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1.
董明  宫月华  王兰  袁媛 《遗传》2003,25(2):205-207
为了分析影响提取DNA的有关因素,采用标准酚—氯仿抽提法和蛋白酶消化法提取DNA。结果表明,平均每mL全血可提取200 ~ 300μgDNA;新鲜组织及OCT包埋冰冻组织提取DNA,平均每0.2g组织可获得200~300μgDNA;直接将石蜡标本提取物制作模版,PCR扩增良好。从4种组织中均获得较为纯净的DNA;OCT对组织DNA无不良影响。 Abstract:To explore influence factors of DNA extraction,the protease and phenol-chloroform method was used to extract DNA in whole blood,fresh tissues,frozen tissues embedding with OCT and tissues embedding in paraffin.It results that 200~300μg DNA was extracted from 1ml whole blood or 0.2g fresh tissues or frozen tissue embedding with OCT.DNA extracted from paraffin specimen can be directly used in PCR amplification.Purity DNA can be extracted from four kinds of different tissues.OCT hasn't harmful effect on tissue DNA extraction.  相似文献
2.
细菌生物被膜形成在难治性感染中起重要作用,本实验在体外进行铜绿假单胞菌生物被膜与抗菌药物作用的研究。铜绿假单胞菌在生理盐水特氟隆系统孵育6d,可在特氟隆表面上形成细菌生物被膜(Biofilm),经扫描电镜证实,它包裹在微菌落表面。应用环丙氟哌酸,甲红霉素,罗红霉素,穿心莲作用于生物被膜细菌并观察结果。发现与2倍MIC环丙氟哌酸作用4h后,悬浮细菌存活率降至002%,但生物被膜细菌存活率则为41%,当10μg/mL甲红霉素,12μg/mL罗红霉素,005g/mL穿心莲分别与环丙氟哌酸联合应用时,生物膜细菌存活率分别降至02%,05%和27%。结果表明生物被膜细菌对环丙氟哌酸的抵抗力较悬浮细菌明显增强,而环丙氟哌酸分别与甲红霉素,罗红霉素,穿心莲联合应用则有明显抑菌作用。推测此种联合用药方式可能提高对难治性感染的治疗效果  相似文献
3.
黄芩甙对发热大鼠下丘脑PGE2和cAMP含量的影响   总被引:18,自引:0,他引:18  
目的和方法:PGE2和cAMP是重要的中枢发热介质。为了探讨PGE2和cAMP是否参与了黄芩甙解热的机制,本实验用内毒素(ET)复制大鼠发热模型,观察黄芩甙的解热作用及对大鼠下丘脑中PGE2和cAMP含量的影响。结果:黄芩甙有明显的解热作用,并且翻转ET对下丘脑中PGE2和cAMP含量的影响。相关分析显示,下丘脑中PGE2和cAMP含量的变化与体温变化之间存在明显正相关。结论:黄芩甙可通过抑制下丘脑中PGE2和cAMP含量升高而发挥其解热作用。  相似文献
4.
锌离子参与阿尔茨海默病Aβ老年斑形成的形态学证据   总被引:14,自引:2,他引:12  
目的研究锌离子在阿尔茨海默病(Alzheimer’s Disease,AD)患者尸检大脑内的分布,为探讨锌离子参与ADβ-淀粉样蛋白(-βamyloid,Aβ)老年斑形成提供形态学证据。方法应用浸入式锌金属自显影术检测AD患者大脑内的锌离子。结果金属自显影阳性反应产物主要定位于AD患者的大脑皮质的Aβ老年斑内,在神经原纤维缠结(neuro-fibrillary tangles,NFT)和血管壁及其周围也可以见到呈棕黑色的金属自显影阳性反应产物。结论AD患者大脑皮质Aβ老年斑和NFT等处聚集大量锌离子,提示锌离子可能在AD的病理生理过程中起重要作用,即参与Aβ老年斑和NFT的形成。  相似文献
5.
中国北方人苯丙氨酸羟化酶基因外显子7内新突变的鉴定   总被引:12,自引:0,他引:12  
孙桂凤  姜莉 《遗传学报》1997,24(6):492-495
应用PCR-单链构象多态性分析及DNA直接测序,对45例中国北方苯丙酮尿症(PKU)患者苯丙氨酸羟化酶(PAH)基因外显子7内突变进行了鉴定。共检出6种错义突变及一种静止突变:R243Q.R41H,G247V.L249H.P254I.G257V和V245V。经与国际PAH基因突变数据库比较,确认G257V.P254I和L249H为国际上首次发现的突变。结果揭示,中国人与其他种族及中国北方与南方人群PAH突变特点不同。明确了中国北方人群中PAH基因外显子7基因突变分布,有助于提高PKU的基因诊断率,对基因的起源、进化研究有参考价值  相似文献
6.
