来源卤化二型聚酮类生物合成基因簇的两种关键功能基因鉴定与表达

为催化卤化产物,挖掘具有生物活性的新卤化物提供新的方法途径,拟构建卤化酶原核表达载体催化天然卤化物的卤化过程。对链霉菌Streptomyces sp. FJS31-2基因组中一个II型PKS类产物zunyimycin生物合成基因簇进行系列分析,针对其中的后修饰酶卤化酶基因和单加氧酶基因进行原核表达纯化。通过分子生物学手段成功构建卤化酶基因(65 kD)和单加氧酶基因(37 kD)的原核表达载体,并对其进行鉴定。卤化酶和单加氧酶在催化化合物的卤化过程中,会产生疑似新卤化产物。     

低分子质量魔芋甘露寡糖的长期毒性与遗传毒性研究

魔芋甘露寡糖是一种具有肠道菌群调节作用的新型食品添加剂．本研究首次通过酶解与有机溶剂沉淀法制备了低分子质量的甘露寡糖(聚合度2～7),并对这类寡糖进行了长期毒性与遗传毒性评价．在长期毒性试验中,以大鼠为实验对象,分低、中、高(2.25,5.25,7.50 g/kg)药物剂量组和阴性对照组,连续灌胃给药90天．一般状况观察、生化指标、血液学指标、病理学等与对照组比较均无显著性差异,而大体解剖观察发现,部分大鼠的肝脏与肾脏形态发生变化,但这些变化均在正常范围内,且其他各项指标差异均无统计学意义．此外,一系列实验包括小鼠骨髓微核实验、Ames试验、小鼠精子畸变试验均未发现低分子质量甘露寡糖有明显的遗传毒性．试验结果提示,本研究方法获得的低分子质量甘露寡糖在本实验条件下未发现长期毒性与遗传毒性．     

非线性中立双曲型脉冲偏微分方程解的振动性质

讨论一类非线性中立双曲型脉冲偏微分方程解的振动性质,应用积分不等式,在第二类边界条件下获得了其一切解振动的充分条件.     

针灸联合手法推拿对腰椎间盘突出症的应用效果及血浆β-内啡肽及腰椎功能的影响

摘要 目的：探讨针灸联合手法推拿对腰椎间盘突出症的应用效果及血浆β-内啡肽（β-EP）及腰椎功能的影响。方法：选取我院2020年1月到2022年12月收治的102例腰椎间盘突出症患者作为研究对象,随机分为A（n=35）、B（n=35）、C（n=32）三组。A组患者采取针灸治疗,B组患者采取手法推拿治疗,C组患者采取针灸联合手法推拿治疗,对比三组患者临床疗效,治疗前与治疗1个月后的血清炎症因子及血浆β-内啡肽表达水平,疼痛水平以及腰椎功能情况。结果：C组治疗总有效率明显高于A组和B组（P＜0.05）,但A组与B组对比无明显差异（P＞0.05）;三组患者治疗前肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、基质金属蛋白酶-3（MMP-3）、白细胞介素-1β（IL-1β）、β-EP对比无差异（P＞0.05）,治疗后三组患者TNF-α、MMP-3、IL-1β水平均降低,且C组低于A组与B组（P＜0.05）,β-EP水平升高,且C组高于A组与B组（P＜0.05）;三组患者治疗前简式疼痛量表（MPQ）与视觉模拟疼痛量表（VAS）评分对比无差异（P＞0.05）,治疗后三组患者VAS、MPQ评分均降低,且C组低于A组与B组（P＜0.05）;三组患者治疗前脊柱功能指数量表（SFI）评分、Osweatry功能障碍指数（ODI）对比无差异（P＞0.05）,治疗后三组患者SFI评分均升高,且C组高于A组与B组（P＜0.05）,ODI指数均降低,且C组低于A组与B组（P＜0.05）。结论：针灸联合手法推拿比单一针灸与推拿更能够提升腰椎间盘突出症的治疗效果,且可降低炎症因子,提升?茁-内啡肽,减轻疼痛程度,进一步提升腰椎功能,值得临床应用推广。     

海洋链霉菌Streptomyces olivaceus FXJ7.023来源多功能几丁质酶的克隆、表达及鉴定(英文)

