植物血细胞凝集素对小鼠脾脏淋巴细胞γ－谷氨酰基转肽酶活性的影响

本文就植物血细胞凝集素（ＰＨＡ）作用的不同时间对小鼠脾脏淋巴细胞γ－谷氨酰基转肽酶（γ－ＧＴ）活性的影响进行了观察。结果表明,脾脏淋巴细胞转化率随给予ＰＨＡ时间的延长而上升,对照组＜２４ｈ组＜４８ｈ组＜７２ｈ组;淋巴细胞γ－ＧＴ活性于２４ｈ明显强于对照组（Ｐ＜０．００１）,随着ＰＨＡ作用时间的延长其γ－ＧＴ活性逐渐下降,即４８ｈ组与对照组已无显著差异,而７２ｈ组却低于对照组（Ｐ＜０．００１）。可见ＰＨＡ在小鼠体内对γ－ＧＴ活性有很大影响。     

α-D-甘露糖残基在猪透明带中的分布及其在受精中的作用

为证明α-D-甘露糖残基在猪透明带中的分布及其在受精中的作用,用异硫氰酸荧光素络合小扁豆凝集素(fluorescein isothiocyanate-labelled Lens culinaris,FITC-LCA,一种D-甘露糖特异结合植物凝集素)标记去除卵丘细胞的体外成熟猪卵母细胞,用于观察LCA的标记情况及体外受精,并用甘露聚糖进行体外受精的竞争抑制实验及检测对精子顶体反应的影响.结果显示,LCA均匀标记于整个透明带且呈强荧光反应;LCA标记能够显著减少透明带表面精子结合数量并几乎完全阻断卵母细胞的受精能力;甘露聚糖能够显著降低透明带精子结合数量和卵母细胞的受精率;甘露聚糖在精子培养的不同时间段上都能明显增加顶体反应的精子数量.这些结果表明,猪透明带糖蛋白上的α-D-甘露糖残基是精子受体的重要组成部分,它能够诱导精子发生顶体反应,促进精子侵入透明带.     

红腰豆凝集素的提取及初步活性研究

凝集素是研究生物体内细胞癌变、受精、分化及分子识别等生命过程极其有用的工具.同时作为一种试剂,凝集素不仅在临床医学检验上有着重要地位,而且是抗肿瘤药物生产所需的促有丝分裂原.本文中提取了红腰豆凝集素,并对活性做了初步测定,红腰豆样品于室温用缓冲液提取、离心、透析后,经D-半乳糖-Sepharose 4B亲和色谱,分离纯化出凝集素,用SDS-PAGE 进行电泳分析,分子量为30kD,能专一地凝集红细胞.经竞争酶联免疫吸附法(ELISA)测定凝集素的免疫活性,发现具有浓度依赖性的免疫活性.     

佛波酯能改变细胞表面糖蛋白N－糖链的结构

利用标记Ｎ－糖链的凝集素亲和层析法研究了佛波醇肉桂酸乙酸酯（ＰＭＡ）对人肝癌细胞ＳＭＭＣ－７７２１表面糖蛋白上Ｎ－糖链结构的影响,发现１００ｎｍｏｌ／Ｌ的ＰＭＡ处理５天后,可使细胞表面Ｎ－糖链中高甘露糖型和杂合型以及四天线、Ｃ２Ｃ２,６三天线复杂型的比例增高,而二天线复杂型降低。此结果与我们曾报道的视黄酸（ＲＡ）和双丁配环磷酸腺苷（ｄｂ－ｃＡＭＰ）对该细胞表面Ｎ－糖链的影响相反。因ＲＡ和ｄｂ－ｃＡＭＰ是ＳＭＭＣ－７７２１细胞的分化诱导剂,可抑制细胞生长;而ＰＭＡ是该细胞的增殖促进剂,故细胞表面Ｎ－糖链的变化与细胞的分化和增殖密切相关。     

高及低转移潜能小鼠肝癌细胞株糖蛋白凝集素结合特征的研究

为探讨肿瘤转移与细胞表面的糖结构的关系,对小鼠肝癌细胞的高、低淋巴道转移株ＨＣａ－Ｆ和ＨＣａ－Ｐ进行了蛋白质电泳及经蛋白质印迹术后的５种凝集素（ＣｏｎＡ、ＷＧＡ、ＵＥＡ、ＳＢＡ、ＰＮＡ）结合糖蛋白谱的对比分析。结果表明：高、低转移两株细胞的ＳＤＳ－ＰＡＧＥ谱基本相同;Ｃｏｎ Ａ特异结合糖蛋白共有５种（￣７２,８０￣９０,￣１０４,￣１５０,￣２００ｋＤ）;其中较明显的差异为￣７２ｋＤ ＣｏｎＡ特异     

用兔红细胞膜制备亲和树脂纯化红芸豆红细胞凝集素的方法

建立运用兔红细胞膜制备亲和树脂来纯化红芸豆中红细胞凝集素的方法。红芸豆经过浸提,(NH4)2SO4沉淀,红细胞膜亲和树脂吸附、洗脱得到红细胞凝集素(PHA-E)试样。采用电泳法测定其纯度、相对分子质量和等电点。用体积分数2%的兔红细胞悬液测定试样凝血活力及影响凝血因素。经PAGE分析PHA-E试样为单带,SDS-PAGE分析显示亚基相对分子质量为3.2×104,等电点为6.5。研究发现,促使50%兔红细胞产生凝集的试样蛋白质最低质量浓度为4μg/mL,单糖不影响PHA-E凝血活力,EDTA抑制其凝血活力,Zn2+促进其凝血。     

香蕉凝集素基因的克隆及在成熟果实中的特异性表达

采用RT-PCR的方法克隆香蕉凝集素(Bankc)基因,对其全序列进行了测定并与已发表的BanLec基因序列进行了比较。采用定量PCR的方法对该基因在果实成熟过程中和香蕉不同组织中的表达进行了研究,结果表明：BanLec基因的表达同时具有发育特异性和组织特异性,即仅在果实中表达,而且其表达量随果实成熟度的变化而变化。     

植物凝集素在植物体内的生理作用

现有研究表明,植物种子中的凝集素是植物体内的储存蛋白;扁豆和稻胚凝集素对胚胎的分裂和分化有促进作用;在豆科植物和根瘤菌之间的共生作用中,凝集素起着高度专一的识别作用;麦胚凝集素在种胚萌发时,起着抗真菌的作用;体外实验也证明凝集素对危害玉米的主要害虫的发育有阻碍作用;还发现植物凝集素具有酶的活性和酶抑制剂的作用,从而调节植物体的生理活动。     

雷丸凝集素的纯化及理化性质的研究

雷丸（OmphalialapidescensSchroct．）经过Tris－HCl缓冲液浸提,硫酸铵分级沉淀,离子交换,卵粘蛋白－Sepharose4B亲和层析以及Sephacryl-S100分子筛等步骤,纯化得到纯度为95％以上的雷扎凝集素（简称OLL）。比活提高45.8倍,活力回收2.5％。雷丸凝集素是单一肽链的蛋白质,分子量为12kDa,等电点为7.5,可被半乳糖抑制。具有热稳定性及酸碱（pH1～12）稳定性。2mmol／L氯化锌可使其比活提高4倍。同兔血相比,与人血进行凝集反应,其比活可提高4倍。进行圆二光谱测定,α－螺旋和β-折叠含量较高。与半乳糖间的抑制反应瞬间内完成,且空间结构变得紧密。