无血清无饲养层条件下培养小鼠胚胎干细胞

目的研究在无血清无饲养层条件下小鼠胚胎干细胞的培养方法,为最终建立无血清无饲养层培养系统打下基础。方法比较小鼠胚胎干细胞ES-S8株在无血清培养体系和有血清培养体系中的生长情况,分析ES-S8细胞克隆形成效率,测定其生长速度;然后在撤去血清和饲养层的条件下培养ES-S8细胞,进行AKP染色和表面标记物SSEA-1免疫荧光检测。结果ES-S8细胞在无血清培养条件下细胞生长速度减缓,克隆形成率降低,但AKP染色、SSEA-1免疫荧光均显阳性;在无血清无饲养层条件下ES-S8细胞培养仍能形成克隆,且AKP染色、SSEA-1免疫荧光均显阳性。结论研究表明ES-S8细胞能够在无血清无饲养层的培养条件下生长,保持其良好的未分化特性。     

氮磷营养盐对四种淡水丝状蓝藻生长的影响

通过设定不同的氮、磷营养盐浓度,在实验室条件下研究了不同浓度的氮和磷对4种淡水丝状蓝藻:皮质颤藻、尖细颤藻、蛇形颤藻和坑形细鞘丝藻生长的影响. 结果表明,皮质颤藻和坑形细鞘丝藻对高浓度的氮、磷有着较强的适应能力,在硝态氮浓度0.016 mg·mL-1～2.0 mg·mL、磷浓度1.36 mg·mL-1～13.6μg·mL时生长较好.4株藻在只存在氨态氮的情况下生长都受到抑制.     

苏州地区儿童感染志贺菌的耐药监测

目的调查苏州地区2000年至2006年儿童感染志贺菌的耐药情况，了解其耐药趋势，以指导临床合理用药。方法对2000年至2006年苏州大学附属儿童医院临床标本中分离的589株志贺菌（福氏志贺菌470株，宋内志贺菌119株）采用K-B法对氨苄西林、哌拉西林、头孢哌酮、头孢曲松、环丙沙星、SMZ＋TMP、亚胺培南进行药敏试验。结果于7年中470株福氏志贺菌的耐药率：氨苄西林：始终在90．0％以上；哌拉西林：从22．6％逐渐上升到63．2％；头孢哌酮：1．1％～56．1％；头孢曲松：2．2％～43．9％；环丙沙星：一直在10．0％左右；SMZ＋TMP：在70．0％～96．0％波动；对亚胺培南均敏感。119株宋内志贺菌的耐药率：氨苄西林：从7．1％逐渐上升到82．8％；哌拉西林：0～79．3％；头孢哌酮：0～55．2％；头孢曲松：0～51．7％；SMZ＋TMP：在62．5％～100．0％波动；对环丙沙星和亚胺培南均敏感。结论本地区儿童感染福氏志贺菌对氨苄西林严重耐药，同时伴有对SMZ＋TMP的高耐药率，对哌拉西林和3代头孢菌素的耐药率呈逐年上升趋势。宋内志贺菌的耐药率在2004年之前（除对复方新诺明外），远低于福氏志贺菌，但在2005年其对氨苄西林和3代头孢菌素的耐药率突然上升，大有赶超福氏志贺菌之势。因此苏州地区儿童感染志贺菌的耐药情况不容乐观，对儿童细菌性痢疾的治疗将会面临困境。     

联合固氮菌Alcaligen faecalislin泌铵突变体离子不选育及鉴定

Ｎ＾＋注入野生型菌株（Ａｌｃａｌｉｇｅｎ ｆａｅｃａｌｉｓ １．４８８），筛选出抗５１．６ｍｍｏｌ／Ｌ乙二胺的泌铵突变株ＥＭ１１０５，它以ＫＮＯ３为氮源时，培养２１ｈ泌铵量可达到１．１０ｍｍｏｌ／Ｌ。研究了该突变株在不同氮源下的培养特性，推断为铵载体缺陷型。     

PPARδ在脂质代谢中的作用

PPARδ（peroxisome proliferator-activated receptor δ）是过氧化物酶体增殖物激活型受体家族中的一员,广泛表达于多种器官和组织,主要控制脂肪组织和肌肉中脂肪酸氧化和能量解耦联,抑制巨噬细胞诱导的炎症,并参与许多疾病的发生和发展。近年来随着PPARδ选择性激动剂的发展,PPARδ有望成为治疗多种疾病的一个靶点。     

