葡萄糖和胰岛素对血管内皮细胞中microRNA-21的表达影响

目的:研究miRNA-21和程序性细胞死亡因子4(PDCD4)在不同浓度葡萄糖或胰岛素培养血管内皮细胞中的表达情况,探讨miRNA-21对内皮细胞凋亡功能的影响。方法:用不同浓度D-葡萄糖(5.5、11、22及33mM)和胰岛素(0、1、10、50、100及1000nM)分别干预人脐静脉内皮细胞(HUVECs),2天后收集细胞用实时荧光定量RT-PCR方法检测细胞中miRNA-21及PDCD4的mRNA表达情况,用蛋白印迹方法检测PDCD4在细胞中的表达变化。结果:与5.5mM葡萄糖对照组相比,高葡萄糖浓度组(11、22及33mM)中HUVECs的miRNA-21随着葡萄糖浓度的增加表达明显降低(p<0.01);PDCD4的蛋白表达增加(p<0.05),但PDCD4的mRNA表达无差异(p>0.05)。与0nM胰岛素组相比,10、50、100、1000nM胰岛素组细胞中miRNA-21表达下降(p<0.05),PDCD4的蛋白表达增加(p<0.01),1000nM组miRNA-21表达降低程度和PDCD4的蛋白表达增加程度最为明显(p<0.05),但不同浓度胰岛素对PDCD4的mRNA表达无差异(p>0.05...     

长白山自然保护区黑熊和棕熊种群数量动态分析

1986～2010年冬季采用路线调查方法,对吉林省长白山国家级自然保护区阔叶红松林和针叶林中的黑熊(Ursus thibetanus)及棕熊(U.arctos)的相对种群数量和幼年个体比例进行了长期调查。调查面积分别为4万和3万hm2。调查期间累计遇到黑熊65头次(2.6头/年)、棕熊46头次(1.8头/年)。各年度黑熊和棕熊的数量变动很大,总体呈下降趋势。黑熊的数量较20世纪80年代下降了93.4%,幼体所占比率从17.2%下降为0%;棕熊种群数量下降了38.8%,幼体所占比率仅为7.1%。黑熊和棕熊的种群幼体所占比例极低,说明长白山自然保护区黑熊和棕熊自然繁殖力很低,2种熊种群均处于极度濒危状态。栖息地减少和盗猎可能是导致熊类数量急剧下降的主要因素。     

脂联素在高糖孵育血管内皮细胞中的表达调节

目的:探讨脂联素(APN)在高糖孵育血管内皮细胞中的表达调节及意义.方法:用不同浓度葡萄糖(5.5、11、22及33mM)孵育人脐静脉内皮细胞(HUVECs),2天后收集细胞和上清液.用实时荧光定量RT-PCR方法检测细胞中APN、肿瘤坏死因子α(TNFα)和过氧化物酶体增生物激活受体γ(PPARγ)的mRNA表达,用ELISA方法检测细胞上清液中APN和TNFα分泌情况.结果:随培养液中葡萄糖浓度的升高,HUVECs中APN的mRNA表达及上清中APN蛋白含量降低(p<0.05),TNFα的mRNA表达及上清中TNFα蛋白含量增加(p<0.05),HUVECs中PPARγ的mRNA表达降低(p<0.05),且组间比较差异均有统计学意义(p<0.05).结论:高糖诱导血管内皮细胞保护性细胞因子APN表达分泌下降,可能是高糖诱导的血管内皮细胞功能损害的重要机制之一.     

长白山自然保护区兽类道路交通致死的初步分析

2007～2009年,按月对吉林长白山自然保护区环保护区的2条要道所造成兽类交通死亡状况以及车流量和车速等因素进行了调查.结果表明:(1)保护区道路交通致死的兽类种类达14种,占保护区种类的27％,以棕背(鼪)、花鼠和大林姬鼠等为优势种类;(2)道路交通所造成的动物个体死亡为2.57±0.53头/10km,其中夜行性种类的致死率很高,达69.8％;(3)动物死亡主要发生在车流量为1～40辆/h的区间,占69.4％,尤以30～40辆/h区间的致死率最高;(4)动物致死率与每月的车流量显著相关,主要集中在5～10月,以9月的致死率最高.通过对兽类活动时间和生态习性分析,兽类交通致死主要发生在凌晨、傍晚或夜间时段.这可能与夜间车辆照明对动物产生视觉障碍有较大关系,加上车速快和车流量大,极易造成晨昏或夜间活动的动物的大量死亡.因此,建议在保护区路段上合理控制夜间车辆行驶时间,并对车流量和车速予以限制,从而有效减少动物道路交通致死.     

