敲低PFKP联合肉碱棕榈酰基转移酶抑制剂etomoxir协同对肾透明细胞癌细胞Caki-1的抗肿瘤作用

目的:研究敲低P型磷酸果糖激酶(phosphofructokinase,PFKP)联合肉碱棕榈酰基转移酶抑制剂etomoxir对肾透明细胞癌Caki-1细胞的影响,并进一步探究其作用机制。方法:利用Western blot验证对照及PFKP shRNA敲低肾透明细胞癌细胞中PFKP的敲低效率,分别检测对照组(shCtrl)、PFKP敲低组、etomoxir组(shCtrl+etomoxir)、PFKP敲低联合etomoxir组的增殖曲线。使用Annexin-V/PI染色并用流式细胞检测对照组、PFKP敲低组、etomoxir组、PFKP敲低联合etomoxir组的细胞死亡,研究PFKP敲低联合etomoxir对细胞存活的影响。分别检测对照组、PFKP敲低组、etomoxir组、PFKP敲低联合etomoxir组的ATP水平与脂肪酸变化。结果:Western blot结果验证了PFKP的敲低效率。流式细胞检测显示,对照组、PFKP敲低组、etomoxir组、PFKP敲低联合etomoxir组的平均细胞死亡率分别为1.1、1.9、13.9、31.3%。PFKP敲低联合etomoxir组Caki-1细胞的死亡率显著高于单纯PFKP敲低与etomoxir组(P0.05)。PFKP敲低联合etomoxir组Caki-1细胞的ATP水平显著低于单纯PFKP敲低与etomoxir组(P0.05)。Etomoxir的加入抑制了PFKP敲低引起的游离脂肪酸下降(P0.05)。结论:PFKP敲低联合etomoxir对Caki-1细胞呈现协同的细胞毒抗肿瘤作用。     

上尿路腔内手术中降低肾盂压力机制与方法的研究进展

1983年,Wickham教授首先提出微创外科(minimally invasive surgery),此后,微创泌尿外科逐渐成外具有科学意义上的微创外科学的一个重要的分支学科。上尿路的腔内手术,包括PNL(Percutaneous nephrolithotomy)、URS(Ureteroscopic)、f-URS(Flexible ureteroscope)等。与传统手术相比,上尿路的腔内手术具有创伤小、时间短、恢复快、并发症少,并且可以直视下进行手术操作,临床应用较广泛。在腔内操作时,为保证术中手术视野的清晰度,手术多采用生理盐水(NS)进行灌注,进而导致肾盂压力升高,引起各项潜在的危害。因此如何在上尿路腔内手术中降低肾盂压力成为一个研究的热点。近些年,腔内器械的改进,包括镜体灌注通道入路与出路的分开设计、回流鞘的设计、压力泵的改进,在一定程度上降低了肾盂压力。灌注液体中加入相应浓度的药物,抑制上尿路平滑肌的蠕动与收缩,也在一定程度上降低了肾盂压力。本文介绍了上尿路腔内手术中肾盂压力的影响因素,回顾了肾盂压力升高后的危害,分析了肾盂压力升高机制,总结了肾盂压力降低的各种方案以及将来的应用前景。     

螺旋藻源血管紧张素转化酶抑制肽的纯化和鉴定

血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂通过影响肾素-血管紧张素系统,对减缓和抑制高血压具有重要的作用.该研究通过超滤、凝胶过滤色谱、反相高效液相色谱等方法,从钝顶螺旋藻的木瓜蛋白酶水解液中分离、纯化得到一种血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽,并利用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)和氨基酸测序对纯化肽进行鉴定.此外,对其抑制类型和体外模拟消化环境稳定性也进行了研究.结果表明,分子质量范围为0～3000ku的酶解液ACE抑制活性最高,IC50值为(1.03±0.04)g/L.该部分酶解液通过纯化获得ACE抑制肽,IC50值为(0.0094±0.0002)g/L,相当于(27.36±0.14)μmol/L,序列经鉴定为Val-Glu-Pro.Lineweaver-Burk图和Dixon图表明该ACE抑制肽为非竞争性抑制剂,Ki值为(23.59±0.54)μmol/L.体外稳定性实验显示,该抑制肽在胃蛋白酶、胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶等胃肠蛋白酶的消化下能够保持良好的抑制活性,表明螺旋藻源ACE抑制肽可以用于降血压功能食品和药剂方面,具有很好的发展前景.     

应用管路封堵器处理输尿管上段结石的随机对照研究

目的:研究辅助使用管路封堵器后,采用输尿管镜下碎石术处理输尿管上段结石的效果及安全性。方法:选取自2012年6月至2013年2月需输尿管镜处理输尿管上段结石的病例198例,随机分为应用管路封堵器组98例和对照组100例。封堵器组术中输尿管镜发现结石后,封堵器组患者使用英诺伟IVX-SC10型管路封堵器超越结石远端封堵结石,再予钬激光碎石,对照组术中输尿管镜发现结石后,直接予钬激光碎石,术后留置双J管2至4周。记录并随访患者输尿管镜术后结石清除率及肾脏出血相关并发症。结果:管路封堵器组碎石成功率95.9%(94/98),对照组碎石成功率81.0%(81/100),两组有统计学差异(P=0.0011)。碎石成功后管路封堵器组出现3例(3.2%)肾脏破裂出血,而对照组无肾脏破裂出血,两组无统计学差异(P=0.1048)。结论:辅助应用管路封堵器能提高输尿管镜对于输尿管上段结石的碎石成功率;其使用并没有增加术后肾脏出血并发症的发生。     

