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目的:重组表达抗PAI抑制作用的t-PA突变体,经诱导表达、复性、纯化后进行生物学活性和酶动力学分析。方法:构建pBV220-tpa重组表达质粒,经DNA测序确认后,转化至大肠杆菌DH5a,温控诱导表达,凝胶过滤法对包涵体蛋白进行初步纯化,复性后,过刺桐胰蛋白酶亲和层析柱纯化,酶动力学分析其活性。结果:测序证实,t-PA突变体的DNA序列正确,表达蛋白占总菌体蛋白的30%,经纯化后纯度达90%以上,比活性为7.0×108IU/mg,t-PA突变体与PAI-1反应后,其活性未受到抑制。t-PA突变体酶的米氏常数Km为0.5298,最大水解速度Vmax为0.0595。结论:经生物学活性测定,表达蛋白能够明显抵抗PAI的抑制作用,并具有良好的生物活性,该突变体有可能成为用量更少、疗效更佳的新型溶栓药物。 相似文献
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目的:比较富硒北虫草和普通北虫草的总硒含量、无机硒含量和有机硒含量。方法:采用紫外分光光度法测定富硒北虫草和普通北虫草的总硒含量和无机硒含量,然后通过计算得出有机硒含量。结果:富硒北虫草中总硒含量高于普通北虫草70倍左右,而有机硒含量则大约是普通北虫草的100倍,且富硒北虫草中有机硒含量为总硒含量的97%左右。结论:鞍山华宇生物科技有限公司开发的富硒北虫草中有机硒的含量明显高于普通北虫草,具有良好的使用前景。 相似文献
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