病原生物学PBL模拟病例的设计   总被引:10,自引:1,他引:9       下载免费PDF全文
PBL课程模式是高等医学院校创新教育的重要组成部分。在PBL实施过程中,病例的选择与设计关系到PBL教学的成败。为激发学生独立思考、创新思维及分析问题和解决问题的能力,分别探讨了原始病例和模拟病例的作用及相互关系,提出了病原生物学PBL模拟病例设计过程中应遵循的基本原则,即客观性原则、灵活性原则、一致性原则、启发性原则和关联性原则。  相似文献
7.
维甲酸诱导的人大肠癌细胞凋亡   总被引:9,自引:0,他引:9  
本研究应用光镜、电镜技术、DNA凝胶电泳、流式细胞术及末端脱氧核苷酰转移酶原位标记(TUNEL法),观察全反式维甲酸ATRA诱导的人大肠癌CCL229细胞凋亡特征。RA诱导CCL229细胞凋亡,光、电镜下观察到凋亡小体形成等典型的形态学改变,琼脂糖凝胶电泳上呈现特征性的DNA ladder,DNA直方图上显示亚二倍体峰。10-8mol/L-105mol/L范围内,RA诱导CCL229细胞凋亡表现出时间和剂量依赖性。  相似文献
8.
PKC对小鼠受精卵发育的调控作用   总被引:8,自引:0,他引:8       下载免费PDF全文
 为研究 TPA及 PKC的反义寡核苷酸对 1 -细胞期鼠受精卵发育的影响 ,采用免疫细胞化学法标记 PKC(α及 β亚型 ) ,并用激光扫描共聚焦显微镜测定卵内 PKC荧光强度 ;同时利用显微注射法注射 PKC的反义寡核苷酸 ,观察其对受精卵分裂的影响 . 1 0 0 μg/ L TPA对 1 -细胞期受精卵的发育具有完全抑制作用 .TPA处理 1 2 h后 ,对照组受精卵停留在 1 -细胞期 ,而未经 TPA处理的1 -细胞期卵可以分裂到 2 -细胞期 .共焦激光显示实验组与对照组相比 ,PKC(α、β亚型 )荧光强度均有下降 (P<0 .0 1 ) .显微注射 PKC antisenseα及 antisenseβ的受精卵 ,分别只有 1 4 .2 %和 3.33%的卵可以发育到 2 -细胞期 .与对照组 (注射 M2培养液 )差异显著 (P<0 .0 1 ) .结果表明 ,(1 ) TPA长期处理 1 -细胞期受精卵 ,抑制 1 -细胞期卵分裂到 2 -细胞期 ;(2 ) PKC的反义寡核苷酸 (α及β亚型 )可以抑制小鼠 1 -细胞期卵的发育  相似文献
9.
Effect of rhizosphere pH on the availability and uptake of Fe, Mn and Zn   总被引:7,自引:1,他引:6  
In pot experiments the relationships between rhizosphere pH, the extractable levels of Fe, Mn and Zn in the soil and their uptake into the roots and shoots of dwarf French beans have been studied. Variations in rhizosphere pH were induced by applying three different sources of nitrogencholine phosphate, ammonium phosphate and calcium nitrate-to an initially homogenised soil (preadjusted to either pH 7 or 8). The rhizosphere pH was found to be significantly lower following the application of either ammonium or choline phosphates and to be increased by calcium nitrate treatment.The Fe and Zn contents of both shoot and root were inversely proportional to rhizosphere pH. The Mn contents also increased with decreasing pH but a sharp increase was apparent below pH 5.5. The shoot Fe, Zn and Mn content were significantly correlated with the extractable levels determined in the rhizosphere and non-rhizosphere soil.This paper forms part of the Ph. D. thesis submitted by A.N.S. to the University of Wales in 1977.  相似文献
10.
粉防己碱拮抗豚鼠庆大霉素急性肾损伤的实验研究   总被引:7,自引:1,他引:6  
目的 :探讨粉防己碱 (Tet)在庆大霉素 (GM)急性肾损伤中的拮抗作用。方法 :将豚鼠分为对照组、Tet组、GM组和Tet+GM组 ,于第 1 1d留取尿标本和肾组织 ,测定尿中NAG活性 ,观察肾组织学改变 ,用免疫组化技术测定Actin和TGF β1 在肾脏的表达。结果 :光镜和电镜显示Tet+GM组肾脏病理变化比GM组轻 ,细胞凋亡也明显少于GM组。Tet+GM组NAG活性比GM组低 (P <0 .0 1 ) ,而TGF β1 和Actin的表达在Tet +GM组高于GM组(P <0 .0 1 )。结论 :Tet能明显降低GM所致的急性肾损伤时NAG活性 ,减少Actin的破坏和细胞凋亡 ,诱导内源性TGF β1 蛋白表达水平上调 ,对GM急性肾损伤有拮抗作用  相似文献
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