半乳糖凝集素-3结合蛋白作为正向调节因子参与IFN-γ介导的抗HBV作用

摘要 目的：研究半乳糖凝集素-3结合蛋白（LGALS3BP）在IFN-?酌介导的抗HBV中的作用。方法：采用qRT-PCR及Western Blot分别检测HepG2细胞瞬转过表达质粒及干扰质粒后LGALS3BP转录水平和翻译水平的变化及检测IFN-γ对HepG2细胞内源性LGALS3BP转录水平和翻译水平的影响；采用CCK-8评价LGALS3BP表达量的变化对HepG2细胞增殖的影响及确定IFN-γ处理HepG2和HepG2.215的最适浓度；采用ELISA检测当LGALSEBP表达量发生变化时，IFN-γ刺激后对细胞外分泌的HBsAg和HBeAg的影响；采用q-PCR和RT-PCR分别检测细胞内HBV核衣壳中DNA和细胞内HBV RNA水平。结果：40 ng/mL的IFN-γ处理HepG2细胞48小时，LGALS3BP mRNA表达量与对照组相比提高2.87倍，但LGALS3BP表达量的变化对细胞增殖无显著作用；当过表达LGALS3BP时，在IFN-γ介导的抗HBV过程中，与对照组相比，HepG2.215细胞分泌的HBsAg、HBeAg以及细胞内HBV DNA和RNA的相对下降幅度分别为46%、67%、59%、49%；与对照组相比，转染pCH9-3091的HepG2细胞分泌的HBsAg、HBeAg以及细胞内HBV DNA和RNA的相对下降幅度分别为67%、53%、60%、29%；而当干扰LGALS3BP时，在IFN-γ介导的抗HBV过程中，与对照组相比，HepG2.215细胞分泌的HBsAg、HBeAg以及细胞内HBV DNA和RNA的相对上升幅度分别为46%、67%、59%、49%；与对照组相比，转染pCH9-3091的HepG2细胞分泌的HBsAg、HBeAg以及细胞内HBV DNA和RNA的相对上升幅度分别为67%、77%、67%、45%。结论：LGALS3BP作为正向调节因子参与IFN-?酌介导的抗HBV过程。     

白藜芦醇在大鼠体内的吸收代谢分析

目的：高效液相色谱及气质联用法同时分析大鼠血浆和尿中白藜芦醇及白藜芦醇苷含量。方法：6w龄Wistar大鼠10只,适应性喂养1w后,分装于10个代谢笼中。实验前禁食10h,按体重灌胃给予大鼠50mg/kg白藜芦醇。高效液相色谱法检测大鼠血浆和尿中白藜芦醇及白藜芦醇苷的含量,并通过气质联用仪探索性分析不同时间血浆中代谢产物的种类。结果：白藜芦醇及白藜芦醇苷在0～10mg/L浓度范围内线性较好,其R2 分别为0.9995及0.999 6。白藜芦醇灌饲1h后血浆中白藜芦醇浓度达到最大值,约4.79μg/mL,而白藜芦醇苷则到3h后才达到峰值,且其浓度达到白藜芦醇原型含量的5倍,约23.78μg/mL。白藜芦醇及其糖基化衍生物可在白藜芦醇摄入后24h内经尿液大量排泄到体外,排泄率超过摄入量的一半,其中原型占90%以上。气质联用分析进一步发现,机体摄入白藜芦醇3h后血浆中代谢物种类及含量均达到峰值。结论：白藜芦醇进入大鼠体内后在血浆中主要以衍生物形式存在,且代谢主要在摄入后前3h内,摄入后24h内主要以原型形式经尿液排出。