全文获取类型
收费全文 | 507篇 |
免费 | 100篇 |
国内免费 | 122篇 |
出版年
2023年 | 13篇 |
2022年 | 6篇 |
2021年 | 11篇 |
2020年 | 11篇 |
2019年 | 8篇 |
2018年 | 10篇 |
2017年 | 8篇 |
2016年 | 14篇 |
2015年 | 19篇 |
2014年 | 26篇 |
2013年 | 16篇 |
2012年 | 27篇 |
2011年 | 18篇 |
2010年 | 20篇 |
2009年 | 24篇 |
2008年 | 20篇 |
2007年 | 15篇 |
2006年 | 16篇 |
2005年 | 20篇 |
2004年 | 9篇 |
2003年 | 8篇 |
2002年 | 10篇 |
2001年 | 21篇 |
2000年 | 20篇 |
1999年 | 19篇 |
1998年 | 23篇 |
1997年 | 26篇 |
1996年 | 10篇 |
1995年 | 12篇 |
1994年 | 22篇 |
1993年 | 19篇 |
1992年 | 19篇 |
1991年 | 20篇 |
1990年 | 35篇 |
1989年 | 21篇 |
1988年 | 14篇 |
1987年 | 9篇 |
1986年 | 13篇 |
1985年 | 20篇 |
1984年 | 9篇 |
1983年 | 15篇 |
1982年 | 7篇 |
1981年 | 7篇 |
1980年 | 7篇 |
1979年 | 6篇 |
1978年 | 3篇 |
1974年 | 5篇 |
1973年 | 3篇 |
1964年 | 3篇 |
1958年 | 3篇 |
排序方式: 共有729条查询结果,搜索用时 15 毫秒
1.
2.
选用苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒杆粒 (AcMNPVbacmid)为材料 ,通过在大肠杆菌中利用RecA基因介导的同源重组 ,将其p74基因剔除 ,并精确地用斜纹夜蛾核多角体病毒 (SpltMNPV)的p74基因进行了替换。所构建的重组AcMNPV杆粒在修饰后的p74基因位点中未留下任何有可能影响该基因表达及功能的选择标记 ,SpltMNPV的p74基因直接位于AcMNPVp74基因的启动子控制下。RT PCR显示替换后的p74基因得到了表达。生物测定结果显示 ,重组病毒AcMNPV杆粒 polhSL74无法通过口服方式感染银纹夜蛾幼虫 ,表明杆状病毒p74基因具有种属特异性。 相似文献
3.
目的:探讨经多西紫杉醇修饰的人工晶体对眼组织相容性的影响。方法:按照随机数字表法将32 只日本大耳兔分为两组:
实验组通过手术植入表面经多西紫杉醇修饰处理后的疏水性人工晶体,对照组植入疏水性人工晶体。比较两组人工晶体亲水角、
术后24 小时光耀斑块计数以及人工晶体周围组织炎症浸润数。结果:实验组的亲水角小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。
实验组光耀斑块计数低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组家兔人工晶体周围组织炎症浸润计数低于对照组,差异有
统计学意义(P<0.05)。结论:人工晶体表面经多西紫杉醇修饰后,其亲水性、与眼组织的组织相容性增加,且可缓解光耀斑炎症感
染和降低并发症的发生,有重要的临床参考价值。 相似文献
4.
目的:构建两个高表达人TNFα和IL-1β细胞系,建立抗炎药物筛选细胞模型。方法:运用PCR的方法从载体pCMVSport-TNFα和p CMVSport-IL1β上扩增目的基因,以亚克隆方法将目的基因分别插入真核表达载体pcDNA3.1和pFLAG-CMV中,用单酶切、PCR扩增和基因测序的方法鉴定重组效果,然后将重组成功的质粒转入HEK293细胞系内,挑选能够稳定表达并遗传的单克隆细胞株,用蛋白免疫印迹(Western blot)法分析其表达效果。结果:三种鉴定方法均显示重组质粒构建成功。Western blot结果显示,细胞株T3、T4均能较高表达炎症因子TNF-α;细胞株I2、I3、I5均能较高表达炎症因子IL-1β。结论:成功构建了TNFα和IL-1β靶标的药物筛选细胞模型,为筛选具有抗炎作用的中药提供了一个新平台。 相似文献
5.
目的:通过早期判断并治疗心脏移植围术期可逆性肺动脉高压,降低移植手术后右心功能衰竭的发生率。方法:20例接受心脏移植手术的病人,术前放置肺动脉导管,测定肺动脉压、肺循环阻力。对肺动脉高压的病人在肺动脉端泵入硝酸甘油、前列腺素E1以确定可逆性。并在术后早期抗排异治疗的基础上应用增强心肌收缩力、降低肺动脉压力、强化氧疗和呼吸管理等综合措施。结果:20例病人中6例出现急性右心功能衰竭,其中4例经治疗后症状改善、出院,2例死亡。结论:术前早期判断并治疗可逆性肺动脉高压,可以有效预防并减少心脏移植术后右心功能衰竭的发生,提高手术成功率。 相似文献
6.
