苏铁蕨配子体发育的研究

用无机培养基培养苏铁蕨(Brainea insignis (Hook.)J.Sm.)的孢子,显微镜下观察记录其孢子萌发及配子体形态发育过程.结果表明:孢子褐色,单裂缝,具周壁,稍褶皱.接种3 d左右孢子萌发,萌发类型为书带蕨型(VittariaType),原叶体发育类型为槲蕨型(Drynaria Type).接种15 d左右发育为片状体.接种25 d左右发育为成熟原叶体,呈心形,其翼面和翼缘均分布有毛状体.精子器由3细胞构成,成熟颈卵器颈部由4列细胞组成,4～5层细胞高.     

禽流感H5N1亚型病毒感染ICR小鼠的动物模型

目的 建立H5N1禽流感病毒感染ICR小鼠的疾病动物模型.方法 将100 μL H5N1 禽流感病毒原液(EID50为105.37/0.2 mL) 鼻腔接种ICR小鼠,设生理盐水组、正常尿囊液组对照,接毒后14 d内每隔12 h观察一次,主要观测指标有临床体征、体重和体温变化、死亡率、病理变化、病毒分离和血清抗体检测 (ELISA方法).结果 被感染的ICR小鼠的病程可以划分为潜伏期 (第0～1天)、急性感染期 (第2～7天)、恢复期 (第8～14天),急性感染期表现出活动明显减少,弓背,反应性差,扎堆;接毒后第1天开始体温和体重下降,第6天体温和体重停止下降;接毒组ICR小鼠累计的死亡率为60%;急性感染期ICR小鼠的肺部病变最严重,表现为间质性肺炎,肺间质充血、水肿和淋巴细胞浸润,毛细血管扩张,上皮细胞变性、坏死、脱落,并有充血和单核细胞浸润;接毒后第1天至第8天可在小鼠的肺、脑、气管和心、肝、脾、肾分离到病毒;接毒后第6天从ICR小鼠血清中检测到抗体.结论 本实验室建立的H5N1禽流感病毒感染ICR小鼠的模型在临床表现、体重变化、死亡率、病理变化、病毒复制指标能达到禽流感病毒疾病模型的造模要求,符合人类禽流感感染疾病的基本特征.     

质粒pRSET-A前导肽串联多聚体的构建及其多克隆抗体制备*

质粒pRSET-A是一个常用的高效原核表达载体，编码一N端含组氨酸标签（6×His）的34aa前导肽序列，以方便利用抗组氨酸标签抗体鉴定或纯化所表达的重组蛋白。本实验设计一对两侧含编码疏水性氨基酸密码子的引物，经过扩增前导序列10~34aa基因序列，并重新克隆入质粒pRSET-A构建串联二聚体后，再利用质粒pRSET-A的BamH I / Bgl II同尾酶克隆位点，经一系列简单的酶切和连接，快速构建这一前导肽中不含组氨酸标签序列的串联多聚体基因，并成功表达其六聚体重组蛋白。将此重组蛋白主动免疫山羊，获得了能够特异地识别pRSET-A编码的N端前导肽序列的抗体。结果显示，所制备的羊抗10~34aa前导肽抗体能够识别pRSET-A指导表达的含有完整前导肽的重组蛋白，但不能识别不含10~34aa序列的重组蛋白；同时，利用同位酶技术可以快速高效构建短肽的串联多聚体以制备具有高免疫原性的亚单位疫苗或免疫调控物质。     

固相微萃取气质联用分析百里香花和叶挥发性成分

利用顶空固相微萃取技术(SPME)采集百里香Thymus mongolicus花和叶的挥发性成分,采用GC/MS技术分析鉴定,并用峰面积进行归一化定量。结果表明,从百里香花和叶总离子流图中分别鉴定出24、14种化合物,分别占总峰面积的99.573%和97.187%。百里香花和叶主要成分包括酚类和萜烯类,其中百里香酚在百里香花和叶中分别占35.38%和49.13%。     

磷有效性对大豆菌根侵染的调控及其与根构型、磷效率的关系

以30个不同根构型的大豆基因型为材料，通过盆栽试验，研究了生长介质磷有效性对大豆接种摩西球囊霉属丛枝菌根真菌的影响及其与根构型、磷效率的关系.结果表明：生长介质磷有效性显著地影响大豆菌根真菌的接种效果.低磷条件下接种菌根真菌效果明显，菌根侵染率较高，菌根对大豆磷吸收的贡献率较大；高磷条件下接种菌根真菌效果不显著，菌根侵染率较低，菌根对大豆磷吸收的贡献率较低.磷有效性和大豆根构型对菌根真菌接种的影响具有交互作用.低磷条件下，中间型和深根型大豆的菌根侵染率最高，浅根型最小.高磷条件下，根构型与菌根侵染率间的关系不明显.根构型和菌根侵染状况对大豆磷效率的贡献存在互利互补关系，磷效率高的大豆基因型一般具有较好的根构型或较高的菌根侵染率.     

