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1.
高脂喂养联合链脲佐菌素注射的糖尿病大鼠模型特征   总被引:37,自引:3,他引:34  
目的观察高脂喂养联合低剂量STZ注射的SpragueDawley(SD)大鼠2型糖尿病模型的代谢特征、病理学以及胰岛分子生物学变化。方法4周龄雄性SD大鼠36只随机分为三组(1)正常对照组(Control)9只,普通饲料喂养。(2)高脂组(HighFatchow,HE)9只,高脂饲料喂养,为普通饲料中添加20%脂肪(猪油和蛋黄粉各50%)和20%蔗糖。(3)糖尿病组(DM)18只。喂养4周后腹腔注射STZ(40mg/kg)。所有大鼠做灌胃葡萄糖耐量(OGTT)试验。放免法测定血清胰岛素,免疫组化染色观察胰岛β细胞的形态学特点,彩色图像分析系统测定胰岛素表达量,RT-PCR测定胰腺β细胞胰岛素mRNA表达水平。结果糖尿病大鼠空腹血糖(FBG)、胰岛素水平(FINS)显著高于Control组和HE组大鼠(P<0.01),空腹血清甘油三酯(TG)和游离脂肪酸(FFA)水平显著高于Control组(P<0.05);胰岛β细胞吸光度(A)显著低于高脂组大鼠(P<0.05),降低11.6%。胰岛素免疫反应阳性区占胰岛百分比显著低于Control组和HE组,分别下降31.9%(P<0.05)和43.1%(P<0.01)。胰岛素mRNA表达水平显著低于HE组(P<0.05)。STZ注射后48h(基线值)大鼠FBG水平的分布情况为A组(FBG<10.0mmol/L)占7/18;B组(FBG10~19.9mmol/L)占5/18;C组(FBG≥20mmol/L)占6/18。STZ注射后9d的OGTT结果与基线值相比,B组OGTT值总体变化最小,A组FBG的变异最大,达到25%。结论高脂喂养联合低剂量STZ注射的糖尿病大鼠模型模拟2型糖尿病发生的主要病理生理过程,具有高血糖、高胰岛素血症以及血脂异常等基本特征。  相似文献
2.
红细胞膜脂流动性的研究进展   总被引:18,自引:0,他引:18  
3.
1557株酵母菌的鉴定及其药敏试验分析   总被引:11,自引:2,他引:9  
目的 研究临床分离的酵母菌种类及其对药物的敏感性。方法 采用API 20C、显色培养基对2004-2005年北京协和医院细菌室分离到的1557株念珠菌进行菌株鉴定,并对2005年收集的酵母菌采用ATB FUNGUS 2对氟康唑,伊曲康唑,两性霉素B,5-氟胞嘧啶进行药物敏感性试验;并以whonet 5.3软件进行结果分析。结果 在1557株酵母菌中自念珠菌为57.5%,热带念珠菌为17.0%,光滑念珠菌为14.8%,克柔念珠菌为2.8%,近平滑念珠菌为2.3%,葡萄牙念珠菌为0.9%,新生隐球菌为0.7%,季也蒙念珠菌0.4%,其他菌株共为3.6%。药敏结果显示:近平滑念珠菌、白念珠菌、热带念珠菌、光滑念珠菌、克柔念珠菌和其他念珠菌对氟康唑的敏感率分别为100%、97.6%、94.5%、81.1%、9.1%和75.0%;对5-氟胞嘧啶的敏感率分别为100%、98.0%、98.0%、99.0%、9.5%和88.0%。伊曲康唑对克柔念珠菌和未鉴定到种的念珠菌的MIC90为1μg/ml,光滑念珠菌为4μg/ml,热带念珠菌为0.5μg/ml,白念珠菌和近平滑念珠菌均为0.125μg/ml;两性霉素B对所有念珠菌的MIC50和MIC90均为0.5μg/ml。结论 白念珠菌比例最高,其次为热带念珠菌及光滑念珠菌。5-氟胞嘧啶和氟康唑对除克柔念珠菌之外的所有念珠菌敏感度都很高,两性霉素B对所有念珠菌的MIC90都很低,伊曲康唑对除克柔念珠菌和光滑念珠菌之外的其他菌株的MIC90较低。  相似文献
4.
