阳离子脂质体介导RNA干扰的效果评价

考察自制的肽型阳离子脂质体CDO14作为RNA转染载体的细胞毒性及其运载si RNA进行RNA干扰的效果。通过MTT法检测脂质体对稳定表达荧光素酶的肺癌A549(Luc-A549)细胞的毒性。以脂质体为载体将荧光素酶si RNA(Luc-si RNA)转染至Luc-A549细胞内,用发光仪检测转染细胞内荧光素酶含量,BCA法检测细胞内总蛋白含量。在裸鼠腋下接种Luc-A549细胞,成瘤后尾静脉注射Luc-si RNA和脂质体的复合物,利用活体成像系统检测模型小鼠体内荧光素酶的表达量。细胞毒性实验表明,自制脂质体的毒性与商品脂质体DOTAP相近,低于商品脂质体Lipo2000;细胞转染实验表明自制脂质体作为基因转染载体的转染效率高于DOTAP;体内转染实验表明CDO14作为载体转染效果优于DOTAP。结果表明,肽型阳离子脂质体CDO14具有毒性小、转染效率高等优点,有望作为转染载体用于基因治疗。     

水烛的花部形态观察——兼论与长苞香蒲的分类学界定

通过腊叶标本研究、野外观察和文献考证,结合栽培试验,研究了香蒲科水烛（Typha angustifolia L.）花部结构特征,补充描述了该种丝状毛在子房柄上的着生方式、小穗不孕雌花数目等性状特征,观察了在成熟期不同阶段其孕性雌花柱头与小苞片的长度变异。结果显示,水烛孕性雌花小苞片呈宽披针形、匙形或条形,先端褐色,短于柱头,或与柱头近等长或稍长于柱头;子房柄上的丝状毛除少数散生外,多数基部合生呈鞘状或束状,在子房柄下部呈1～4轮排列;小穗不孕雌花常3（～4）枚。研究材料在7月中旬前后雌花小苞片明显短于柱头,随果穗成熟小苞片与柱头近等长。长苞香蒲（T.domingensis Pers.）子房柄上的丝状毛形态和着生方式与水烛中的情况基本一致,但小苞片白色透明,小穗不孕雌花常1（～2）枚。这表明水烛孕性雌花小苞片和柱头的长度比例与不同成熟阶段有关系,不宜作为与长苞香蒲的区别特征,而小穗不孕雌花数目和小苞片颜色等特征对两物种的划分有较重要的意义。     

病毒受体的研究进展

病毒受体是引发宿主受病毒感染的主要决定因素。病毒受体是指位于宿主细胞表面能被病毒吸附蛋白识别并与之结合 ,从而引起病毒感染的分子复合物。病毒吸附于宿主细胞表面是病毒感染的起始环节。而病毒受体与病毒吸附蛋白的结合是有其特异性的 ,即病毒感染细胞具有不同的组织嗜性和宿主范围。1 .病毒受体的本质病毒受体可分为单分子或多分子复合体。从生化角度上来说 ,大多数是蛋白聚糖、脂类或糖脂、糖蛋白 3种类型。硫酸乙酰肝素蛋白聚糖为单纯疱疹病毒的受体 ,多瘤病毒和正粘病毒的受体为糖蛋白及糖脂的神经节苷脂。部分病毒受体是细胞表…     

高湿环境对大鼠免疫功能的影响

目的：观察高湿环境下大鼠免疫功能的变化,并探讨其意义,为进一步研究相关影响机制奠定基础。方法：将30只sD大鼠随机分为3组（n：10）：分别为常温常湿组、湿化20d组和40d组。湿化模型组用人工环境气候箱模拟高湿环境,在90％的湿度条件下进行处理,并于第20天、40天分别处死,收集外周血和脾脏,用流式细胞术检测大鼠外周血和脾脏的T淋巴细胞的百分率。结果：湿化20d大鼠外周血CD3’％为52．91±6．27,CD4％为37．80±4．11,CD8＋％为14．85±3．73,CD4＋／CD8’为2．72±0．82,除CD3％外与常温常湿组均有显著性差异（P〈0．05）,而40d组外周血T淋巴细胞亚群数据均无统计学差异。湿化各组脾脏T淋巴细胞的百分率与常温常湿组差异不大,20d组CD8’％为6．23±2．87,有显著性差异（P〈0．05）。血清检测结果显示,高湿组IgG、IgA、IgM均未见显著变化,而20d组c3显著升高。结论：在高湿环境下,初期大鼠的免疫自稳状态发生变化,免疫功能升高,随着时间的推移,机体通过自我的调整,可能逐渐习服,免疫功能逐渐降低到正常水平。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白的原核表达、纯化与结构分析

将猪繁殖与呼吸综合征病毒 (PRRSV)BJ 4毒株N基因克隆至原核表达载体pET2 8a中 ,得到重组表达载体pET2 8 N ,转化EscherichiacoliBL2 1(DE3)细胞 ,获得可溶性表达 ,表达量占菌体蛋白的 2 8%。经ProbandNi2 亲和层析获得重组蛋白P2 8 N ,圆二色谱 (CD)测定结果表明 ,P2 8 N重组蛋白螺旋占 2 6 1% ,折叠占 2 3 7% ,转角 19 8% ,卷曲占 30 3%。并进一步绘制出PRRSVN蛋白的二级结构图     

