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沼气池污泥微生物总DNA提取方法的比较 总被引:1,自引:0,他引:1
沼气发酵系统是一个复杂的生态系统,其污泥微生物超过99%是不可培养的。为了优化沼气池纤维素的转化效率、沼气的产率和开展污泥微生物多样性研究,本研究采用化学裂解法、溶菌酶裂解法和QIAampDNA Stool Mini Kit提取了沼气池污泥样品中微生物的总DNA,对三种方法的DNA得率、纯度、大片段提取效果以及是否含有PCR反应抑制剂进行了研究,最后对16S rRNA基因V3区的扩增产物进行了PCR变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)分析。与化学裂解法和QIAamp DNA Stool Mini Kit法相比,溶菌酶裂解法得到的DNA量大、片段长、片段分布广、PCR扩增效率高;同时PCR-DGGE图谱显示,溶菌酶裂解法可更好地展示沼气池污泥中微生物的多样性。该结果为进一步提高沼气池中纤维素的转化效率和沼气生产优势菌种的质和量打下了一定的前期基础。 相似文献
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以病毒全基因组为模板,通过PCR技术扩增HCMV pp65基因编码序列,其产物连接到pMD18-T质粒,酶切并回收目的片段后克隆到表达载体pTO-T7,然后将重组质粒pTO-T7-pp65转化大肠杆菌ER2566,大量表达后将重组蛋白进行质谱法分析鉴定,再利用Western blot以及间接ELISA进行重组蛋白的活性及抗原性鉴定.结果显示:通过SDS-PAGE鉴定可知,大肠杆菌可能表达出了重组蛋白,质谱分析结果说明了重组蛋白为pp65蛋白,具有极高可信度,其相对分子质量约为63 kD,从Western blot和间接ELISA(enzyme linked immunosorbent assay)的结果可知,pp65蛋白作为抗原具有良好的免疫反应性与免疫原性,为制备相应的抗原诊断单克隆抗体打下了基础,同时也为开发HCMV IgG快速诊断ELISA试剂盒提供了可选原料. 相似文献
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目前,随着石油等化石资源储量的逐渐减少.从农林废弃物等可再生资源转化利用获得新能源、燃料乙醇等化工原料.补充化石等不可再生资源的缺口,正成为一种新的发展趋势,并在全球范围内迅速崛起,很多国家特别是发达国家已将此列为经济和社会发展的重大战略。欧美等发达国家以及巴西、印度、印度尼西亚等发展中国家纷纷制定了生物燃料乙醇中长期发展战略规划。 相似文献
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为探究石斛属(Dendrobium)盛花期花朵的主要挥发性成分,采用顶空固相微萃取结合GC-MS技术对球花石斛(D. thyrsiflorum)、扭瓣石斛(D. tortile)、鼓槌石斛(D. chrysotoxum)和密花石斛(D. densiflorum)花朵的挥发性成分进行分析。结果表明,4种石斛花朵的挥发性成分共70种,包括酯类、醇类、酚类、酮类、烷类、烯类、醛类以及其他等8类,其中烯类总含量最高,为主要挥发性成分。球花和密花石斛的主要香气成分为β-石竹烯,相对含量分别为0.46和6.91 μg/(g·h);而扭瓣石斛为醋酸辛酯[6.11 μg/(g·h)];鼓槌石斛为β-罗勒烯[5.23 μg/(g·h)]。该研究有利于评价和筛选有价值的芳香石斛兰种质资源,为香型石斛兰品种培育和兰花精油的开发利用提供参考。 相似文献
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铁是好氧微生物生长所必需的元素,而铁污染土壤环境中的根瘤菌是否对高浓度铁具有耐受性和钝化能力尚不清楚。以攀枝花钒钛磁铁尾矿土壤作为基质进行水黄皮共生根瘤菌捕获实验,获得水黄皮共生根瘤并从中分离纯化出根瘤菌39株。通过Fe~(2+)/Fe~(3+)耐受性和钝化能力测试筛选出耐受性和钝化能力均强的优势菌株PZHS20、PZHS90、PZHS87,其对Fe~(2+)的最大耐受质量浓度为1 600 mg/L,其中PZHS20在200 mg/L Fe~(2+)溶液中钝化效率最大,为73.54%;PZHS90对Fe~(3+)的最大耐受质量浓度为1 600 mg/L,而PZHS20和PZHS87对Fe~(3+)的最大耐受质量浓度为1 800 mg/L,其在200 mg/L Fe~(3+)溶液中钝化效率分别为84.25%和81.95%。16S rRNA基因系统进化分析将PZHS20鉴定为苍白杆菌(Ochrobactrum),将PZHS90和PZHS87鉴定为慢生根瘤菌(Bradyrhizobium)。研究结果表明,钒钛磁铁尾矿土壤中的水黄皮根瘤菌具有不同程度的Fe~(2+)/Fe~(3+)耐受性和钝化能力,筛选出的优势菌株为进一步利用水黄皮-根瘤菌联合修复高浓度铁污染土壤提供可利用的菌株资源。 相似文献