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1.
Molecular genetic maps are commonly constructed by analyzing the segregation of restriction fragment length polymorphisms (RFLPs) among the progeny of a sexual cross. Here we describe a new DNA polymorphism assay based on the amplification of random DNA segments with single primers of arbitrary nucleotide sequence. These polymorphisms, simply detected as DNA segments which amplify from one parent but not the other, are inherited in a Mendelian fashion and can be used to construct genetic maps in a variety of species. We suggest that these polymorphisms be called RAPD markers, after Random Amplified Polymorphic DNA.  相似文献
2.
A series of yeast shuttle vectors and host strains has been created to allow more efficient manipulation of DNA in Saccharomyces cerevisiae. Transplacement vectors were constructed and used to derive yeast strains containing nonreverting his3, trp1, leu2 and ura3 mutations. A set of YCp and YIp vectors (pRS series) was then made based on the backbone of the multipurpose plasmid pBLUESCRIPT. These pRS vectors are all uniform in structure and differ only in the yeast selectable marker gene used (HIS3, TRP1, LEU2 and URA3). They possess all of the attributes of pBLUESCRIPT and several yeast-specific features as well. Using a pRS vector, one can perform most standard DNA manipulations in the same plasmid that is introduced into yeast.  相似文献
3.
Integrins: versatility, modulation, and signaling in cell adhesion.   总被引:649,自引:0,他引:649  
R O Hynes 《Cell》1992,69(1):11-25
4.
关于植物核型分析的标准化问题   总被引:601,自引:25,他引:576       下载免费PDF全文
近年,我国的植物染色体研究工作,进展较快,并取得了显著的成绩。但在研究工作中仍存在一个迫切需要解决的问题,即核型分析的标准化问题。由于国际上尚无植物核型分析的共同标准,因此,有关染色体的统计、测量、命名、图表格式等等,各人所采用的方法和标准也不尽相同。这种状况,对核型资料的比较分析以及对研究结果的评价,都带来不便。有鉴于此,1984年8月在辽宁兴城召开的第一届全国植物染色体学术讨论会上,李懋学和陈瑞阳联名作了“关于植物核型分析的标准化问题”的报告,经过  相似文献
5.
Programmed cell death (PCD) plays a key role in developmental biology and in maintenance of the steady state in continuously renewing tissues. Currently, its existence is inferred mainly from gel electrophoresis of a pooled DNA extract as PCD was shown to be associated with DNA fragmentation. Based on this observation, we describe here the development of a method for the in situ visualization of PCD at the single-cell level, while preserving tissue architecture. Conventional histological sections, pretreated with protease, were nick end labeled with biotinylated poly dU, introduced by terminal deoxy-transferase, and then stained using avidin-conjugated peroxidase. The reaction is specific, only nuclei located at positions where PCD is expected are stained. The initial screening includes: small and large intestine, epidermis, lymphoid tissues, ovary, and other organs. A detailed analysis revealed that the process is initiated at the nuclear periphery, it is relatively short (1-3 h from initiation to cell elimination) and that PCD appears in tissues in clusters. The extent of tissue-PCD revealed by this method is considerably greater than apoptosis detected by nuclear morphology, and thus opens the way for a variety of studies.  相似文献
6.
7.
Overlap extension represents a new approach to genetic engineering. Complementary oligodeoxyribonucleotide (oligo) primers and the polymerase chain reaction are used to generate two DNA fragments having overlapping ends. These fragments are combined in a subsequent 'fusion' reaction in which the overlapping ends anneal, allowing the 3' overlap of each strand to serve as a primer for the 3' extension of the complementary strand. The resulting fusion product is amplified further by PCR. Specific alterations in the nucleotide (nt) sequence can be introduced by incorporating nucleotide changes into the overlapping oligo primers. Using this technique of site-directed mutagenesis, three variants of a mouse major histocompatibility complex class-I gene have been generated, cloned and analyzed. Screening of mutant clones revealed at least a 98% efficiency of mutagenesis. All clones sequenced contained the desired mutations, and a low frequency of random substitution estimated to occur at approx. 1 in 4000 nt was detected. This method represents a significant improvement over standard methods of site-directed mutagenesis because it is much faster, simpler and approaches 100% efficiency in the generation of mutant product.  相似文献
8.
The scanning model for translation: an update   总被引:480,自引:28,他引:452       下载免费PDF全文
The small (40S) subunit of eukaryotic ribosomes is believed to bind initially at the capped 5'-end of messenger RNA and then migrate, stopping at the first AUG codon in a favorable context for initiating translation. The first-AUG rule is not absolute, but there are rules for breaking the rule. Some anomalous observations that seemed to contradict the scanning mechanism now appear to be artifacts. A few genuine anomalies remain unexplained.  相似文献
9.
The hallmarks of cancer   总被引:440,自引:0,他引:440  
Hanahan D  Weinberg RA 《Cell》2000,100(1):57-70
10.
Oncogenes and signal transduction.   总被引:384,自引:0,他引:384  
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