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1.
含PRPL启动力的原核高效表达载体的组建及其应用   总被引:101,自引:2,他引:99  
张智清  姚立红 《病毒学报》1990,6(2):111-116
2.
一种带增强子的原核高效表达载体的构建及初步应用   总被引:30,自引:7,他引:23       下载免费PDF全文
构建的pTO-T7大肠杆菌高效融合表达载体,调控序列中有一个Ω序列和一个T7启动子串联;多克隆位点(MCS)包括8个常用酶切位点;可进行融合表达或者非融合表达,根据不同的需要加以选择;融合蛋白N端为T7g10的12个起始氨基酸,C端为His标签;含kan抗性基因作为选择标记。将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因克隆至pTO-T7载体,在E.coli中的表达结果表明,融合EGFP达到菌体总蛋白量的50%以上,90%以上的融合蛋白以可溶性形式存在,融合后的EGFP仍保持原有的荧光性质。与同时构建的不含Ω序列的pT-T7载体的表达产量的比较研究结果表明,Ω序列在pTO-T7载体中能显著提高表达效率。  相似文献
3.
表达核糖核酸酶基因的雄性不育油菜的获得   总被引:26,自引:1,他引:25  
周雪荣  方荣祥 《遗传学报》1997,24(6):531-536
从细菌Bacillusamyloliquefaciens染色体DNA中克隆了RNase(barnase)基因,构建了TA-29基因5'调控区(-1300-+3)与barnase基因的嵌合基因,通过农杆菌介导的遗传转化,获得了“双低”甘蓝型油菜“中双821”的转基因植株。转化植株与末转化植株在高度、生长速度、花器形态、花色等方面基本相同,但转化植株花丝短小、花药干瘪、没有花粉;自花授粉或以其为父本进行的异花授粉均不能结实,表现为完全的雄性不育。花药的横向解剖结构表明:转基因油菜雄性不育与绒毡层细胞的破坏有关  相似文献
4.
转几丁质酶和葡聚糖酶基因棉花的获得及其对黄萎病的抗性   总被引:26,自引:0,他引:26  
通过根癌杆菌介导法,将维管束特异启动子(竹节花黄斑病毒启动子CoYMV)启动的几丁质酶和CaMV35S启动的β-1,3-葡聚糖酶嵌合双价基因,导入陆地棉品种冀合321和中棉所35。利用卡那霉素涂抹法对转基因株的卡那霉素抗性进行初步鉴定,再经PCR和Southern杂交确证,结果显示双价抗病基因分别以1~2个拷贝整合到棉花基因组内。对转基因株系T3幼苗进行无底塑钵菌液浇根法鉴定和大田病圃鉴定,结果显示:7个转化株系均表现不同程度的抗或耐黄萎病性,苗期鉴定结果和大田病圃调查结果基本一致;其中D9910、D9915和D9919等3个转基因纯合系的大田病情指数分别为6.5、9.4和9.5.均达到高抗水平。对以上3个高抗黄萎病的纯合系进行遗传分析,结果显示这3个抗病纯合系的卡那霉素抗性符合一对显性基因分离规律。结合分子杂交验证结果,可以认为这3个转基因株均含有一个拷贝的双抗病基因。  相似文献
5.
基因工程雄性不育烟草的获得   总被引:25,自引:1,他引:24  
6.
植物基因启动子研究进展   总被引:25,自引:1,他引:24  
张春晓  王文棋  蒋湘宁  陈雪梅 《遗传学报》2004,31(12):1455-1464
综述了植物基因启动子的核心结构与功能、植物基因启动子的种类:异源组成型启动子(CaMV35S、MMV)和从植物自身克隆的组成型启动子(PTSB1和PPHYB),以及植物中通过按物理因素(温、光、旱、热等)、化学因素(离子、有机物、激素等)和生物因素(病菌、组织器官、发育阶段等)诱导表达的一些启动子,发育时期特异的启动子、器官特异的启动子(根、茎、叶等)和植物中应用的人工双向启动子的研究进展和应用前景。  相似文献
7.
基因工程雄性不育烟草及其温度敏感性   总被引:23,自引:1,他引:22  
将含有抗溴苯腈基因bxn和雄性不育基因的重组载体pTA29-Barnase/bxn导入农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)后转化烟草(Nicotiana tabacum L.),得到33个转基因植株。在27℃/23℃培养的16株中,有7株表现部分不育,另9株全部可育。而在20℃/15℃培养的17株中,12株表现不育,5株表现部分不育。部分不育的植株上同时开放可育花朵和不育花朵,不过其中的不育花朵中的花粉萌发活力很低。将在20℃/15℃条件下表现不育的12个不育株从20℃/15℃温室移至27℃/23℃温室后30d左右,其中9株表现程度不同的育性恢复现象:5株表现部分可育,另4株表现完全可育;但仍有3株表现雄性不育。雄性不育花朵的花丝变短,花药皱瘪,不散粉。细胞学观察证明,转基因植株的花药绒毡层降解提早于四分体时期,至单核小孢子时期降解殆尽。  相似文献
8.
高等植物启动子研究进展   总被引:22,自引:0,他引:22  
简述了高等植物来源启动子的多种保守顺式调控元件如TATA盒,转录起始位点,G盒等,以及双向启动子和可变启动子。着重介绍了受环境包括激素,光,创伤,真菌,逆境等因子诱导表达的植物启动子以及显示出植物发育特异性表达的启动子。  相似文献
9.
转双抗虫基因烟草的研究   总被引:22,自引:3,他引:19       下载免费PDF全文
用改造的雪花莲凝集素基因GNAmm与合成的苏云金芽孢杆菌(Bt)毒蛋白cry1Ac基因构建了带有双价基因的植物表达载体,在该表达载体中这两个基因的转录分别受笋瓜PP2启动子(SPP2P)和CaMV 35S启动子的调控。通过根癌土壤杆菌介导转化法,获得了一批抗卡那霉素的转化再生烟草植株。PCR检测及基因组DNA Southern blot\,Slot blot杂交分析的结果表明Gna基因和Bt基因已整合到烟草总DNA中。用Bt毒蛋白抗血清进行Western blot分析,转基因植株均有Bt杀虫蛋白的不同程度的表达。对转化再生烟草的虫试结果表明,在所受试的19株烟草中60%的植株上的棉铃虫在5天内死亡率达到100%,而且存活幼虫的生长发育受到明显抑制;蚜虫抑制生长试验表明,多数转化再生植株具有较强的抗蚜活性,平均能够抑制桃蚜50%~60%的蚜口密度,有的高达80%以上。以上结果表明利用这两个改造过的抗虫基因可以获得既抗虫又耐蚜的转双抗虫转基因植物。  相似文献
10.
转基因植物中外源非目的基因片段的生物安全研究进展   总被引:21,自引:0,他引:21  
生物安全(biosafety)是指与以人类和环境为对象的生物学研究所产生的效应相关的安全性[1],或对生物危害的检测、评价、监测、防范和治理的科学技术体系 ① 。遗传修饰生物体(GMO),特别是转基因植物的安全性是生物安全的重要内容,近几年已经引起政府、社会和科学界的广泛关注。转基因植物对人体健康的负面影响的考虑要点主要包括对人体的毒性、过敏原性、营养成分的改变与抗营养因子以及抗生素抗性等。对生态环境的负面影响即生态学风险的考虑要点包括转基因植物导致杂草问题,产生新病毒或加重病害,对非目标生物的影…  相似文献
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