LncRNA SNHG4在结直肠癌中的表达及对细胞奥沙利铂耐药性的影响

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)SNHG4在结直肠癌(CRC)中的表达以及对细胞奥沙利铂耐药性的影响。方法:采用实时定量PCR(qRT-PCR)法检测24例CRC组织及其邻近癌旁组织中LncRNA SNHG4的表达水平,并用费希尔精确检验(Fisher's exact test)分析LncRNA SNHG4表达水平与CRC患者临床病理特征相关性。体外培养HCT116细胞,将HCT116细胞分为sh-SNHG4组(敲减组)、sh-NC组(阴性对照组),qRT-PCR法检测各组HCT116细胞中LncRNA SNHG4表达水平,CCK8法检测两组细胞经梯度浓度(1.0、2.5、5.0、10.0、20.0μmol/L)奥沙利铂(L-OHP)处理24小时后细胞增殖能力变化情况。EdU和免疫荧光(Immunofluorescence,IF)实验检测两组细胞经10μmol/L的L-OHP处理24小时后,细胞增殖能力以及核DNA损伤情况。结果:CRC癌组织中LncRNA SNHG4相对表达水平与癌旁组织相比明显升高(P<0.05),其表达水平与CRC患者淋巴结转移、TNM分期、脉管侵犯显著相关(P<0.05)。与sh-NC组相比,sh-SNHG4组在梯度浓度的L-OHP处理下,相对细胞活性下降更加明显(P<0.05)。在10μmol/L的L-OHP处理条件下,sh-SNHG4组相比sh-NC组,细胞增殖能力减弱(P<0.05),核DNA损伤情况更严重(P<0.05)。结论:LncRNA SNHG4在CRC组织中高表达,敲减LncRNA SNHG4可以减弱HCT116细胞对L-OHP耐药性。     

纳米形貌诱导干细胞成骨分化的相关信号通路

目的:探究纳米形貌诱导间充质干细胞(MSC)分化中的作用以及相关分子机制。方法:利用阳极氧化法制备二氧化钛纳米管形貌,使用qRT-PCR技术,RNA-seq技术,分析接种在纳米形貌表面的间充质干细胞的基因表达情况。并筛选对成骨相关的信号通路中的成员,观察他们基因上调或下调情况。结果:在钛金属表面构建出了纳米形貌,利用实时定量PCR确定了成骨相关的基因:碱性磷酸酶(ALP),骨桥蛋白(OPN)和骨钙素(OCN)相比没有纳米形貌的钛片上培养的细胞均发生上调。通过对这些基因相关的成骨信号通路进行转录组数据分析(筛选基因P<0.05),发现在BMP2信号通路中的相关蛋白基因表达没有太大变化,同时Notch以及Wnt非经典信号通路中相关蛋白基因发生较为明显变化。结论:通过分析间充质干细胞成骨分化相关基因,以及转录组数据分析表明在纳米形貌诱导BMSC分化过程中,相对于平坦的表面,纳米形貌启动了Notch以及非经典的Wnt信号通路,因此表现出更加优良的促成骨分化的效果。