GABARAP克隆表达及其抗体的制备与应用

GABARAP(GABAA-receptor-associated protein)是最新发现的与GABAA受体g2亚基胞内区有相互作用的蛋白, 目前的研究结果表明它可能是通过与微管相互作用辅助GABAA受体向细胞膜上运输并使受体在膜上聚集。本文中用PCR方法扩增出编码人GABARAP(hGABARAP)的cDNA片段, 然后分别克隆到真核表达载体pcDNA6/HA和谷胱甘肽转移酶(GST)融合蛋白表达载体pGEX4T2中。将后者导入大肠杆菌BL21中, 经过IPTG诱导后用谷胱甘肽偶联的Sep- harose-4B柱子纯化出融合蛋白GST-hGABARAP。以此蛋白作为抗原免疫家兔制备抗GABARAP的抗血清, 并用GST- hGABARAP耦联的NHS-activated Sepharose 4柱子纯化抗体。纯化的抗体可以用于真核细胞中过量表达hGABARAP的Western和免疫染色检测。结果表明, 过量表达的hGABARAP在真核细胞核和细胞质中都有表达, 部分集中于核周 区域。     

鼠PS1-GFP融合蛋白表达载体的构建研究

Presenilin1(PS1)的突变是早发家族性老年痴呆发生的重要因素之一。目前对于PS1结构和功能的研究表明,PS1作为一种多次跨膜并具有γ-secretase活性的蛋白酶,很可能参与众多的细胞信号传导通路,影响细胞分化和调亡、组织及个体的发育等等。但对于PS1的精细结构和功能目前了解甚少,为探讨PS1的精细结构和功能,本研究构建了鼠PS1-GFP融合蛋白表达载体。方法:我们设计了扩增PS1的cDNA全长的引物,以C57BL/6小鼠9天胚的RNA为模板,利用RT-PCR的方法从C57BL/6小鼠9天胚中获得PS1的cDNA,经测序确认后,将其克隆到pMD18-TVector中。设计引物:上游5’-GCCGAATTCTATGACAGAGATACCTGCACC-3’;下游5’-GAAGGATCCGATATAAAACTGATGGAATGC-3’,上游含有EcoRI酶切位点,下游含有BamHI酶切位点。利用高保真DNA聚合酶通过PCR方法将pMD18-T-PS1质粒中的PS1基因亚克隆到pEGFP-C1载体中,获得pEGFP-C1-PS1融合蛋白表达载体,然后利用EcoRI和BamHI从pEGFP-C1-PS1融合蛋白中切下PS1基因,从pMD18-T-PS1质粒中切下载体部分,经过连接,获得中间载体,利用该重组载体中的EcoRI和SalI酶切位点,酶切连接入pEGFP-N2载体中,获得pEGFP-N2-PS1融合蛋白表达载体,经测序鉴定后备用。     

濒危植物南方红豆杉濒危原因分析

南方红豆杉是我国第三纪孑遗特有树种,为国家1级濒危保护植物,主要分布于在长江流域、南岭山脉以及广东、广西、江西、河南、陕西、甘肃、台湾和山西等省（区）的山地。南方红豆杉分布区的生态环境特征是：热量充足,温暖潮湿。南方红豆杉濒危的主要原因有：（1）种子产生量少,萌发率和幼苗成活率较低（2）种群缺乏较强的竞争力,（3）地理分布的局限性,（4）对生境要求的特殊性和（5）人为破坏严重。此外,针对南方红豆杉濒危现状和原因,还提出了科学保护和可持续利用的对策。     

PS1/GFP融合蛋白对PS1的亚细胞定位的初步研究

PS1基因突变与早发家族性老年痴呆有密切联系.构建pEGFP-C1-PS1以及pEGFP-N2-PS1融合基因表达载体,于HEK293和CHO细胞系中表达PS1/GFP融合蛋白,以GFP绿色荧光作为PS1的亚细胞定位信号,通过SPOTII以及CONFOCAL显微镜进行观察,初步获得PS1全长蛋白在细胞中定位的部分信息,即PS1定位于细胞核膜,细胞质内有不均匀的分布,少量存在于细胞-细胞接触处的细胞膜上.     

芦芽山华北落叶松林不同龄级立木的点格局分析

华北落叶松林是芦芽山自然保护区的重要林型。对其建群种华北落叶松不同龄级个体的分布格局及其相互关系进行了研究。植物种群在群落中的分布格局与空间尺度有着密切关系,这里采用能够分析各种尺度下格局的分析方法——点格局分析法,其是以种群个体空间分布的坐标点图为基础。结果表明,芦芽山华北落叶松不同龄级密度差异较大,高龄级密度较大;目前华北落叶松是稳定型种群,但从长远看．,仍需人工协助更新;华北落叶松5个龄级集群分布特征比较明显,且随着龄级的增加,集群特征有更明显的趋势;各个龄级个体之间在各种尺度下都有比较显著的正关联,3～5龄级个体关联更为显著;点格局分析法能够分析各种尺度下的种群格局和种间关系,所描述的结果更符合实际,尤其是对群落结构的描述。     

