获能期间精子蛋白的酪氨酸磷酸化

哺乳动物精了获能是精子与卵子成功受精的前提。蛋白酪氨酸磷酸化对精子获能十分重要。精了获能期蛋白酪氨酸磷酸化程度增高与sAC/cAMP/PKA途径、受体酪氨酸激酶途径和非受体蛋白酪氨酸激酶途径调节有关。获能过程中酪氨酸磷酸化蛋白分布于精子细胞的不同区域,蛋白的酪氨酸磷酸化与精子功能密切相关。     

脂筏与精子膜信号传导

脂筏是细胞膜内由特殊脂质与蛋白质构成的微域。小窝是脂筏的一种形式,小窝标记蛋白有小窝蛋白和小窝舟蛋白。脂筏或小窝与生物信号传导、细胞蛋白转运和胆固醇平衡有关。最近实验证实哺乳动物精子膜具有脂筏结构,脂筏与膜胆固醇外逸对于启动受精的信号传导具有重要作用。     

生物样品中~(14)C 的氧瓶燃烧测定法

制备同位素生物样品进行液体闪烁测定的方法很多。氧瓶燃烧法由于操作简便,样品取量大,且最终得到的是无色液体,因而能克服一些比放射性低样品在测定时的化学焠灭;或在消化处理样品时引起~(14)CO_2的丢失等缺点,目前愈来愈广泛地得到重视和应用。我们在进行~(14)C-棉酚的吸收、分布和排泄研究时,曾采用过     

羊精子体外获能

本文发展了一种羊精子体外获能培养基——mTs或RSCM。羊精子在该培养基中(39℃.pH7.8和5％ CO_2,95％空气)预先培养7小时,可使大部分精子获能。获能精子呈现超激活运动,并可穿透去透明带仓鼠卵,穿透率分别为78.5±14.3％和96.7±2.3％,这种作用可被同种精浆逆转。获能精子与同种卵的受精率为83.3％。16个受精卵等量移入2只假孕兔输卵管壶腹部中。72小时后回收到12个胚胎。其中6个胚胎已发育为4—8细胞阶段,将这些细胞等量移入2只受体母羊输卵管壶腹部。其中1只妊娠,并维持到2个月之久。     

Inhibition of Acrosomal Enzymes by Gossypol Is Related to Its Antifertility Action

ＩｎｈｉｂｉｔｉｏｎｏｆＡｃｒｏｓｏｍａｌＥｎｚｙｍｅｓｂｙＧｏｓｓｙｐｏｌＩｓＲｅｌａｔｅｄｔｏＩｔｓＡｎｔｉｆｅｒｔｉｌｉｔｙＡｃｔｉｏｎＹＵＡＮＹｕ－ｙｉｎｇ;（袁玉英）ＺＨＡＮＧＹａｎ－ｌｉｎ;（张燕林）ＳＨＩＱｉ－ｘｉａｎ（石其贤）（Ｚｈｅ...     

精子顶体反应期间磷脂酶A2的信号转导及其调节

磷脂酶A2是精子重要的脂解酶类,包括多种不同亚型。在精子顶体反应期间磷脂酶A2受天然激动剂卵透明带、孕酮和γ-氨基丁酸激活,引起胞外Ca2 内流,使磷脂水解为花生四烯酸和溶血磷脂酰胆碱,从而促进膜的融合即顶体反应。天然激动剂引起PLA2激活受Gi蛋白、甘油二酯、蛋白激酶A、蛋白激酶C、促分裂原蛋白激酶和活性氧等多条信号通路的调节,此外,磷脂酶A2与特异性磷酯酶C之间可以发生信号串话。研究PLA2的信号通路为了解受精机制、男性不育之病因和开发男性避孕药提供依据。     

棉酚抗生育作用的研究 Ⅰ.对小鼠及大鼠雄激素依赖器官的影响

棉酚可抑制大鼠、兔、犬及猴睾丸精子发生(男用节育药全国协作组,1978;张寅恭等,1972,1974,1979;中国医学科学院药物研究所,1972;山东省中草药研究组,1972,1975;戴荣禧等,1978),临床试用也表明棉酚具有可靠的节育效果(江苏省棉酚抗生育科研协作组,1974),这为男用节育药的研究提供了一个可喜的苗头。作为男用节育药对性功能有无影响,是一个值得重视的问题。然而,目前棉酚对控制性功能的雄激素有无影响     

