了哥王中西瑞香素的提取分离及抗肿瘤作用研究

研究西瑞香素(daphnoretin)的体外抗肿瘤作用.采用溶剂提取法、硅胶柱层析、重结晶法从中药了哥王中分离西瑞香素并用薄层色谱法和高效液相色谱法测定纯度.应用MTT法观察不同浓度的西瑞香素对体外培养的人肺腺癌细胞AGZY-83-a、人喉癌细胞Hep2和人肝癌细胞HepG2的抑制作用.采用激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)观察细胞形态的变化并检测细胞内钙离子浓度.经紫外光谱、质谱和核磁共振光谱确定提取分离西瑞香素的结构,其纯度为99.75%.西瑞香素对体外培养的人肺腺癌细胞AGZY-83-a、人喉癌细胞Hep2和人肝癌细胞HepG2均有明显抑制作用,且呈浓度依赖性.其对上述三种肿瘤细胞的半数抑制浓度IC50值分别为8.73、9.71和31.34 μg/mL.激光扫描共聚焦显微镜(LSCM)检测结果表明应用西瑞香素处理肿瘤细胞72 h后,细胞内钙离子浓度显著升高(P<0.05).西瑞香素体外对人肺腺癌细胞AGZY-83-a、人喉癌细胞Hep2和人肝癌细胞HepG2均有明显抑制作用,机制可能与细胞内钙超载有关.     

抗山羊ΔfosB基因表达产物抗体的制备及应用

ΔfosB是fosB基因的自然截短型,稳定存在于许多组织中,在脂肪细胞和成骨细胞的形成和分化中起到重要作用。ΔFosB蛋白可能与钙在骨和乳腺中的代谢有关,并且调控钙从骨向乳腺转移的信号通路。将奶山羊的ΔfosB基因亚克隆到pET32a载体得到pET32a-ΔfosB原核表达载体,IPTG诱导其在大肠杆菌中表达,纯化融合蛋白免疫兔子制备多克隆抗体。ELISA检测显示抗体效价达1:51200,Western blotting结果显示制备的抗体能特异性检测原核表达的ΔFosB蛋白以及在HEK-293细胞中表达的ΔFosB蛋白。进一步的组织差异表达检测表明ΔFosB在山羊的乳腺、骨髓、脑髓、肌肉、心脏、肝和肺组织中均有表达。     

人乳中氨基酸的含量及分析方法研究进展

人乳中含有丰富的氨基酸,其中赖氨酸、苏氨酸、亮氨酸、缬氨酸、异亮氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸和组氨酸等必需氨基酸构成比例合理,牛磺酸和谷氨酸等条件必需氨基酸含量丰富,丙氨酸、丝氨酸、天冬氨酸和甘氨酸等非必需氨基酸含量也较为丰富;人乳中含有的氨基酸在维持婴儿生长发育、增强免疫力、肠道保护等方面发挥重要作用.本文综述了人乳中主要氨基酸的含量及分析方法,以期为婴儿食品的开发及母乳成分数据库的建立提供一定的依据.     

不同干扰类型对高寒草甸群落结构和植物多样性的影响

对高寒草甸天然草地进行了施肥、围栏和放牧 中牧和重牧 处理,研究不同干扰类型对草地植物多样性的影响.结果表明,施肥使草地植物群落物种组成贫乏,群落结构趋于简单,物种多样性减少;中等程度放牧增加了群落结构的复杂性,丰富度指数和多样性指数均最高,支持 中度干扰理论 ;重度放牧,由于干扰过于剧烈而减少了物种优势度和多样性;而轻度干扰的围栏草地,群落由少数优势种所统治,多样性也不高.物种数 S 、丰富度指数 Ma 、Shannon-Wiener指数 H' 、Simpson指数 D 的排列顺序均为:施肥草地<围栏草地<重牧草地<中牧草地;均匀度指数 Jsw 的变化趋势与上述各指数相同;优势度指数的变化趋势则相反,为施肥草地>围栏草地>重牧草地>中牧草地.4种干扰类型草地群落的生活型功能群基本一致,均由多年生禾草、多年生杂类草和莎草类组成,但各功能群在群落中所占比重及各功能群内所含物种数则大不相同.说明不同干扰类型对草地植物群落的物种组成、多样性格局及系统功能等方面产生不同的影响.     