Smad7对肝癌细胞增殖和迁移的影响及其临床意义

目的:探究Smad7对肝癌细胞增殖和迁移的影响及其临床意义。方法:通过转染pcDNA3.1(+)-Smad7质粒或Smad7的小干扰RNA使得Smad7在肝癌细胞系HepG2和Huh7中过表达或敲减,应用MTT法检测Smad7对肝癌细胞增殖的影响,采用细胞划痕实验以及Transwell实验探讨Smad7对肝癌细胞迁移的影响。采用qRT-PCR检测9例肝癌癌患者手术切除的组织样本中Smad7的表达。结果:过表达Smad7的肝癌细胞增殖能力与对照组相比有明显的下降,而敲减smad7能够促进肝癌细胞的增殖。过表达smad7的肝癌细胞穿过Transwell小室底膜的能力显著下降,而敲减Smad7能够促进这种能力。Smad7在肝癌癌旁组织中的表达显著高于癌组织。结论:Smad7能够在肝细胞肝癌的进展中发挥负向调控作用。     

抗甲状腺过氧化物酶抗体水平与缺血性卒中患者颅内大动脉狭窄发生和短期转归的关系

目的:探讨急性缺血性卒中患者血清抗甲状腺过氧化物酶抗体水平与患者颅内大动脉血管有无狭窄和短期转归的关系。方法:回顾性分析225例急性缺血性卒中患者的临床资料,根据颅脑MRA、颅脑CTA及DSA结果,将卒中患者分为颅内大动脉分为血管狭窄组(n=146)和非狭窄组(n=79),并将狭窄组按狭窄程度分为1-6组,每组代表一个等级。在入院24 h内检测血清抗甲状腺过氧化物酶抗体、同型半胱氨酸、C-反应蛋白、尿酸、甲功、血脂、血糖等生化指标,入院当天采用美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评定神经功能缺损情况。在出院时或发病后14 d,采用改良Rankin量表(mRS)评估临床转归。结果:颅内大动脉血管狭窄组血清抗甲状腺过氧化物酶抗体水平显著高于非狭窄组(P0.01)。血清抗甲状腺过氧化物酶抗体(TPO-Ab)[优势比(odds ratio,OR)1.003,95%可信区间(confidence interval,CI)(1.001~1.005);P0.05]水平升高是脑梗死患者血管狭窄的独立危险因素。入院时血清抗甲状腺过氧化物酶抗体水平升高与短期转归不良有关(P0.01),但校正其他混杂因素后丧失统计学意义(OR:0.998,95%CI:0.993~1.002;P0.05。结论:急性缺血性卒中患者血清抗甲状腺过氧化物酶抗体水平是脑梗死患者血管狭窄的独立危险因素,但与血管狭窄组狭窄程度及短期转归无关短期转归无关。     

用网络方法识别生物序列motif

生物序列motif的识别是后基因组时代的一个核心问题。本文首先回顾了识别motif的几种主要算法，然后根据motif的重要性和随机性介绍了利用网络识别motif的两种具有代表性的方法：一种是建立一个随机网络混合模型，利用EM算法识别其中随机的网络motif；另一种用修正的参数流算法过滤出其中的最大密度予图，即为生物序列motif，并指出这两种方法的优劣，最后还对今后研究方向给出了讨论。     

大肠杆菌二硫键氧化还原酶

真核生物中正确二硫键的形成是在内质网中由二硫键异构酶PDI及相关蛋白催化的,而在原核生物大肠杆菌中二硫键的氧化、还原和异构化发生在细胞周质,由一系列的二硫键氧化还原酶完成.从1991年Badewell发现第一个氧化还原蛋白DsbA开始,目前已发现有七种二硫键氧化还原酶.DsbB,DsbD、DsbE/CcmG及CcmH位于细胞膜上,DsbA、DsbC,DsbG在细胞周质空间中.DsbA和DsbB的氧化和电子传递链相联系,而DsbC、DsbD,DsbE,DsbG和CcmH的还原需要来自细胞质的电子传递.     

利用Red同源重组系统构建兔次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶基因打靶载体

利用EL350基因工程菌进行同源重组，成功进行基因敲除已有报道，但利用该系统进行兔次黄嘌呤-鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(Hypoxanthine guanine phosphoribosyl transferase，HPRT)基因突变和基因打靶方面的研究还没有报道。本实验首先在已经筛选到含有兔全长HPRT基因BAC克隆（LBNL1-304M19）的基础上，利用Red重组系统，通过Gap-Repair方式从此克隆上将一段47Kb无启动子的HPRT基因组片段（不含有第1个外显子）克隆到pBACLinkSp质粒上，产生pBACLinkSp-rHPRT质粒。然后基于pBACLinkSp-rHPRT质粒，设计不同的同源臂，从而删除了HPRT基因的不同编码区，成功构建了三个不同的HPRT基因打靶载体。同时对利用同源重组技术敲除不同大小的DNA片段的效率进行了研究。基于本实验所构建的三个不同的兔HPRT基因打靶载体，为探索兔成纤维细胞和胚胎干细胞基因打靶的适宜条件，及进一步获得兔HPRT基因敲除动物疾病模型奠定了基础。