紫外辐射对野生型、黑檀体和黄体果蝇寿命、繁殖力、求爱行为及生化指标的影响

黑色素在紫外辐射（UVR）保护方面有重要作用．所以，不同体色果蝇（Drosophila malenogaster）体内色素和抗氧化能力的差异可能影响它们对UVR的敏感性．实验通过测定遭受UVR处理的野生型（w，灰色）、黑檀体（e，黑色）和黄体果蝇（y，黄色）的寿命、繁殖力和求爱行为，对三品系果蝇的UVR敏感性进行研究．UVR主要通过诱发自由基来对机体造成氧化损伤，所以，本实验通过测定果蝇体内自由基、超氧化物歧化酶（SOD）活性和丙二醛（MDA）含量来对果蝇抗氧化能力和氧化损伤状态进行分析．结果发现，w无论是在对照组还是在紫外线处理组均具有最高的寿命和繁殖力；e和y在对照组的寿命和繁殖力差异不显著，但在紫外线处理组e的这两项指标均显著高于y（P〈0．0001）．另外，本实验发现紫外辐射对果蝇的求爱行为也有不利影响．利用电子顺磁共振谱（EPR）对辐射诱发果蝇体内O水平的检测结果显示，5min紫外辐射处理的确可诱使果蝇体内自由基水平升高，且这种变化在y体内尤为明显．对SOD活性的分析发现，紫外辐射处理并不影响果蝇体内的SOD活性，因此我们将对照组与紫外线处理组的数据合并，结果发现w体内SOD活性最高，且与y的差异达显著（P〈0．05）；e和y体内SOD活性无显著差异（P〉0．05）．对MDA分析的结果显示，随UVR辐射时间的延长，果蝇体内MDA含量显著升高（P=0．0495）．以上结果说明，紫外辐射对果蝇寿命、繁殖力以及求爱行为方面的不利影响可能与其诱发的自由基氧化损伤有关．实验发现w对紫外辐射的抵抗力最强，这可能与其在自然条件下具有明显高的寿命、繁殖力有关，而且w体内高水平的SOD也可能是一个原因．与e相比，y对UVR更敏感．但作为体内重要抗氧化酶之一的SOD，并不能对现在的结果做出解释．本研究推测e和y表     

皂荚化学成分和生物活性的研究进展

我国的皂荚植物主要有皂荚、山皂荚、野皂荚和三刺皂荚.对皂荚的萜类、黄酮类、酚酸类、甾体类等化学成分及其抗菌、杀虫、抗病毒、抗肿瘤、免疫调节作用等生物学活性进行了综述.     

芽孢杆菌TS02特异RAPD标记的SCAR标记转化和验证

利用自主分离的蜡状芽孢杆菌菌株TS02,采用RAPD 方法对TS02及其同源性相近的5株芽孢杆菌(地衣芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、凝结芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、短小芽孢杆菌)进行了RAPD条带特异性分析,从TS02基因组中筛选获得了一个533 bp的特异RAPD标记TSR1.TSR1克隆、测序后,根据其序列设计出一对特异引物P1/P2进行扩增,结果只在TS02中扩增得到目的片段,而其余对照菌株扩增为阴性,从而证明试验得到了在种水平上对该菌种进行准确鉴定的特异SCAR标记.     

中国5个地方牦牛品种遗传多样性的微卫星分析

本文以大额牛（Bos frontalis）为外群,应用16对微卫星DNA标记结合荧光-多重PCR技术,评估了5个中国地方牦牛（Bos grunniens）（帕里牦牛、斯布牦牛、西藏高山牦牛、麦洼牦牛和九龙牦牛）品种内遗传变异和品种间遗传关系。6个群体的16个微卫星座位上共检测到159个等位基因,其中有33个等位基因为5个牦牛品种所特有。6个群体的有效等位基因数（Ne）在2.2043-3.2754之间,平均杂合度（H）在0.4858-0.6153之间,平均多态信息含量（PIC）在0.4230-0.5711之间。5个牦牛品种的微卫星座位有丰富的遗传多样性;而大额牛的遗传多样性相对较贫乏。5个牦牛群体间的遗传分化系数（Gst）为0.0527,表明牦牛亚群体间遗传分化水平很低。采用邻近结合法构建聚类图和模糊聚类分析表明,5个牦牛品种分为两大类,其中斯布牦牛、西藏高山牦牛、帕里牦牛和麦洼牦牛为一大类,九龙牦牛为一类。研究结果将为中国地方牦牛品种的保护和利用提供重要的理论依据。     

TLC-生物自显影-MTT法检测滇重楼内生真菌中抗菌活性成分

本文采用TLC-生物自显影-MTT法检测了3株滇重楼内生真菌即芬芳镰刀菌、季氏毕赤氏酵母和烟曲霉正丁醇提取物对大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、白色念珠菌和稻瘟病菌的抗菌活性成分,以芬芳镰刀菌和季氏毕赤氏酵母菌液提取物中含有的抗菌活性成分为多.同时与打孔药剂扩散法的检测结果进行了比较,为进一步快速分离内生真菌中抗菌活性成分提供了依据.     