中国迷蚜蝇属Milesia厘订（双翅目：食蚜蝇科）

中国原记载分布有14种迷蚜蝇。本文通过对我国迷蚜蝇馆藏标本的收集、整理、鉴定,发现有6个新异名：瑞丽迷蚜蝇M.ruiliana Yang et Cheng和清华迷蚜蝇M.tachina Yang et Cheng为黄带迷蚜蝇M.cretosa Hippa的异名,茂兰迷蚜蝇M.tachina Yang et Cheng为锈色迷蚜蝇Mferruginosa的异名,黑色迷蚜蝇M.atricorporis Yang et Cheng为黑色迷蚜蝇M.quantula Hippa的异名,拟蜂迷蚜蝇M.vesparia Shiraki和隆顶迷蚜蝇M.turgidiverticis Yang et Cheng为隆顶迷蚜蝇M.verticalis Brunetti的异名。并首次报道杂色迷蚜蝇M.variegata Brunetti在中国有分布。到目前为止,我国实际有分布的迷蚜蝇共13种(其中,棕缘迷蚜蝇M.fuscicosta (Bigot)分布在我国南海,未见标本)。本文提供了每种的腹部特征图,并列出所有中国种类的分类检索表,同时附有地理分布图。中国迷蚜蝇种类如下：闽小迷蚜蝇M.apsycta Seguy、玉带迷蚜蝇M.balteata Kertesz、黄带迷蚜蝇M.cretosa Hippa、锈色迷蚜蝇M.ferruginosa Brunetti、裂翅迷蚜蝇M.fissipennis Speiser、非凡迷蚜蝇M.insignis Hippa、马氏迷蚜蝇M.maai Hippa、桔斑迷蚜蝇M.variegata Brunetti、寡斑迷蚜蝇M.paucipunctata Yang et Cheng、黑色迷蚜蝇M.quantula Hippa、中华迷蚜蝇M.sinensis Curran、隆顶迷蚜蝇M.verticalis Brunetti和棕缘迷蚜蝇M.fuscicosta Bigot。     

苔藓植物孢子发生的研究进展

苔藓植物孢子发生的过程是一个复杂的形态建成的过程,在此过程中,孢子母细胞经过减数分裂的两次精确的核分裂以及细胞质分裂,形成单倍体的四分孢子,再经孢子壁的发育过程,形成成熟的孢子。本文重要介绍了苔藓植物孢子发生过程中细胞质裂片、质体及核的变化、微管系统及纺锤体、胞质分裂和孢子壁形成过程的特点及其研究进展。     

中国西藏甲螨新种和新纪录种记述(蜱螨亚纲:甲螨亚目)

报道西藏甲螨4新种和6新纪录种,标本采于西藏东南色季拉山,海拔3640－4800m,新种为：粒小隅甲螨Microtegeus granulatus Wang et Shen,sp.nov.,西藏真翅背甲螨Eupterotegaeus xizangensis Wang et Solhoy,sp.nov.,头新裸甲螨Neogymnobates capitatus Wang et Solhoy,sp.nov.,山溯甲螨Birsteinius monticolus Wang et Shen,sp.nov.,新纪录种为：纽氏平懒甲螨 Platynothrus nomatai Aoki,塞氏矮汉甲螨Nanhermannia sellnicki Forsslund,杜氏小赫甲螨Hermanniella dubinini Sitnikova,多齿刀肋甲螨Cultroribula dentata Willmann,曲波甲螨Unduloribates undulatus(Berlese),毛暗色甲螨Fuscozetes setosus(C.L.koch)。本文报道的波甲螨属,溯甲螨属,新裸甲螨属和暗色甲螨属为中国首次发现。     

外源DNA(基因)导入大豆的研究

大豆(Glycine max),豆科,各地均有栽培[1].世界各国许多科技工作者都致力于大豆新品种的选育和大豆品质改良方面的研究工作,尤其致力于先进育种技术和手段的研究与应用.常规育种技术是有性杂交、回交和轮回选择等,有极大局限性[2].     

太行山中段植物群落优势种生态位研究

运用TWINSPAN把样方分为8个群落类型,用Levins、Shannon-wiener生态位宽度公式和Petraitis生态位特定重叠指数公式测定群落中主要种群生态位宽度和生态位重叠,并分析各种群生态位的生态学意义。在总群落中,披针苔草和草地早熟禾的生态位宽度最大,说明它们对群落环境的适应能力最强,对资源的利用能力也最强;在不同的群落里（群落Ⅰ到群落Ⅷ）,相同种群生态位宽度有极大差别,草地早熟禾在群落Ⅱ中,B1为 2.753,B2为 15.561,在群落Ⅷ中,B1为0,B2为1;总群落中,各种群的生态位宽度明显大于其在其他群落里的生态位宽度。两个种群的生态位重叠值越大,说明它们占据越相似的资源空间,珠芽蓼和火绒草的生态位重叠值高达0.892（群落Ⅰ中）,说明它们利用资源的相似性程度很高;在总群落中,各种群之间生态位重叠值都很低。