为了研究中国人群中TNFα基因与强直性脊柱炎(ankylosing spondylitis,AS)病理发生的潜在关系,我们通过对中国南方75名AS患者的TNFα基因启动子进行扫描分析,发现-850处突变型T等位基因出现频率较高(39.3%)。经Case-Control研究发现TT突变基因型在AS组中的分布显著高于对照组(10.7% vs 2.1% ,P=0.003);突变型T等位基因携带者在AS组与对照组间分布差异极其显著(68.0% vs 21.4%,P=7.928×10-13)。按性别分组后,发现TX基因型和非TX基因型在AS组和对照组之间的分布差异同样具有统计学意义(男性:P=1.029×10-10;女性: P=0.001),此多态位点在男性和女性中都与AS发生存在显著性关联。经文献查新未见本突变位点在国内外有与AS存在相关的报道。本研究证实了我们的研究假设,TNFα基因启动子-850C→T的突变可能是AS发生的新易感基因。Abstract: To study the potential correlations between variances of TNFαgene and onset of ankylosing spondylitis in Chinese population, We scanned and analyzed the promoters of TNFαgenes in 75 AS patients from south of China and found –850 T mutation allele frequency rather high (39.3%).By case-control study, the distribution of TT genotype is significantly higher in AS patients than that in normal subjects (10.7% VS 2.1%,P=0.003); Mutation T allele has a remarkable difference between AS group and normal control (68.0% vs 21.4%,P=7.928×10-13). The difference in distribution of TX genotype and non -TX genotype is also significant statistically between different genders(male: P=1.029×10-10;female: P=0.001).The result suggests that this variation has a strong association with AS in males and females. No similar reports about the association between AS and the T mutation allele have been acquired. Therefore, our hypothesis can be supported by our results on the whole and the –850C→T mutation allele in the region on promoter of TNFαgene is likely one of susceptible genes to AS.  相似文献
5.
 为探讨禁食和胰岛素对解偶联蛋白 - 1、2、3基因 (UCP1 ,2 ,3)表达的影响 ,应用 RT- PCR方法观察了在不同禁食时间和应用胰岛素条件下大鼠白色脂肪组织、棕色脂肪组织和骨骼肌中 UCP1 ,2 ,3m RNA水平的变化 .UCP1基因只在大鼠棕色脂肪组织中表达 .UCP2 ,3基因在三种组织中均有表达 ,在白色脂肪组织中以 UCP2表达为主 ;在骨骼肌中以 UCP3表达为主 .过夜禁食使棕色脂肪组织 UCP1 ,3m RNA水平明显下降 (P<0 .0 1 ) ;UCP2 m RNA水平在三种组织中均呈上升反应 ,以白色脂肪组织中表现最为明显 (P<0 .0 5) ;而对白色脂肪组织和骨骼肌中 UCP3基因表达无明显影响 .禁食时间延长至 48h,除棕色脂肪组织中 UCP2 ,3基因有明显下降外 ,各组织中UCPs基因表达基本调节至正常或高于对照组水平 .胰岛素对 UCPs基因表达水平有一定的上调作用 ,这一作用对棕色脂肪组织 UCPs各基因及骨骼肌中 UCP3基因表现得尤为明显 (P<0 .0 5) .大鼠 UCPs基因表达有一定的组织特异性 ;禁食时间对三种组织中 UCPs各成员基因表达的影响有时相上的区别 ;胰岛素可以调 UCPs各成员基因的表达 .结果反映了 UCPs各成员在能量代谢调节上的不同作用 ,这为理解膳食 -产热与体重调节的关系 ,及其能量代谢平衡与疾病关系提供了实验依据  相似文献
6.
