抑制人cFLIP 基因表达的shRNA 质粒的构建与功能验证

目的:构建特异性抑制cFLIP基因表达的质粒并检测其对肝癌细胞的影响。方法:根据人cFLIP mRNA的序列,设计合成3对cFLIP基因的shRNA,将其连入干扰载体,转染HepG2,蛋白印迹法检测基因表达情况,以检测其对肝癌细胞的影响。结果:构建了特异性抑制肝癌细胞中cFLIP表达的质粒。结论:成功构建能特异且高效阻断cFLIP表达的shRNA表达质粒,为进一步研究cFLIP基因对肝癌增殖的影响及其临床应用奠定了基础。     

中国肝细胞癌患者TACE术后死亡原因分析(英文)

目的:通过探讨中国肝细胞癌患者肝动脉化疗栓塞术(TACE)术后并发症及死亡原因,来提高临床治疗效果,并积累治疗经验。方法:通过联合检索CBM及CNKI上从1994年1月到2008年9月的关于中国肝细胞癌患者行TACE术后出现并发症的相关文章,分析总结肝细胞癌患者TACE术后死亡的原因及特点。结果:中国肝细胞癌患者TACE术后并发症较为危重,致死率较高,死亡原因有84%是肝功能衰竭、上消化道出血及肝癌破裂出血,且死亡病例发生在术后1月内的占78.7%,因此大多是早期死亡。结论:中国肝细胞患者TACE术后死亡原因主要是肝功能衰竭、上消化道出血及肝癌破裂出血,且术后死亡常为早期死亡,因此TACE术后严重并发症可直接影响患者的预后情况,我们需要提高对TACE术选择时机的重视程度,规范介入治疗手段和流程,尽量避免和减少严重并发症的发生。     

TRAIL 慢病毒载体构建及其在肝癌细胞中的表达

目的:构建携带TRAIL基因的慢病毒表达载体并实现其在肝癌细胞株HepG2中的稳定高表达。方法:构建TRAIL重组慢病毒表达载体pCDH-CMV-TRAIL-EF1-GFP-T2A-Puro,脂质体法将重组慢病毒载体和包装质粒混合物共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒,纯化并测定病毒滴度。利用Western blotting检测TRAIL蛋白在HepG2中的表达。结果:酶切以及测序证实,成功构建TRAIL基因重组慢病毒载体,纯化的慢病毒滴度为1.02×104ifμ/μL。利用嘌呤霉素筛选获得稳定表达TRAIL的细胞系,经Western blot方法检测到TRAIL蛋白的稳定高表达。结论:成功构建了带有TRAIL基因的慢病毒载体,并实现其在HepG2的稳定高表达。