长白山国家级自然保护区两栖类动物道路致死特征分析

为了解旅游道路交通导致的两栖类致死效应,于2007~2014年在环绕长白山国家级自然保护区的环长白山旅游公路(环区公路)、头道环区公路以及白山公路分别选取1条样线,采用直接计数法统计了交通致死的两栖类种类、数量,以及致死个体处于交通路段的位置,共统计257次,累计调查样带总长2 441 km。道路致死两栖类种类有5种,累计致死个体数为7 910只,平均致死率为3.34只/km。最容易致死的两栖类动物是中国林蛙(Rana chensinensi)、东方铃蟾(Bombina orientalis)、中华蟾蜍(Bufo gargariza),这3种动物占到致死总数的96.36%;经Moses Test检验,白山公路的致死率、头道公路的致死率及环区公路致死率均与对照土路致死率差异显著(白山公路:n=67,P=0.000;头道公路:n=76,P=0.000;环区公路:n=164,P=0.000)。白山公路与头道公路两栖类致死率差异显著(n=93,P=0.010),白山公路与环区公路的两栖类道路致死率差异显著(n=181,P=0.000);头道公路与环区公路的两栖类道路致死率差异显著(n=190,P=0.000)。两栖类道路致死高峰期在8月份,其次较集中出现在4~6月的繁殖期。从公路年度致死变化来看,2007~2014年期间除了中国林蛙和中华蟾蜍致死率呈小幅波动外,其他种类致死率总体呈下降趋势,只有日本树蟾(Hyla japonica)年度致死率差异显著(Kruskal Wallis Test:χ2=18.031,df=7,P=0.012);不同月份中华蟾蜍(Pearson:R=0.939,n=7,P=0.002)、中国林蛙(Pearson:R=0.912,n=7,P=0.004)、日本树蟾(Pearson:R=0.904,n=7,P=0.005)致死率与交通量显著相关。本研究认为,两栖类的道路致死率与两栖类种群大小、种群密度、生活史及交通量等都存在显著相关性。     

长白山区路域两栖类繁殖生境恢复的初步研究

长白山区道路建设对两栖类繁殖生境带来减少和退化的影响,为缓解和恢复路域受损两栖类繁殖生境,于2021年3月末至5月初,在吉林长白山国家级自然保护区环区公路两侧100 m内,选择40个面积>10 m²,深度>15 cm的池塘,放置10个网框和20个树枝框作为辅助材料开展极北鲵Salamandrella keyserlingii和中国林蛙Rana chensinensis繁殖生境恢复实验。结果显示：（1）网框和树枝框显著提升了极北鲵对繁殖池的利用率,但对中国林蛙的影响不显著;（2）极北鲵对树枝框利用率（85.00%）显著高于网框（50.00%）(P=0.03);（3）实验组的产卵数量（极北鲵197.00粒±11.29粒,中国林蛙149.00粒±13.74粒）均高于对照组（极北鲵128.00粒±11.32粒,中国林蛙88.00粒±14.12粒）,但差异不显著。建议今后在长白山区路域结合两栖类动物通道设置、取弃土场恢复工程营造两栖类繁殖生境时,首选树枝框、其次选网框作为两栖类繁殖产卵的媒介。     

Rab11a通过PI3K/AKT和Ras/MEK/ERK信号通路调节胰腺癌细胞凋亡和侵袭

目的:探究Rab11a在胰腺癌中的表达模式及其对肿瘤生长和转移的影响。方法:通过免疫组织化学法、RT-PCR和Western blot检测60例胰腺癌患者的癌组织和癌旁组织中Rab11a的表达。通过对人胰腺癌细胞系PANC1转染靶向Rab11a的小干扰RNA或过表达Rab11a的pcDNA3.1质粒考察Rab11a对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。通过Western blot检测PANC1细胞中PI3K、AKT、Ras、MEK、ERK1/2和GSK3β的磷酸化水平。结果:胰腺癌组织中Rab11a的表达水平均高于癌旁组织(P<0.05)。Rab11a的表达水平与TNM分期和淋巴结转移有关(P<0.05)。CCK-8测试和细胞集落形成实验显示,下调Rab11a抑制了PANC1细胞的增殖(P<0.05)。流式细胞术显示,下调Rab11a促进了PANC1细胞的凋亡(P<0.05)。细胞划痕实验显示,下调Rab11a抑制了PANC1细胞的迁移能力(P<0.05)。Matrigel Transwell实验显示,下调Rab11a抑制了PANC1细胞的侵袭能力(P<0.05)。然而,上调Rab11a则促进了PANC1细胞的增殖、迁移和侵袭,并抑制了细胞凋亡(P<0.05)。蛋白质印迹分析显示,下调Rab11a抑制了PANC1细胞中PI3K/AKT和Ras/MEK/ERK信号通路的活化(P<0.05)。此外,应用PI3K/AKT和Ras/MEK/ERK信号通路的选择性抑制剂处理PANC1细胞可阻断Rab11a对细胞增殖的促进作用(P<0.05)。结论:Rab11a的高表达是胰腺癌预后恶化的潜在生物标志物。靶向抑制Rab11a可通过抑制PI3K/AKT和Ras/MEK/ERK信号通路来降低胰腺癌的生长和转移能力。