烟草种质资源遗传多样性的IRAP和ISSR标记比较分析

采用IRAP和ISSR两种分子标记方法，对国内外28份烟草种质资源进行聚类分析，并对两种方法的结果予以比较。结果如下：（1）用IRAP方法对供试材料进行PCR扩增，共得到214条条带，其中187条具有多态性，多态性比率达87．4％。当L1取值0．495时，可将28份材料划分为3个类群；L2取值0．34时，又可将第3类群划分为3个亚类群和3个单一品种组成的独立个类；（2）用ISSR方法进行PCR扩增时，共得到334条条带，其中250条有多态性，多态性比率为75％。当L1取值0．41时，可将28份烟草种质划分为2个类群和2个独立个类Coker176、BaSmaUovina，第一类群（Ⅰ）为来自美国的两个品种RG11和K730，其它24个品种为第二类群（Ⅱ）；（3）IRAP和ISSR两种方法的相关系数为0．823（r0．01=0．478），说明这两种方法的结果高度相关，均可用来进行烟草种质资源遗传多样性的分析。用IRAP方法得到的品种间遗传相异系数（GD）平均为0．423，高于ISSR方法，而且条带更稳定、多态性比率更高，更易揭示不同品种材料的遗传差异。  

草莓高频离体再生体系的研究

以6个草莓品种为试材,研究了影响草莓不定芽再生的各种因素,建立离体叶片高效再生系统。结果表明,外植体基因型、激素种类及配比、叶龄等是影响草莓再生的主要因子,其中‘鬼露甘’叶片最佳芽诱导培养基为MS 2.0 mg/L 6-BA 0.1 mg/L IBA,‘嫜姬’叶片愈伤组织的诱导以MS 3 mg/L 6-BA 0.2 mg/L 2,4-D较好,而且1周左右的暗培养可以防止外植体的褐化。芽伸长的最适培养基为MS 0.5 mg/L 6-BA 0.5 mg/L IBA,生根的最适培养基为MS 0.2 mg/L IBA,试管苗移栽后成活率为87%。  

朵丽蝶兰二氢黄酮醇4-还原酶基因DtpsDFR的克隆与表达分析

二氢黄酮醇4-还原酶(dihydroflavonol 4-reduetase,DFR)是花色素苷合成途径中的一个关键酶。该研究利用RT-PCR和RACE技术从朵丽蝶兰‘满天红’深红色花瓣中克隆获得一个DFR基因,命名为DtpsDFR。该cDNA序列全长1 286 bp,编码378个氨基酸。氨基酸序列分析表明,DtpsDFR编码的蛋白与Bromheadia fi nlaysoniana、文心兰、大花蕙兰、石斛兰等兰科植物的DFR蛋白同源性均在76%以上,含有1个FR_SDR_e特征结构域,存在NADPH结合基序和底物特异性结合基序,属于NADB_Rossmann超家族;系统进化树显示,DtpsDFR与Bromheadia fi nlaysoniana的DFR蛋白亲缘关系最近。实时荧光定量PCR分析结果显示,DtpsDFR基因的表达量随着花的发育逐渐降低,凋谢期微量表达;在花瓣、萼片中的表达量高于唇瓣,在叶片和根中微量表达。  

花香的生物合成、调控及基因工程研究进展

花香能提高观赏植物的审美特性,并且在植物的繁衍中起着重要作用。近年来,随着分子生物学的发展,花香分子水平的研究呈现加速发展的趋势,已成为当前的一大研究热点。该文主要论述了花香的生物合成途径及关键酶基因、分子水平的调控和共调控探索、花香基因工程策略,以期为花香性状改良提供参考。  

