首页 | 本学科首页   官方微博 | 高级检索  
文章检索
  按 检索   检索词:      
出版年份:   被引次数:   他引次数: 提示:输入*表示无穷大
  收费全文   88篇
  国内免费   14篇
  完全免费   98篇
  2018年   1篇
  2016年   1篇
  2015年   4篇
  2014年   2篇
  2013年   3篇
  2012年   9篇
  2011年   10篇
  2010年   8篇
  2009年   7篇
  2008年   12篇
  2007年   10篇
  2006年   11篇
  2005年   16篇
  2004年   13篇
  2003年   10篇
  2002年   13篇
  2001年   17篇
  2000年   11篇
  1999年   10篇
  1998年   6篇
  1997年   7篇
  1996年   4篇
  1995年   1篇
  1994年   3篇
  1993年   4篇
  1992年   4篇
  1991年   1篇
  1990年   1篇
  1988年   1篇
排序方式: 共有200条查询结果,搜索用时 31 毫秒
1.
重组包涵体蛋白质的折叠复性   总被引:49,自引:1,他引:48       下载免费PDF全文
综述了减少包涵体形成、包涵体分离和溶解以及包涵体折叠复性的策略及其最新进展 .详细讨论了包涵体蛋白质折叠复性的基本原则、包涵体折叠复性促进剂和包涵体折叠复性方法  相似文献
2.
包涵体蛋白体外复性的研究进展   总被引:37,自引:1,他引:36       下载免费PDF全文
方敏  黄华樑   《生物工程学报》2001,17(6):608-612
外源基因在大肠杆菌中高水平表达时 ,通常会形成无活性的蛋白聚集体即包涵体。包涵体富含表达的重组蛋白 ,经分离、变性溶解后须再经过一个合适的复性过程实现变性蛋白的重折叠 ,才能够得到生物活性蛋白。近年来 ,发展了许多特异的策略和方法来从包涵体中复性重组蛋白。最近的进展包括固定化复性以及用一些低分子量的添加剂等来减少复性过程中蛋白质的聚集 ,提高活性蛋白的产率。  相似文献
3.
包含体蛋白质的复性研究进展   总被引:20,自引:0,他引:20  
包含体的形成是异源蛋白质在大肠杆菌中高效表达的必然结果,也是目前产生重组蛋白质最有效的方法之一。不可溶、无生物活性的包含体必须经过变性、复性才能获得天然结构,完整特定的生物学功能。聚集是造成重组蛋白质复性产率低下的主要因素,因此理解蛋白质聚集机制,减少和防止聚集的发生是建立高效、高产率复性方法的关键。分子伴侣、低分子量添加物等在复性过程中的应用及新的复性方法的建立都大大提高了重组蛋白质复性产率。  相似文献
4.
重组蛋白包涵体的复性研究   总被引:18,自引:0,他引:18  
重组蛋白在大肠杆菌中的高表达往往形成不可溶、无生物活性的包涵体,需经过变性溶解后,在适当条件下复性形成天然的构象,才可恢复其生物活性.变复性实验是建立在对蛋白质体外折叠机制的了解的基础上.根据近年来对蛋白质折叠机制的认识和重组蛋白包涵体在复性方面的主要进展,论述以下3个方面的内容:1)蛋白质在细胞内的折叠机制;2)蛋白质体外折叠机制;3)蛋白质复性的策略和方法.  相似文献
5.
为了克隆人SOD-cDNA,构建表达载体,实现其在大肠杆菌中的高效稳定表达,通过抽提人肝组织总RNA,RT-PCR扩增人SOD cDNA,构建含rhSOD cDNA的表达质粒pLY-4/rhSOD,转化大肠杆菌JF1125进行表达研究。结果克隆到的rhSOD cDNA序列与文献报道一致,在宿主菌中获得高效表达,表达水平达68%以上;蛋白复性纯化工艺高效快速,rhSOD纯品纯度达98%以上,比活性达到2529u/mg;为用基因工程方法生产rhSOD打下基础。  相似文献
6.
本文以2/3肝切除(partial hepatectomy,PH)大鼠为模型,探讨了PH后酸性和碱性磷酸酶(acid and alkaline phosphatases,ACP和AKP),构成性热休克蛋白70/诱导性热休克蛋白68(HSC7/HSP68),酸性和中性蛋白水解酶在肝再生期间(0-144h)的动态变化。结果显示,在肝切除后的肝再生期间;(1)ACP和AKP均出现两个活性高峰(4和48h  相似文献
7.
固定化分子伴侣GroE促进变性溶菌酶复性的研究   总被引:10,自引:0,他引:10       下载免费PDF全文
董晓燕  杨晖  甘一如  白姝  孙彦   《生物工程学报》2000,16(2):169-172
利用重组大肠杆菌表达制备了分子伴侣GroE(GroEL和GroES),研究了GroE以及GroEL辅助变性溶菌酶复性的作用。结果表明,不仅游离GroEL单独作用可使溶菌酶复性收率达到90%以上,而且固定化GroEL亦可有效地促进蛋白质复性,最佳复性温度为37℃,最佳pH值范围为6~8,复性酶的活性收率在85%以上。另外,固定化GroEL可反复回收利用,表明固定化GroEL有可能在实际生物下游过程中得到应用。  相似文献
8.
海南捕鸟蛛毒素—IV的化学合成与氧化复性   总被引:9,自引:1,他引:8  
应用芴甲氧羰基 (Fmoc)固相方法化学合成了海南捕鸟蛛毒素 IV ,并通过反相HPLC对不同条件下的氧化复性结果进行监测 ,从而摸索出海南捕鸟蛛毒素 IV的最适氧化复性条件 :0 .1mol/LTris HCl和 0 .1mol/LNaCl缓冲液、pH 8.0、样品浓度为 0 .1g/L、5mmol/LGSH、0 .5mmol/LGSSG。复性产物经质谱测定为 3988.70 ;而与天然毒素混合进行HPLC分析时也得到了单一峰 ;膈神经 膈肌标本测活实验表明 ,合成毒素具有与天然毒素相同的生物学活性 ,从而可推断两者在结构和功能上具有一致性。  相似文献
9.
包涵体复性研究进展(英文)   总被引:9,自引:2,他引:7       下载免费PDF全文
用基因工程技术在大肠杆菌高水平表达重组蛋白时,通常形成无生物活性的包涵体。包涵体在体外经分离、溶解与重折叠后可实现复性,表现为具有生物活性的蛋白。总结了包涵体的相关复性技术,重点介绍重折叠的最新进展情况 。  相似文献
10.
小麦生育前期POD同工酶的动态变化   总被引:9,自引:0,他引:9  
利用复性电泳技术 ,对 2个小麦品种 (冬性品种、春性品种 )从出苗到拔节初期绿叶中的POD酶谱进行分析 ,结果表明 :( 1)小麦从出苗到拔节初期 POD的分子量均在 35k D以上 (含 35k D) ;( 2 )三叶期以前叶片中 POD活性比三叶期以后的弱 ;( 3)小麦叶片中 POD酶带变化主要集中在 52~ 146k D间 ;( 4 )从出苗到拔节初期小麦绿叶中始终含有 30 0、 52、 39、 37k D4条活性较强的过氧化物酶 ;( 5)在不同的生育阶段和环境条件下 ,绿叶中 POD的种类和活性均有显著变化。  相似文献
设为首页 | 免责声明 | 关于勤云 | 加入收藏

Copyright©北京勤云科技发展有限公司  京ICP备09084417号