改良逆转录环介导等温扩增检测技术快速实时检测H9亚型禽流感病毒

利用改良逆转录环介导等温扩增(RT-LAMP)技术建立一种快速、灵敏的检测方法用于H9亚型禽流感病毒检测。根据H9亚型禽流感病毒血凝素(HA)基因保守区序列中的8个区段设计6条特异性引物,在恒温条件下进行核酸扩增反应,并以琼脂糖凝胶电泳和目视检查绿色荧光两种方法对扩增结果进行判定。结果表明,RT-LAMP的最小检测限为100 fg,灵敏度比PT-PCR高100倍,且与H5亚型、H7亚型禽流感病毒,新城疫病毒(NDV)无交叉反应。目视检查绿色荧光与常规琼脂糖凝胶电泳的判定结果一致。整个扩增检测过程在35 min内即可完成。利用临床样本对RT-LAMP法进行验证,结果与RT-PCR一致。由实时浊度分析得到的标准曲线,计算出临床样本中的病毒质粒拷贝数均在2×107-2×104之间。因此,本研究建立的RT-LAMP方法快速、灵敏、特异性强,是H9亚型禽流感病毒的一种高效检测方法。  

基于悬液芯片系统的新城疫病毒强、弱毒高通量检测方法的建立

目的:利用悬液芯片系统建立一种高通量检测新城疫病毒强、弱毒的方法并将该方法的灵敏度与传统的酶联免疫反应(ELISA)进行比较.方法:将F48E9和LaSota单克隆抗体通过共价偶联的方式连接到聚苯乙烯微球的表面构成捕获抗体,利用捕获抗体、检测物、生物素化的多抗及链霉亲和素化的藻红蛋白建立双抗夹心的免疫检测模式.检测物作为抗原与捕获抗体结合后与生物素化的新城疫多抗进行反应,反应完成后,用链霉亲和素标记的荧光探针对反应产物进行标记得到悬液芯片系统的检测物.结果:微球包被实验结果表明,包被100 μL微球所需F48E9和LaSota单克隆抗体的最佳量分别是14.85 μg和17.65 μg;新城疫病毒多抗的最佳稀释倍数为400倍；悬液芯片检测方法检测NDV强毒的灵敏度为1∶160,弱毒的灵敏度为1∶320;抗体特异性实验表明,该方法所使用的两种捕获抗体的体异性良好.该方法与传统的ELISA在相同灵敏度的前提下,其在检测时间、检测步骤及高通量方面优于ELISA.结论:基于悬液芯片系统的新城疫强、弱毒高通量检测方法的建立对于该病毒的快速诊断具有重要的意义.  

瑞舒伐他汀对老年冠心病伴高脂血症患者血脂及高敏C反应蛋白的影响研究

目的：观察老年冠心病伴高脂血症患者应用瑞舒伐他汀治疗后的血脂及高敏C反应蛋白变化。方法：随机将2012年7月～2013年6月在本院治疗的68例冠心病合并高脂血症患者分为两组，对照组采用常规治疗方法治疗，在对照组的基础上，治疗组给予瑞舒伐他汀，治疗周期均为2个月，观察两组治疗前后的血脂及高敏C反应蛋白水平的变化，并统计治疗期间两组不良反应发生情况。结果：两组治疗前的TC、TG、LDL．C、HDL．C差异不显著，P〉0．05；而治疗后，两组的TC、TG、LDL—C水平均出现下降，HDL-C水平上升趋势，但观察组治疗后的TC、TG、LDL-C水平均明显低于对照组的（P〈0．05），观察组治疗后的HDL—C水平均明显高于对照组的（P〈0．05）。治疗组治疗前的hs．CRP为（3．86±1．12）mg/L，对照组治疗前的hs—CRP为（3．82±0．84）mgm，两组差异不显著（P〉0．05），治疗后，两组的hs-CRP均出现下降，治疗组的hs—CRP为（2．57±0．66）mg／L，对照组的hs—CRP为（3．23±0．66）mg／L，两组差异显著（P〈0．05）。两组治疗后均出现轻微的不良反应症状，治疗组不良反应发生率为8．82％，对照组不良反应发生率为23．53％，两组差异不显著（x2=0．497，P=0．780〉0．05）。结论：瑞舒伐他汀能有效地改善冠心病合并高脂血症的血脂，降低高敏C反应蛋白，值得在冠心病合并高脂血症临床治疗中更广泛地应用。