哀牢山常绿阔叶林水源涵养功能及其在应对西南干旱中的作用 总被引:7,自引:0,他引:7
为了解云南哀牢山中山湿性常绿阔叶林在2010年初西南地区特大干旱中是否遭遇水分胁迫,及其水源涵养功能在应对干旱中的作用,测定了该森林土壤和主要树种在2010年旱季的水分状况,并对比研究了原生林和森林经砍伐烧垦后形成的毛蕨菜-玉山竹群丛的土壤持水、凋落物持水、水面蒸发和土壤水分季节动态。结果表明:常绿阔叶林主要树种在2010年初西南特大干旱中并未遭受水分胁迫(最旱月叶片凌晨水势高于-0.4 MPa)。虽然常绿阔叶林土壤含水量和地下水位在最旱月都达到了有观测以来的最低点,但主要根系分布区的土壤水势仍不低于-0.5 MPa,并高于毛蕨菜-玉山竹群丛。森林较好的水分状况和原生常绿阔叶林较好的水源涵养功能有关。常绿阔叶林的土壤总持水量尤其是非毛管持水量要显著大于毛蕨菜-玉山竹群丛,同时也大于云南地区的一些次生林和人工林。常绿阔叶林地表丰富的凋落物通过持水和抑制土壤蒸发也对水源涵养有一定作用。哀牢山常绿阔叶林良好的水源涵养功能,充足的土壤地下水储存弥补了旱季和特大干旱中降水的不足。结果指示原生林在水源涵养中不可替代的作用,以及加强原生林保护在提高区域抗干旱能力中的重要意义。 相似文献
7.
于2009年7月至2010年11月,对浙江千岛湖两个岛屿上的社鼠(Niviventer confucianus)种群进行标志重捕,并采用8个高多态性的微卫星位点,对两个岛屿的社鼠种群进行家群分析和亲权鉴定,探讨了社鼠家群的亲缘关系特征。结果显示,8个微卫星位点能可靠地对两个岛屿社鼠种群进行亲权鉴定,A岛已确定亲缘关系的71只社鼠分为12个家群,家群中的个体数最多达到19个,B岛已确定的49只社鼠个体共分为11个家群,家群中的个体数最多达到14个。家群内部成员之间的亲缘关系表现为配对繁殖的个体对间亲缘系数最小,揭示了社鼠倾向于选择亲缘关系较远的异性作为配偶。家群中雄性后代个体之间与雌性个体之间的亲缘关系相比,两岛表现情况相反,该结果暗示两岛屿上社鼠扩散行为可能有所不同。通过计算与同一雄性(或同一雌性)交配的个体间的亲缘系数,发现两个岛屿上的社鼠在与不同异性交配时也存在选择性,即避免选择亲缘关系较近的异性作为混交的对象。 相似文献
8.
人源性抗HBsAg Fab抗体的发酵生产研究 总被引:3,自引:0,他引:3
为了适应工业生产的需要,利用fed—batch方法,重组人源性抗HBsAg Fab抗体酵母工程菌在30L发酵罐中进行了高密度发酵,发酵最适温度30℃,pH值范围5.0~5.3,溶氧范围20%~30%。发酵液OD600值达到300时开始诱导,甲醇最佳诱导浓度为10mL/L。重组人源性抗HBsAg Fab抗体经离子交换层析纯化,纯化产品经SDS-PAGE、Western blot进行分析和ELISA方法进行活性测定。结果显示,重组Fab抗体在Fed-batch发酵系统中可高效表达,经过192h的发酵生产,重组人源性抗HBsAg Fab抗体的表达量可达412mg/L。发酵上清经过离子交换层析纯化,获得纯度为95%的重组Fab抗体,该Fab抗体经ELISA分析具有较高的HBsAg抗原亲和力和特异性。结果证实可以通过高密度发酵毕赤酵母工程菌来高效生产重组人源性抗HBsAg Fab抗体,为后续的工业化生产应用奠定了基础。 相似文献
9.
胡明玉李倩章宏伟 《现代生物医学进展》2011,11(7):1346-1348
目的:探讨红光照射对难治性创面的创缘组织中血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达及治疗难治性创面的临床效果。方法:收集2008年6月-2010年12月因难治性创面入住笔者单位治疗的40例患者,按治疗方法分为红光照射治疗组20例和常规治疗组20例。常规治疗组患者创面以0.5%碘伏与水胶体敷料换药。治疗组在常规治疗的基础上加用红光照射。于治疗后第7天、14天、21天切取创缘组织,研究红光照射对创缘组织中VEGF的影响,并比较两组患者的创面愈合率和愈合时间。结果:临床实验中,治疗组创缘组织中的VEGF含量明显高于对照组(P<0.01);治疗组创面愈合率明显高于对照组(P<0.01);治疗组的愈合时间低于对照组(P<0.05)。结论:红光照射能显著提高创缘组织中VEGF含量,减少创面愈合时间,促进愈合。 相似文献
10.
灵芝转化苦参水提物的3个新生成分体外抗乙型肝炎病毒作用 总被引:3,自引:0,他引:3
先在基础培养基中添加苦参水煎汁,然后培养灵芝,得到灵芝培养液,再按乙醇氯仿-5%碳酸氢钠溶液-氯仿的顺序提取培养液中的有机酸成分,用制备高效液相色谱分离,得到6个新组分,用这些组分分别作用于转染了乙型肝炎病毒DNA的2.2.15细胞,用固相放射免疫法测定细胞培养上清液中的乙肝病毒表面抗原(HBsAg)和e抗原(HBeAg)的含量,用四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞的存活率。结果表明,其中的3个组分对2.2.15细胞分泌HBsAg和HBeAg有抑制作用,提示可能具有抗乙肝病毒的作用。 相似文献