用转移因子治疗159例奶牛乳房炎的效果观察

本文报道了在国内首次用转移因子制剂治疗奶牛隐性乳房炎的效果。我们采用的转移因子制剂是本单位从健康猪脾细胞提取的,经按人用转移因子制检规程检测达到要求后,用于本省西部、东部和郊区三个奶牛场计159头患隐性乳房炎的奶牛,每天一次肌注,连续用药5次,测定用药前后的客观指标(CMT、BTB、苛性钠及氯化物凝乳试验等),以痊愈、显效、好转及无效等判定标准,经统计学处理后看出,用药后与用药前比较,差异非常显著(P<0.01),治疗组的有效率为91.2％,看出了应用转移因子治疗奶牛隐性乳房炎具有明显的治疗效果。     

血清VEGF-A、sHLA-G、Syndecan-1水平与子宫内膜异位症患者疾病分期和痛经程度的相关性及其联合检测的诊断价值研究

摘要 目的：探讨血清血管内皮生长因子-A（VEGF-A）、可溶性人类白细胞抗原-G（sHLA-G）、多配体蛋白多糖-1（Syndecan-1）水平与子宫内膜异位症（EMS）患者疾病分期和痛经程度的相关性及其联合检测的诊断价值。方法：选取2018年1月～2021年12月我院收治的120例EMS患者作为观察组,另取同期女性健康体检者120例作为对照组。检测并比较两组血清VEGF-A、sHLA-G、Syndecan-1水平。此外,分别对比不同疾病分期、不同痛经程度EMS患者上述三项指标水平的差异。采用Spearman相关系数分析血清VEGF-A、sHLA-G、Syndecan-1水平与疾病分期、痛经程度的相关性。以受试者工作特征（ROC）曲线分析上述三项指标联合检测对EMS的诊断效能。结果：观察组血清VEGF-A、sHLA-G、Syndecan-1水平均高于对照组（P＜0.05）。R-AFS分期为Ⅲ～Ⅳ期的EMS患者其血清VEGF-A、sHLA-G、Syndecan-1水平均高于Ⅰ～Ⅱ期患者（P＜0.05）。痛经程度为中度和重度的EMS患者其血清VEGF-A、sHLA-G、Syndecan-1水平均高于轻度痛经患者,且重度痛经患者上述指标水平均高于中度痛经患者（P＜0.05）。Spearman相关性分析结果显示：EMS患者的血清VEGF-A、sHLA-G、Syndecan-1水平与疾病分期、痛经程度均呈正相关（P＜0.05）。ROC曲线分析结果显示：血清VEGF-A、sHLA-G、Syndecan-1联合检测诊断EMS的曲线下面积为0.894,明显高于三指标单独检测。结论：EMS患者血清VEGF-A、sHLA-G、Syndecan-1均存在异常高表达,且和疾病分期以及痛经程度有关,可能有助于临床EMS诊断及病情评估。     

SAM-V核糖开关RNA体外转录体系优化

为了提高RNA体外转录效率,选取SAM-V核糖开关晶体结构模板对RNA体外转录体系进行优化。结果表明:目的RNA相对百分含量在反应时间和Mg2+添加浓度分别为8h和85m M/L时达到最高值,优化体系较标准体系目的RNA相对百分含量提高了一倍。我们的工作为下一步准备SAMV核糖开关晶体打下了基础。     

微生物尿酸氧化酶的筛选、酶学性质及重组表达

尿酸氧化酶(Urate oxidase,Uox)是一种催化尿酸氧化为尿囊素的酶,常用于尿酸的检测以及痛风和高尿酸血症治疗。文中从土壤中筛选出一株Uox高产菌株OUC-1,经16S rRNA部分基因序列分析,与苛求芽孢杆菌Bacillus fastidiosus序列相似度达99%。B.fastidiosus OUC-1的Uox经纯化后,分析表明该酶反应最适pH和温度分别为10.0和40℃;Uox以尿酸为底物反应动力学参数K_m值为(0.15±0.04)mmol/L(n=5)。Mg~(2+)能够提高该酶性活性,而Zn~(2+)和SDS能强烈抑制该酶的酶活。参考GenBank中苛求芽孢杆菌基因组中的uox基因序列,成功扩增出uox基因,通过SWISS-MODEL对Uox空间结构进行预测,推测该酶是同源四聚体,单亚基分子量为35.38 kDa。文中将uox基因克隆并在大肠杆菌中表达,为后续的Uox的性能改造提供条件和技术支持。     

湖北植物研究(Ⅰ)

报道了湖北植物1新记录种祛风藤(Biondia microcentra(Tsiang)P.T.Li),并对《湖北植物志》记载的3个错误鉴定种予以订正,它们分别是Phoebe nanmu(Oliv.)Gamble(滇楠)、Deutzia scabra Thunb.(溲疏)和Aspidistralurida Ker-Gawl.(九龙盘),其相应的正确名称分别为P.zhennan S.K.Lee&F.N.Wei(楠木)、D.crenataSiebold&Zucc.(齿叶溲疏)和A.oblanceifolia F.T.Wang&K.Y.Lang(棕叶草)。