达格列净对高渗诱导的血管内皮细胞衰老的干预研究

目的:探讨SGLT2i类药物达格列净(dapagliflozin)对高渗诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs)衰老的影响。方法:将HUVECs分为空白组(Blank组)、高渗330组(M-330组)、高渗350组(M-350组)、达格列净+高渗组(DAPA+M-350组),高渗培养环境由甘露醇诱导。衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色检测细胞衰老情况;免疫荧光染色检测SGLT2表达变化;Western blot检测SGLT2、细胞衰老标志物p21的表达变化,JC-1染色试剂盒检测线粒体膜电位的变化。结果:免疫荧光染色和western blot结果显示,Blank组,M-330组及M-350组细胞上均存在SGLT2受体蛋白表达,且Blank组,M-330组及M-350组的SGLT2表达依次显著增加。与Blank组相比,M-350组SA-β-Gal胞质蓝染、染色阳性率、衰老蛋白p21及SGLT2表达显著增加,并伴有线粒体膜电位的显著下降(P0.05);DAPA+M-350组与M-350组相比,SA-β-Gal胞质蓝染、染色阳性率和p21表达显著下降,并伴有线粒体膜电位的显著上升(P0.05)。结论:HUVECs上存在SGLT2受体蛋白,且在300-350 m Osm/L范围内随着渗透压的升高而增加,达格列净可改善高渗所诱导的血管内皮细胞衰老,其机制可能与达格列净改善高渗导致的线粒体功能障碍有关。     

促甲状腺激素并非甲状腺乳头状癌发生发展的关键因素

目的:血清促甲状腺激素(TSH)在甲状腺乳头状癌(PTC)中的作用及机制尚不明确,本研究主要探讨TSH对甲状腺细胞系及乳头状癌细胞系的作用。方法:体外培养人甲状腺细胞系和乳头状癌细胞系,分别给予不同剂量(0 mU/L、5 mU/L及20 mU/L)的TSH干预。通过MTS及流式细胞术,观察TSH对甲状腺及乳头状癌细胞系增殖和细胞周期的作用;通过RNA-seq、ELISA检测TSH对细胞因子的影响;通过实时荧光定量PCR及Western blot寻找潜在的作用靶点。结果:MTS及流式细胞术结果显示,TPC-1和Nthy-ori-3-1细胞经TSH干预后增殖指数下降,20 mU/L浓度的TSH干预组细胞周期缩短。ELISA结果显示TPC-1中TSH下调CXCL8,上调CXCL10,而CXCL12的表达无明显变化。在Nthy-ori-3-1细胞中CXCL8和CXCL10的表达也观察到类似的结果,但CXCL12表达受到TSH的抑制。TSH可使Nthy-ori-3-1和Bcpap细胞中细胞命运决定因子(DACH1)的表达呈剂量依赖性上调,且TSH可抑制Bcpap中BRAF(V600E)以及Nthy-ori-3-1和TPC-1中BRAF的表达。结论:综上所述,我们并未发现TSH对甲状腺癌细胞有明显的促肿瘤作用。相反,本研究提示TSH可能呈部分抗癌作用。因此,TSH对甲状腺的致癌作用仍有待进一步研究。     

垂体功能减退症患者和低促性腺激素性性腺功能减退症患者糖脂代谢的研究

目的:比较垂体功能减退症患者(Hypopituitarism,Hypo-Pit)与低促性腺激素性性腺功能减退症(Hypogonadotropic hypogonadism,HH)的糖脂代谢状况。方法:收集从2013年6月至2016年9月在西京医院内分泌代谢科确诊的Hypo-Pit及HH男性患者的临床资料,分别有32例Hypo-Pit患者和43例HH患者纳入本研究,对照组为22例年龄、体质指数(BMI)与研究组相匹配,且无糖尿病等慢性疾病家族史的男性。采集空腹静脉血后测定血脂水平,行3h口服葡萄糖耐量试验(OGTT),测定血糖及胰岛素水平,计算葡萄糖、胰岛素曲线下面积、胰岛素抵抗指数等。3组间计量资料组间的比较应用LSD方差分析检验,非正态分布的数据经自然对数转换(ln)后进行分析。结果:各组间年龄、BMI均无统计学差异(P0.05);与正常对照组相比,Hypo-Pit患者及HH患者的高密度脂蛋白水平下降(均P0.05),甘油三酯水平升高(P0.05);与HH患者相比,Hypo-Pit患者的胆固醇、甘油三酯、低密度脂蛋白升高(P0.05);与正常对照组相比,HH患者的稳态模型胰岛素抵抗指数及胰岛素敏感指数升高(P0.05);与对照组比较,Hypo-Pit患者及HH患者OGTT 3h血糖水平升高,差异有统计学意义(均P0.05);HH患者空腹、2h、3h血清胰岛素水平均明显升高,差异有统计学意义(均P0.05);与HH组相比,Hypo-pit患者的HOMA-IR水平降低(P0.05)。结论:Hypo-Pit患者存在糖脂代谢紊乱,且脂代谢紊乱较HH患者更差,而HH患者胰岛素抵抗水平高于Hypo-Pit患者。