微创经皮肾镜碎石术治疗输尿管上段嵌顿结石

目的:分析微创经皮肾镜碎石术(minimal invasive percutaneous nephrolithotomy,mPCNL)治疗输尿管上段嵌顿性结石的临床疗效.方法:采用B超或X线定位,mPCNL治疗102例嵌顿性输尿管上段结石,其中2例经皮穿刺抽吸脓性尿液,留置造瘘管,抗炎治疗后二期手术.术后生命体征、B超和尿路平片(kindey ureter bladder,KUB)等检查并随访.结果:100例Ⅰ期穿刺成功并气压弹道或钬激光mPCNL,手术时间55-75 min.碎石、取石时间15-35 min.术后住院4-7 d.无穿刺损伤腹腔脏器、术中未有肾孟穿孔和输尿管损伤、无大出血等术中和术后并发症.mPCNL术后2 dKUB检查结石清除率为91.1%(93/102),9例残留结石,术后辅以体外冲击波碎石治疗.术后1个月结石清除率为100%(102/102).结论:微创经皮肾穿刺取石治疗嵌顿性输尿管上段结石创伤小、恢复快且有很高的清除率,值得临床推广应用.     

Val-Glu-Pro对原发性高血压大鼠的体内降压作用

Val-Glu-Pro(VEP)是从钝顶螺旋藻(Spirulina platensis)中发现的一种血管紧张素转化酶(ACE)抑制肽.以原发性高血压大鼠(SHR)为模型,检测单次口服和一周间口服VEP的降压效果,并通过Real-timePCR和酶联免疫吸附法(ELISA)探索其对肾素-血管紧张素系统(RAS)主要成分在SHR大鼠肾脏和血清中的表达调控作用.结果表明:口服VEP的最低有效降压剂量为5mg/kg,加大剂量后表现出剂量效应,最低加权收缩压(WSBP)出现在口服后6h,最低加权舒张压(WDBP)出现在口服后4 h.在一周间口服试验中,10 mg/kg VEP处理组的WSBP在第5日显著低于负对照组.此外,口服VEP显著下调了SHR大鼠肾脏中肾素(renin)、ACE、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)类型1受体(AT1)的mRNA表达,并上调AngⅡ类型2受体(AT2)的mRNA表达,说明VEP的降压效果可能与对RAS系统的抑制作用相关,在高血压的预防和治疗中具有潜在的应用前景.     

油菜素内酯与脱落酸互作调控植物生长与抗逆的分子机制研究进展

植物需要同时协调多种不同信号来调节整个生长发育过程。植物激素油菜素内酯(BR)和脱落酸(ABA)是其中发挥重要作用的两类主要内源信号,并且在种子萌发、植物抗逆等过程中存在着密切的交叉互作。随着BR和ABA信号通路中关键元件的不断解析,两者互作调控气孔运动、逆境响应、种子休眠与萌发、植物发育等过程的分子机制研究取得显著进展。本文综述了近年来有关BR和ABA的功能、信号转导通路以及两者互作分子机制的最新进展。     

5种转基因油菜转化体特异性多重PCR检测方法

【目的】全球转基因植物及其产品的数量和种类越来越多,迫切需要可同时精准高效检测多个转化载体的检测方法。【方法】针对RF1、MS8、Topas19/2、Oxy235和RF3等5个转基因油菜品系的侧翼序列及油菜内源基因cruciferin A(Cru A)序列设计多重聚合酶链式反应特异性引物,通过对转基因油菜、转基因大豆、转基因玉米、转基因水稻、转基因棉花等不同作物进行PCR扩增来测试所选择的引物特异性,优化多重PCR反应引物的浓度,用所建立的检测体系对不同混合比例的转基因油菜进行多重PCR扩增来测试所建立的检测方法的灵敏度。【结果】通过测试,仅在含有目标样品中检测出阳性结果,灵敏度达0.05%,表明所建立的6重PCR检测方法可同时精准检测RF1、MS8、Topas19/2、Oxy235和RF3等5种转基因油菜转化载体。【结论】所建立的6重转基因油菜转化体特异性PCR检测方法通量高、特异性好、灵敏度高,符合有关转基因产品检测的要求,可作为转基因油菜检测的有效方法。     

牡蛎肽对小鼠免疫功能影响的研究

目的：研究牡蛎肽对小鼠免疫功能的影响。方法：将牡蛎肽按0.5、1、2g/kgBW配置为不同浓度,ICR雌性小鼠按0.2 mL/10 g BW经口灌胃30d后,测定免疫器官重量、迟发型变态反应（足趾增厚法）、抗体生成细胞、血清溶血素含量,并镜观察胸腺组织形态。结果：牡蛎肽可以增加免疫器官相对重量和血清溶血素含量,并能显著增加抗体生成细胞和迟发型变态反应（P<0.05）。结论：牡蛎肽可在一定程度上增强小鼠免疫功能。