梅花鹿体细胞航天诱变后的生物学特性变化分析

本研究以自主研发的聚偏二氟乙烯膜(PVDF)细胞培养技术进行了梅花鹿(Cervus nippon)体细胞的航天培养及生物诱变,并分析了其细胞在航天诱变后的生长曲线和核型特性。采用耳缘皮肤组织块贴壁培养的方法进行体细胞的原代培养;胰蛋白酶消化的方法完成细胞的传代培养;依照程序降温的方法完成细胞的冷冻保存;每天计数24孔板每孔的活细胞数并利用Excel 97-2003绘制出细胞的生长曲线,采用IBM SPSS Statistics 23统计软件回归分析程序中的非线性回归分析子程序Logistic曲线模型分析细胞生长曲线的拟合度;以常规染色体标本制备技术,利用细胞遗传工作站(AI)软件对梅花鹿体细胞的染色体核型进行分析。实验结果表明,新开发的PVDF膜细胞培养技术可有效保持梅花鹿体细胞在太空飞行过程中的存活并成功回收、传代建系。通过细胞传代培养观察发现,该体细胞经航天诱变后保持正常的成纤维细胞特征,生长曲线呈"S"型,航天诱变组体细胞在培养4 d进入对数生长期,与对照组体细胞在培养2 d进入对数生长期相比其细胞增殖速度减慢。拟合生长曲线分析表明,航天诱变组细胞生长拟合度值与对照组相似,但细胞增殖拐点时间、拐点细胞量分析结果证明,航天诱变后的体细胞增殖速度减慢。核型分析显示,航天诱变梅花鹿体细胞染色体数保持2n=66,染色体形态正常,核型为66(XX),其中32对常染色体,1对性染色体。本研究建立了哺乳动物在航天运行条件下的细胞培养PVDF新技术,并分析了航天诱变对于梅花鹿细胞生物学特性变化的影响,为以后进行相关研究提供了基础信息和技术支持。     

基于16S rDNA与1H NMR技术探讨高脂血症兔肠道菌群和代谢物变化

目的 观察高脂血症模型兔的代谢物与肠道微生物变化并分析其相互关系。方法 雄性新西兰兔16只,随机分为正常组和模型组,每组8只。正常组喂普通饲料,模型组高胆固醇饮食。12周后比较2组兔血脂水平。利用16S rDNA测序技术检测兔粪便肠道菌群变化,采用1H NMR代谢组学分析结肠代谢物改变。结果 与正常组比较,模型组兔血清LDL-C、TG、TC水平显著升高（均P<0.01）;模型组兔肠道菌群结构发生改变,厚壁菌门、Lachnospiraceae＿NK4A136＿group、un＿f＿Lachnospiraceae、Subdoligranulum等菌群丰度上升,Lachnospiraceae＿NK4B4＿group、un＿o＿Gastranaerophilales等菌属丰度下降。2组差异代谢物通路分析主要涉及谷氨酰胺与谷氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,磷脂代谢。Lachnospiraceae＿NK4A136＿group、un＿f＿Lachnospiraceae、un＿o＿Gastranaerophilales等菌属与差异代谢物有较强相关性。结论 高脂血症的病理过程可能通过Lac...     

基于16S rDNA技术研究隔药饼灸对高脂血症兔肠道菌群属水平的影响

目的 研究隔药饼灸对高脂血症兔属水平肠道菌群的作用，筛选相关菌属。方法 将24只兔按随机数表法分为正常组、模型组和隔药饼灸组，每组8只；干预12周后，观察TC、TG、LDL-C水平的变化，采用16S rDNA高通量测序技术分析属水平菌落差异。结果 与模型组比较，隔药饼灸组兔血清LDL-C、TG、TC水平均下降（均P<0.05）。隔药饼灸组肠道菌群结构发生改善，un＿f＿Muribaculaceae、un＿o＿Gastranaerophilales、瘤胃球菌科UCG-014属、阿克曼菌属相对丰度均显著提高（均P<0.05），毛螺菌属NK4A136、瘤胃梭菌属6、拟杆菌属相对丰度均降低（均P<0.05）。结论 隔药饼灸能改善异常血脂及调整菌群结构，可能与上调un＿f＿Muribaculaceae、un＿o＿Gastranaerophilales、瘤胃球菌科UCG-014属、阿克曼菌属相对丰度，降低毛螺菌属NK4A136、瘤胃梭菌属6、拟杆菌属相对丰度有关。