的培养基中生长良好,而对照在附加0.4%,NaCl的培养基中不能存活。对转化植株  相似文献
6.
不同猪种E.coli F18受体基因的多态性   总被引:28,自引:0,他引:28  
采用PCR—RFLP技术检测了大约克、长白、杜洛克、宁乡、沙子岭和大围子6个品种共867头猪的E.coli F18受体(ECF18R)基因座的遗传变异。结果表明:Hin6 Ⅰ-RFLP位点上,大约克、长白、杜洛克3个外来猪种均存在多态,且以敏感型(GG型和AG型)居多,平均占94%,3个外来猪种的G等位基因频率平均为0.76,AA抗性型个体占少数,平均为6%,猪群中M307处G→A的突变频率并不高。宁乡、沙子岭和大围子3个本地猪种的所有检测样品都表现为GG型,在该位点上均不存在G→A的突变。各猪种ECF18受体基因座的PCR—RFLP基因型分布X^2检验结果表明,每个外来猪种ECF18受体基因座的PCR—RFLP基因型分布与3个本地猪种的相比均差异显著或极显著,3个本地猪种间的ECF18受体基因座的PCR—RFLP基因型分布完全一致。外来猪种间只有长白与杜洛克各基因型的分布差异显著,其余均不显著。  相似文献
7.
通过PCR的方法从Bacillus subtilis基因组中克隆了中性植酸酶基因nphy,DNA全序列分析表明其结构基因全长1152个核苷酸(编码383个氨基酸),5′端有一编码26个氨基酸的信号肽序列。去除信号肽编码序列的nphy克隆到大肠杆菌IPTG诱导表达载体pTYB40上,在大肠杆菌中得到了高效表达,表达量达到大肠杆菌可溶性蛋白的40%以上,表达产物具有生物学活性,证实了克隆到的中性植酸酶的基因有正常的生物学功能。  相似文献
8.
 通过体壁损伤和大肠杆菌同时诱导家蝇幼虫产生免疫血淋巴,经沸水浴热变性,透析浓缩处理,然后经Tricine-SDS-PAGE得到诱导前后家蝇幼虫血淋巴中蛋白差异表达条带,将该条带电泳回收、复性、抗菌活性检测等步骤,分离纯化得到抗菌肽MDL-1, 其分子中富含Gly和碱性氨基酸,分子量为6 200 D,对革兰氏阴性菌Escherichia coli有较强抗性。通过MDL-1对大肠杆菌通透性分析和透射电镜超微结构观察表明,MDL-1首先可能与细菌的外膜结合,然后与细胞内膜作用,扰乱膜脂分子的排列,改变细胞膜的通透性,从而影响细胞膜的结构和功能,使细胞膜形成的许多孔道,造成细胞内的原生质扩散,并从孔道向胞外渗漏,影响了细菌的代谢系统,最终引起细胞膜破碎,细胞完全解体,从而起到抑菌杀菌作用。  相似文献
9.
从江苏、江西、安徽等7个省疑似黄、白痢直肠棉拭及病死猪的十二指肠和肠系膜淋巴结中分离鉴定出339株病原性大肠杆菌。经O血清型鉴定,除77株未能定型、41株自凝外,测定出221个分离株的O血清型,这些分离株覆盖了64个血清型,以O107、O101、O20、O93、O11和O149为主,共99株,占定型菌株的44.80%。这些血清型与已报道的常见血清型间存在一定差异。运用黏附素单抗对以上菌株进行F4、F5、F6、F18、F41 5种黏附素检测,共97个分离株表达黏附素(28061%),而表达两种和3种黏附素的菌株分别有22株和8株,它们分别占表达黏附素菌株的22.68%和8.25%,其中单独表达F4、F6、F5+F41黏附素菌株分别有18、30、15株,分别占表达黏附素菌株的18.56%、30.93%和15.46%;同时运用多重PCR对其中145个分离株进行毒素基因(Sta、STb、LT、SLT2e)的检测,拥有Sta和STb毒素基因的菌株分别占检测菌株的51.72%和3724%。F6、F4、F5+F41和Sta、STb为该地区致初生仔猪腹泻大肠杆菌常见的毒力因子。  相似文献
10.
静磁场对大肠杆菌生长过程的作用机制研究   总被引:20,自引:5,他引:15  
通过对在外加静磁场和正常情况下培养大肠杆茵生长情况的对比分析,发现试验条件下所选磁场对大肠杆茵有明显促进生长的作用,茵落计数结果表明磁场越强作用效果越明显。对试验结果进行Dunnettt检验发现均具有差异显性。  相似文献
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