虎杖原生质体分离纯化及电融合初步研究

以野生虎杖根状茎芽为外植体诱导虎杖愈伤组织,选取生长状况良好的愈伤组织作为原生质体分离材料,通过L16（44）正交试验对虎杖原生质体分离条件进行优化.结果表明：1.4%纤维素酶R-10,0.1%果胶酶,17%甘露醇的酶液,酶解时间7h,虎杖原生质体分离效果最好.在80r/min振荡分离后虎杖原生质体得率为46.2%.以800r/min的离心速度纯化,纯化的原生质体得率为43.8%,其中原生质体的成活率为75%.通过对虎杖原生质体进行融合,原生质体的融合率为20.2%.     

B型烟粉虱在四种葫芦科寄主植物上的发育和繁殖

研究了B型烟粉虱在4种葫芦科寄主植物黄瓜、节瓜、苦瓜和丝瓜上的发育和繁殖特性.结果表明，B型烟粉虱在节瓜上的世代发育历期最短，为19.3 d，在苦瓜上的世代发育历期最长，为29.0 d；世代存活率在黄瓜上最高，为92.85％，在苦瓜上最低，为53.08％；平均单雌产卵量在黄瓜上最多，为187.4粒，苦瓜上最少，为30.0粒；雌成虫寿命以在黄瓜上最长，为25.2 d，在苦瓜上最短，为10.9 d.B型烟粉虱在黄瓜、节瓜、苦瓜和丝瓜上的内禀增长率（r_m）分别为0.1453、0.1429、0.0616和0.1055.综合比较4种葫芦科植物，黄瓜是B型烟粉虱的最适宜寄主.     

卵形鲳鯵对刺激隐核虫的免疫应答和免疫保护研究

用刺激隐核虫（Cryptocaryon irritans）的幼虫对卵形鲳鯵（Trachinotus ovatus）进行腹腔注射和体表感染,然后每隔一周用阻动试验（Immobilization assay）检测免疫鱼的抗血清和皮肤培养液对刺激隐核虫幼虫的阻动效价,在第14周中,分别用亚致死剂量和致死剂量的刺激隐核虫幼虫对免疫鱼攻毒以检测所产生的免疫保护力。实验结果显示：两种免疫方法都能让卵形鲳鯵的血清和皮肤生成阻动刺激隐核虫幼虫的特异性抗体,并能使被免疫鱼获得明显的免疫保护,但是体表感染免疫组的血清和皮肤培养液的阻动效价都要比腹腔注射免疫组高,所获得的免疫保护力也更强。同时还发现,免疫鱼血清和皮肤培养液中的抗体存在明显的差异：两者的最初生成时间、达到峰值的时间、变化规律以及阻动效价等都不一致。因此,我们推测鱼类的系统免疫应答和皮肤黏膜免疫应答有可能是相互独立的,或者是不同步的。鱼类的体液免疫应答,特别是黏膜免疫应答对抵御刺激隐核虫的感染起了重要的作用,采用刺激隐核虫虫体疫苗可能成为预防海水鱼类白点病的一种选择。     

禽抗微生物肽的结构、分布及活性研究进展

抗微生物肽是生物体产生的一种具有抗微生物活性的多肽,具有抵抗原生动物、真菌、病毒、革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌的活性,不易产生耐药性,有取代传统抗生素的发展趋势.众多学者对禽类抗微生物肽进行了大量的研究,从禽类中陆续分离到20多种新的抗微生物肽,主要综述了禽抗微生物肽的结构、分布及活性研究进展,为禽抗微生物肽的进一步探索研究奠定基础.     

人工湿地对胡子鲇养殖水体循环净化的研究

以大型观光植物美人蕉-砾石为基础的垂直流人工湿地对胡子鲇养殖水体进行净化处理和回流使用,在胡子鲇养殖中测定了水体主要水质指标的变化,表明人工湿地对养殖水体净化效果显著,养殖期间BOD5、COD、TN的平均去除率分别为81.77%、55.55%和65%,净化后水质部分符合渔业用水标准,可以循环利用.对照池水体由于BOD5、COD、TN得不到去除而持续增加,混浊度显著高于实验池,并出现水华.这种水体循环养殖模式具结构简单和易推广等优点.