牦牛乳酸脱氢酶B基因突变体的克隆鉴定研究

通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分析证实牦牛（Bos grunniens）乳酸脱氢酶存在两种类型，根据LDH同工酶谱的特点推测牦牛LDH多态是由B基因变异所致，并由此将凝胶电泳中迁移率快的LDH同工酶谱带称为LDH－Bf类型，迁移率慢的称为LDH－Bs类型．为阐明牦牛LDH变异体的分子机制，实验从牦牛心脏组织中提取总RNA，采用RT-PCR方法分别克隆了LDH－Bf和LDH-Bs两种类型的B基因cDNA全长序列；序列比对分析发现LDH-Bf和LDH-Bs基因存在4个碱基差异；依据cDNA序列推导的氨基酸序列的比对分析，发现两者之间存在两个氨基酸差异；利用Deepview分子建模软件进行的牦牛H亚基及LDH1突变体的高级结构预测，发现突变的两个氨基酸都能产生新的H键，影响整个蛋白分子的H键网络，并进一步导致蛋白分子空间结构的变化．     

优化玉米CMS-S双向电泳体系与差异蛋白比较

利用自主创建的Rf3近等基因系不育群体（P）s和可育恢复系群体（Pf）为试材,采用改进的双向（二维）聚丙烯酰胺凝胶电泳（2D-PAGE）技术,对苗期、成株期叶片细胞总蛋白进行分析,分离到在Pf遗传背景下一特异蛋白质RRPⅥ,分子量为30.8kD,等电点为5.0,该特异蛋白质点的出现与消失可能与玉米CMS-S的育性恢复有一定关系,对其纯化分离将为Rf3基因的克隆奠定基础和进一步了解玉米质核互作不育表达模式的分子机制。讨论了采用2D-PAGE技术在玉米分子生物学研究中的优化以及基因组学与蛋白组学研究的衔接。     

大田生长的林生山黧豆体内游离氨基酸含量

林生山黧豆（Lathyrussylvestris）是一种耐干旱抗贫瘠的多年生草本植物，含有丰富的游离氨基酸，特别是含有一些非蛋白质游离氨基酸，如2，4-二氨基丁酸，γ-氨基丁酸和高丝氨酸。国外文献报道的均是各种逆境条件下生长的林生山黧豆，本文则是大田生长的林生山黧豆，种子从美国引进。数年的栽培试验，表明它能适应我国北方气候。但其体内游离氨基酸的组成特点如何，尚不清楚。为此我们采用本实验室建立的聚酰胺薄膜层析荧光定量法，结合氨基酸自动分析仪，测定了其体内的游离特殊非蛋白质氨基酸和常规氨基酸。样品采自中国农业大学科学园…     

人工感染羊嗜流产衣原体豚鼠流产模型的建立

目的通过人工感染怀孕豚鼠建立嗜流产衣原体发病模型，观察流产病理学变化的差异，确定豚鼠是否可以作为嗜流产衣原体的动物模型。方法35只清洁级怀孕40d的豚鼠随机分为7组，每组5只。将羊嗜流产衣原体分离株B10011、CG1株分别以三个剂量组（10^-1，10^-2，10^-3）腹腔攻毒1次，每只0．5mL，以灭菌生理盐水为阴性对照。攻毒后观察豚鼠的临床体征、流产和死亡数量。攻毒后20d安乐死处理剩余的大小豚鼠，无菌摘取组织，分成2份。一份-20℃冷冻保存，PCR检测病原在组织中的分布；另外一份固定于10％中性甲醛溶液，组织切片和免疫组化观察。结果（1）羊嗜流产衣原体分离株B10011和CG1均可造成怀孕豚鼠流产、产弱胎、畸形胎或死胎。2种分离株感染不同剂量造成豚鼠平均流产时间、流产数量、豚鼠死亡数量均有显著差异，且CG1株敏感性高于B10011株。（2）2个分离株均可造成肾脏、肝脏肿大，肺脏呈局灶性出血，卵巢出血坏死，胎盘子宫阜水肿；病理组织学显示肾小管上皮细胞变性、坏死，单核细胞大量增生；肝细胞颗粒样病变。脾髓质弥漫性出血，皮质区淋巴小结生发中心萎缩。（3）免疫组化结果显示衣原体包涵体主要分布于肾脏近曲小管、远曲小管，以及脾脏的髓质区。（4）PCR检测显示分离株感染后，肾脏、脾脏、肺脏、肝脏中均呈阳性。在卵巢组织中，高剂量组呈阳性。结论以B10011和CGl分离株人工感染怀孕豚鼠均可导致豚鼠出现流产，且CG1分离株敏感性较高，呈剂量一效应关系；感染豚鼠病理学变化与临床羊流产相似。因此，人工感染豚鼠流产模型可以用于反刍动物嗜流产衣原体病的研究。     

抗传染性犬肝炎病毒单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备传染性犬肝炎病毒单克隆抗体。方法将用纯化的犬腺病毒1型（CAV-1）免疫的BALB／c小鼠脾细胞与SP2／0细胞在聚乙二醇作用下融合，通过酶联免疫吸附试验（ELISA）和免疫酶试验（1EA）筛选，以有限稀释法克隆3次，制备单克隆抗体，并对制备完成的单克隆抗体进行生物学鉴定。结果成功得到2株能稳定分泌抗CAV-1的单克隆抗体杂交瘤细胞，命名为1B、2H3，经鉴定其亚型分别为IgG2a和IgG2a，2株均为kappa链。腹水的ELISA效价可达10^7-10^8，IEA效价可达1：2560—1：5120。该单克隆抗体与CPV、CDV、FPV、CCV病毒无交叉反应。结论成功制备了抗CAV-1单克隆抗体，为进一步建立相关诊断方法奠定了基础。