Tilling技术及其在遗传学中的应用   总被引:7,自引:0,他引:7  
张宁  杨泽 《生命的化学》2004,24(6):516-517
Tilling技术是近年来发展起来的一种用于检测点突变的新方法,由于该技术通量高、实验成本低、高效快捷,目前已被广泛应用于农业研究中.随着Tilling技术的不断发展,它将成为遗传学领域中,特别是功能基因组研究中发现基因多态性和大规模筛查基因突变的有效手段.  相似文献
7.
汪歌  薛克勋 《动物学报》1992,38(3):309-317
SCID小鼠是一种T和B淋巴细胞严重缺陷的动物,是肿瘤学和免疫学等学科研究的很有用的模型。 将SCID小鼠饲养于塑料薄膜隔离器内,保持无特定病原体状态。其平均每窝产仔数为3.4只,不育率为27.2%,离乳率为73.5%。该小鼠胸腺无皮质结构,髓质保留,缺乏淋巴细胞;脾脏内滤泡呈淋巴细胞脱空状态;淋巴结皮质区不明显,整个淋巴结呈淋巴细胞脱空状态;小肠粘膜下淋巴样组织无淋巴细胞聚集。外周血淋巴细胞仅占白细胞总数的10-24%。该小鼠基本符合免疫学试验要求。  相似文献
8.
发光细菌lux报告基因系统的评价及应用   总被引:7,自引:0,他引:7  
细菌生物发光基因(lux)的成功分离和表达极大地促进了其在应用和基础研究上的进展,几乎所有的发光细菌可归于3个属(发光杆菌属(Photobacterium);弧菌属(Vibrio);异短杆菌属(Xenorhabdus)),lux基因是编码和调控发光细菌生物发光的操纵子,与其他报告基因相比,具有快速、简便、灵敏和对细胞无伤害的优点,在分子生物学、临床微生物、以及生化检测中呈现潜在应用价值。本文就lux报告基因系统的优缺点及其与常用的几个报告基因系统进行比较和评价,并就lux报告基因系统在基因表达、…  相似文献
9.
反相高效液相色谱法测定血清中γ-氨基丁酸   总被引:7,自引:0,他引:7       下载免费PDF全文
建立一种高灵敏度的氯甲酸芴甲酯柱前衍生荧光检测反相高效液相色谱法测定血清中γ-氨基丁酸的方法.内标为己氨酸, 固定相为Shim-Pack CLC-ODS(M), 4.6 mm×150 mm, 填充料为5μm; 流动相采用二元梯度洗脱, A相为0.05 mol/L醋酸钠缓冲液∶水∶四氢呋喃∶冰乙酸(250∶100∶15∶2.2), B相为乙腈∶甲醇(4∶1).系统研究了pH值、反应时间、离子强度及衍生化试剂用量对衍生化反应的影响, 确定最佳反应条件和最佳色谱条件.方法的精密度为批内变异系数<4.6%,批间变异系数<6.1%;最低检出限(信噪比=2)为3.1 nmol/L;线性范围为50~1000 nmol/L, γ2=0.9992;平均回收率为97.1%.  相似文献
10.
目的 建立SYBR Green Ⅰ荧光染料实时定量RT-PCR方法,测定猴免疫缺陷病毒(SIV)RNA拷贝数.方法 巢式RT-PCR扩增SIV病毒RNA gag基因上1360-1837之间的长度为477 bp的片段,将该片段克隆到pGEM T载体上,构建pGEM-SIVgag477质粒.该质粒经限制性内切酶Not I酶切后,进行体外转录,转录出的RNA产物(RS)纯化后10倍系列稀释,作出标准曲线,作为SIV病毒RNA荧光定量检测的外标准品.结果 应用Qiagen公司QuantiTect SYBR GREEN RT-PCR Kit,该标准品可精确定量到100 copies/μL.结论 制备的RS外标准品纯度高,SYBR Green Ⅰ荧光染料实时定量RT-PCR法特异性、敏感性高,稳定性好,可用于定量测定猴免疫缺陷病毒(SIV)RNA拷贝数.  相似文献
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