观赏向日葵八氢番茄红素脱氢酶基因PDS的cDNA克隆与表达特性分析

采用RT-PCR和RACE技术从观赏向目葵‘闽葵3号’黄色花瓣中克隆到类胡萝卜素合成途径关键基因HaPDS的cDNA，该cDNA全长2017bp，具有一个1710bp的完整开放阅读框（ORF），编码一个570个氨基酸的蛋白质。序列分析表明，HaPDS编码的氨基酸序列与其他植物的PDs蛋白具有很高的同源性，在N-端有一个辅助因子结合结构域，C-端有一个类胡萝卜素结合域。系统进化树分析显示，观赏向日葵HaPDS与万寿菊、菊花蛋白亲缘关系较近。实时荧光定量RT-PCR技术分析表明，胁肋路因在花发育的盛花期表达量最高；不同组织中的表达量舌状花瓣〉苞片〉叶片〉绿色管状花〉黑色管状花：随着基因表达量的增加，花色由白色到黄色、金黄色转变。  

鹤望兰类黄酮3′,5′-羟化酶基因SrF3′5′H的克隆及表达分析

采用RT-PCR和RACE方法从鹤望兰黄色花萼中克隆到类黄酮生物合成途径关键基因SrF3′5′H。该cDNA全长1 766 bp,具有完整的开放阅读框（ORF）,共1 509个碱基,编码503个氨基酸。氨基酸同源性分析表明,SrF3′5′H编码的氨基酸序列与已报道的其他植物的F3′5′H蛋白具有很高的同源性。系统进化树分析显示,鹤望兰SrF3′5′H与非洲紫罗兰蛋白亲缘关系较近。应用半定量PCR分析表明,SrF3′5′H在始花期转录水平达到最高,且在蓝色花瓣中表达最高,在黄色花萼中几乎没有表达。  

虾脊兰的栽培与利用(综述)

虾脊兰具有很高的观赏价值,是一类待开发的兰花资源。我国的野生资源十分丰富,本文参考前人的研究文献,结合本身工作,着重介绍虾脊兰的分布与研究概况,对虾脊兰引种栽培和繁殖技术做简要论述,并提出我国虾脊兰属植物今后利用及研究方向的建议。  

烟草RAPD双引物与单引物PCR扩增多态性效率的比较分析

以两个亲缘关系较远的烟草（Nicotiana tabacum）品种台烟7号和白肋21为材料（GS=0.58）,研究了单引物扩增和双引物聚合扩增对RAPD-PCR分子标记多态性的影响。结果显示：双引物反应能够比单引物反应扩增出更多的多态性片段,双引物在白肋21和台烟7号中扩增出的多态性片段总数是单引物反应扩增出的多态性片段总数的6.6倍。因此,双引物RAPD的运用有助于提高烟草多态性分子标记的有效性。  

草莓ζ-胡萝卜素脱氢酶基因ZDS的克隆及特征分析

用RT-PCR和RACE技术从草莓(Fragaria ananassa Duchesne)果实中克隆到ζ-胡萝卜素脱氢酶基因ZDS，命名为FaZDS，其cDNA全长2148 bp，具有1个1710 bp的完整开放阅读框(ORF)，编码569个氨基酸。序列分析表明，FaZDS编码的氨基酸序列与其它植物的ZDS蛋白有很高的相似性。系统进化树分析表明，草莓与苹果的ZDS蛋白亲缘关系较近。原核表达结果表明FaZDS基因在大肠杆菌中能高效表达。用半定量RT-PCR技术进行组织表达模式分析表明，FaZDS基因在草莓的花、叶片和果实中均有表达，表达量为花＞红果＞粉红果＞白果＞青果＞叶。  

小苍兰花色色素成分及稳定性分析

以小苍兰(Freesia refracta)16个不同花色品种及后代为试验材料,对花瓣色素用特征显色反应和紫外-可见光谱扫描,分析其色素的成分和花色素苷的稳定性.结果表明,小苍兰花色的色素属于类黄酮化合物,含黄酮和花色素苷类物质,可能含有异黄酮,不含黄酮醇、二氢黄酮、二氢黄酮醇、查耳酮和橙酮,其中黄色系品种及后代还含有类胡萝卜素.避光下小苍兰花色素苷的稳定性要强于光照;温度对花瓣色素的稳定性有一定的影响.