碳水化合物水解酶家族在自然界碳素循环及农业废弃物中几丁质、纤维素等碳水化合物的生物质转化利用中发挥了重要作用。通过PCR技术从海洋链霉菌Streptomyces olivaceus strain FXJ 7.023的fosmid基因组文库中成功克隆得到1个全长885bp的编码295个氨基酸残基的包含1个19个氨基酸残基的N-末端信号肽的壳聚糖酶完全编码区。系统进化分析表明该基因编码蛋白与已报道的Streptomyces sp.SirexAA-E来源壳聚糖酶csnA同源性为71%,与Streptomyces coelicolor A3(2)来源的csn46A同源性为70%。将该编码区重组入原核表达质粒载体pET32a并转化大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)plysS,添加IPTG在18℃条件下振荡诱导该蛋白表达,Ni2+-NTA亲和纯化获得分子量为50.3 kDa融合表达蛋白TrxA-SoCsn。该融合重组蛋白在最适反应条件下对底物胶体壳聚糖和羧甲基纤维素的最大酶活分别为3.673U/mg和1.302U/mg,最适反应温度分别为37℃和50℃,最适反应pH分别为pH5.0和pH6.0。TrxA-SoCsn相关的研究结果表明该酶在农业废弃物生物质转化等方面具有一定的应用潜力。     

同一宿舍女生月经周期趋于一致的调查

学习过有关青春期卫生知识后,同学们在宿舍里谈起经期、月经周期等概念时,无意发现:几位女生同一天来月经,全宿舍女生的来月经前后不差几天。这种现象是偶然,还是有规律?于是在生物学教师的指导下对初二年级8个宿舍和城区散居的共152位女生进行了调查。想     

链霉菌Streptom yces olivaceusFXJ7.023多功能葡糖淀粉酶SoGA的克隆、表达及鉴定

根据海洋来源链霉菌Streptomyces olivaceus FXJ7.023基因组测序结果设计特异引物,通过PCR扩增获得1条全长为1 788 bp的糖苷水解酶15家族蛋白新成员完全编码区DNA片段,该片段编码1个595个氨基酸残基、分子量为66.2 k D的预测蛋白。利用基因工程技术将该片段重组入原核表达质粒p ET32a并转化宿主菌BL21(DE3)ply Ss,IPTG诱导融合蛋白表达,表达的包涵体融合蛋白经纯化、复性后利用DNS法测定其在不同温度、p H条件下催化不同底物产生还原糖的活性。结果表明,该酶能够水解纤维素、淀粉等多种底物产生还原糖活性,且对不同底物表现不同的最适p H和最适反应温度。     

怀黄菊间接体胚受体再生体系的建立及CmTGA1的遗传转化

植物受体再生及遗传转化体系的建立是对植物进行转基因操作时至关重要的一个技术环节。以菊花优良种质怀黄菊(Chrysanthemum morifolium cv.‘Huaihuang’)为试材,探讨胚状体诱导所需的最佳培养基及芽分化和根生长的最适抗生素选择压。在此基础上,将抗病基因Cm TGA1通过同源转化的方法转入怀黄菊,获得再生植株。结果表明,在附加1.5 mg·L-1IAA、0.5 mg·L-1 6-BA和1.0 mg·L-1 2,4-D的MS培养基上诱导培养15天后,再去除2,4-D进行分生培养,并进一步诱导芽再生,最终86%的供试外植体通过胚状体途径获得再生芽;在芽分化时所需潮霉素选择压为5.0 mg·L-1,生根时潮霉素选择压为4.5 mg·L-1。对转化植株进行半定量PCR(semi-quantitative PCR)和实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR)检测,结果表明,Cm TGA1基因成功整合到转化植株基因组中,从而建立了怀黄菊间接体细胞胚途径转基因受体再生体系。该技术的建立为通过转基因手段解决生产中存在的怀黄菊病害感染严重和种质退化等问题奠定了基础。     

高通量检测大样本桑黄发酵液总黄酮含量方法的建立北大核心CSCD

建立了大样本的桑黄发酵液样品中总黄酮的高通量测定方法。通过L9（3^4）正交实验设计优化,确定了基于亚硝酸钠．硝酸铝比色法的微孔板检测方法,优化后总黄酮含量测定的最佳反应条件：5％亚硝酸钠30μL,10％硝酸铝30μL,10％氢氧化钠50μL,室温反应10min,检测波长为510nm。检测结果表明,针对大样本检测,该法稳定性高,平均回收率为100．7％,相对标准偏差为0．607％,线性范围为0—50μg／mL,线性相关系数r^2=0．9994。比较分析结果显示,和多种传统总黄酮测定方法相比,实验所建立的高通量测定方法检测大样本快速、准确、用药量小,且稳定性高。