分子生物学在石油微生物多样性研究中的应用

该文较系统地概述了目前以16SrRNA为基础的核酸探针检测技术、利用引物的PCR技术、DNA序列分析技术和电泳分离及显示技术在油藏微生物群落多样性和石油环境污染研究中的研究进展,并探讨了未来分子生物学技术在石油微生物研究中的发展方向。     

鼢鼠的造丘活动及不同休牧方式对草地植被生产力的影响

研究表明,高原鼢鼠的造丘活动在停止放牧扰动的条件下,对于过牧型退化草地而言,非但不会对草地生产力造成破坏,相反,在植被高度、植被组成和产草量等生产力构件上均表现出了显著的促进作用。在相同的休牧条件下,鼢鼠分布地植被性状的各项指标除植物多样性低于无鼢鼠分布地外,其余指标均极显著高于无鼢鼠分布地(P<0.01),其中丘缘地又极显著地高于丘间地(P<0.01);在同为3年的三种休牧方式中,实施绝对禁牧的方式最佳,其次为降低载牧量50%且于返青至6月前禁牧的方式,这两种休牧方式均可较好地满足鼠丘在退化草地植被恢复过程中充分发挥其生态功能所必需的外部条件。     

高龄肝癌患者肝癌切除术后并发症及预后分析

目的:探讨高龄原发性肝癌患者肝癌根治性切除术的疗效及安全性。方法:回顾性分析63例(高龄组≥70岁)与98例(对照组70岁)行肝部分切除术的原发性肝癌患者的一般资料及其围手术期情况,对其术后并发症及预后进行探讨。结果:高龄组术后并发症发生率为36.5%,对照组31.6%(P0.05),高龄组7(11.1%)例肝衰竭,2(3.17%)例术后有出血现象,3(4.8%)例切口感染,3(4.8%)例胸腔积液,1(1.5%)例伴有隔下感染,1(1.5%)例有严重肺部感染,由于下肢深静脉血栓脱落,死于急性肺动脉栓塞。组织病理类型高龄组以结节型多见,Edmondson Ⅰ-Ⅱ级33例,Ⅲ-Ⅳ级18例,胆管细胞癌8例,混合细胞型4例。BCLC-0、A、B、C期分别占2、9、35、17例。高龄组与对照组1、2、3年生存率分别为82.5%VS85.7%、34.9%VS46.3%、15.9%VS36.8%。结论:高龄对肝部分切除术后并发症的发生并无明显影响,并不是原发性肝癌根治性手术切除术的禁忌症,高龄患者2、3年生存率较对照组低。     

大数据时代超重肥胖社会防控的新战略

超重肥胖既是社会问题，也是世界难题。本文深入分析超重肥胖产生的能量失衡论，并对社会化复杂因素进行剖析。基于互联网、物联网和大数据时代，对超重肥胖有关数据进行挖掘，提出超重肥胖社会防控的新战略。     

膨胀显微成像技术的原理及应用

膨胀显微成像技术（expansion microscopy,ExM）是一种新型超分辨成像技术。该技术借助可膨胀水凝胶均匀地物理放大生物样本,在常规光学成像条件下实现超分辨成像。ExM适用于细胞、组织切片等多种类型生物样本。蛋白质、核酸、脂质等生物大分子均可借助ExM进行超分辨成像。ExM可与共聚焦显微镜、光片显微镜、超高分辨显微镜联合使用,进一步提高成像分辨率。近年来,多种从基础ExM拓展而来的衍生技术进一步促进了该技术的实际应用。本文综述了ExM及其衍生技术的基本原理、ExM与不同成像技术联用的研究进展及ExM在不同类型生物样本中的应用进展,并对ExM技术的发展前景做出展望。     

山羊PTHrP基因干扰重组腺病毒的制备与鉴定

甲状旁腺激素相关蛋白 (Parathyroid hormone related protein,PTHrP) 具有广泛生物学功能,对调控钙代谢具有重要作用。采用RNA干扰和重组腺病毒技术,对山羊乳腺上皮细胞中PTHrP基因表达进行沉默,为进一步研究该基因在乳腺上皮细胞中的功能奠定基础。采用BLOCK-iT shRNA腺病毒干扰系统,将设计好的寡聚shRNA-322/357经退火复性后插入穿梭质粒pENTR/CMV-GFP/U6中。经Western blotting检测干扰效率后,选择pENTR/CMV-GFP/U6-322与病毒骨架质粒pAd/PL-DEST进行同源重组,成功获得重组干扰腺病毒载体pAD/PL-DEST/CMV-GFP/U6-322,并转染HEK-293细胞,通过包装、扩增后产生干扰重组腺病毒AD-PTHrP-322,TCID50法测定其滴度为2.0×109 PFU/mL。用AD-PTHrP-322感染山羊原代乳腺上皮细胞(MOI=200),经实时定量PCR及Western blotting检测表明在病毒感染24 h、48 h和72 h后,山羊乳腺上皮细胞中PTHrP mRNA表达量分别下调了29.2％、68.1％和82.6％ (P＜0.05),其蛋白表达水平也明显下调,干扰效果明显。