GABA/progesterone-induced polyphosphoinositide (PPI) breakdown and its role in the acrosome reaction of guinea pig spermatozoa in vitro

To investigate whether GABA/progesterone (P4) stimulates PPI breakdown and its role in the acrosome reaction (AR), spermatozoa of guinea pig were preincubated in MCM-LCa2+ for 5.5 h and then labeled with [32P]pi for 1 h. Samples were washed through a three-step gradient Percoll, adjusted to 5×107 cells/mL and exposed to 2 mmol/L Ca2+, 5 mmol/L GABA, 10 mmol/L P4 and other agents. Lipids were separated by t.l.c. and radioactivity in spots determined by scintillation counting. The AR was assessed by phase-contrast microscopy. The results showed that (i) when spermato-zoa were treated with GABA, 32P-label diminished rapidly in phosphatidylinositol 4, 5-bisphosphate (PIP2), phosphatidylinositol 4-phosphate (PIP), and increased in phosphatidic acid (PA). The loss of label from PPI was almost completed by 10 min. The time-course of the AR was much slower than PPI when spermatozoa reached a maximal response by 15 min; (ii) the pattern of PPI hydrolysis and stimulation of AR was similar for the three agonists tested；their potency followed the order A23187＞progesterone≥GABA; (iii) GABA-induced PIP2 hydrolysis and rise in PA and the AR were prevented by inclusion of 10 mmol/L neomycin; (iv) the loss of PIP2 labeling and the increase in PA labeling abolished when spermatozoa were exposed to EGTA or Ca2+ channel blocker. These re-sults indicate that GABA or P4-induced PPI breakdown is an important and essential event in the series of changes to membrane fusion during the AR of guinea pig spermatozoa and this effect is mediated via calcium by activation of phosphatidylinositol-specific phospholipase C.     

精卵相互作用：诱发仓鼠精子顶体反应的部位

65只成年仓鼠经超排卵后,于排卵前人工授精。授精后6一7小时,收集输卵管壶腹部液(AF)、活动精子和卵子包括卵丘细胞(CM)基质和透明带(ZP),以相差显微镜检查精子顶体帽状态。在AF中有65.3％精子顶体帽发生改变;顶体反应(AR)率随着精子穿过CM而增加(73.7％);当精子到达ZP后,97.1％精子完成AR。25只仓鼠体外授精表明,获能精子在CM内游动或穿过CM时,顶体帽发生改变,可达到71.4％,但AR百分率甚低。当精子到达ZP后约30分钟完成AR。虽然单独的CM不能诱发体外仓鼠精子发生AR,但它可引起精子AR的早期阶段发生改变,并协同ZP促进获能精子完成AR。同样地,可溶性CM和ZP及其复合物可明显地激发体外仓鼠精子AR。但豚鼠ZP则无此作用。这些结果提示:AF是AR早期阶段的发生部位,而CM和ZP是体内仓鼠精子AR的主要部位;CM和ZP复合物是体外精子AR的诱导者。     

精胺抑制人精子的体外受精能力

以精子穿透去透明带仓鼠卵试验(SPA)为模型,评价了精胺对人精子体外受精能力的影响。精胺(0.25—8.0mmol/L)可抑制人精子体外获能和受精,其抑制作用与精胺浓度呈正相关,此种抑制作用是可逆的。用 HPLC 测定精子精胺含量表明,精子获能后精胺含量明显下降。dbcAMP(0.5—1.0mmol/L)或咖啡因(10mmol/L)可拮抗精胺抑制人精子体外获能。其拮抗作用随 dbcAMP 浓度而增强。钙离子载体 A 23187 2/μmol/L 或胰蛋白酶0.05%均可拮抗精胺抑制人精子穿卵率。上述结果提示,精胺可能通过降低精子 cAMP 含量和抑制钙内流或顶体酶活性,从而阻止人精子体外获能和受精。