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1.
高效液相色谱法检测奶牛初乳中18种氨基酸   总被引:3,自引:0,他引:3  
应用高效液相色谱法对奶牛分娩后1~3 d初乳中18种氨基酸的含量变化进行了分析。结果表明:初乳中各种氨基酸的含量均随泌乳时间的延长而下降,谷氨酸的含量在第1天达到最高,而蛋氨酸的含量是初乳氨基酸中最低的。  相似文献   
2.
固醇调节元件结合蛋白裂解激活蛋白(srebpcieavage activating protein,SCAP)是细胞脂肪合成酶的表达调控因子。本研究旨在肝脏L02细胞中研究SCAP对FASN基因启动子的转录调控作用,有助于进一步明确SCAP/SREBP1对于靶基因的转录调控机制。本研究以荷斯坦奶牛组织c DNA为模板,克隆SCAP基因的编码序列,构建pc DNA3.1-SCAP表达载体,将SCAP表达载体转染L02肝脏细胞,采用荧光定量PCR检测SCAP基因m RNA在24 h、48 h、72 h的表达情况;采用免疫荧光的方法对SCAP标记,激光共聚焦观察SCAP蛋白的亚细胞定位;构建FASN基因启动子载体,转染至肝脏细胞,并分别转染pc DNA3.1-SREBP1和pc DNA3.1-SCAP作为处理,荧光素酶报告基因系统分析对FASN启动子活性的影响。结果发现克隆得到SCAP的PCR产物为3 836 bp的片段,通过与pc DNA3.1载体重组后获得pc DNA3.1-SCAP表达载体,经酶切和测序鉴定正确;将pc DNA3.1-SCAP载体转染肝脏细胞培养24 h、48 h、72 h后,Real-time PCR检测发现与对照组相比,48 h时细胞中SCAP基因m RNA的表达倍数增加了21倍(p0.001);激光共聚焦观察发现,DAPI染色的细胞核呈蓝色,免疫荧光标记的SCAP呈红色,二者融合后发现SCAP定位于细胞质;启动子活性检测发现,与对照组相比,SREBP1质粒处理的细胞FASN启动子活性增加了4.1倍(p0.001),而SCAP和SREBP1共同处理细胞FASN启动子活性极显著增加了7.4倍(p0.000 1)。试验克隆构建奶牛SCAP基因表达载体,亚细胞定位SCAP蛋白主要位于肝脏细胞质中,表明SCAP可以通过结合SREBP1促进FASN基因启动子的转录。  相似文献   
3.
三种哺乳动物初乳乳汁氨基酸含量的比较   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用高效液相色谱法分析了人、牛、猪3种哺乳动物的初乳乳汁中氨基酸含量,结果表明:谷氨酸的含量在3种哺乳动物的初乳乳汁中是最高的,而蛋氨酸的含量最低;从3种动物比较来看,猪乳与牛乳的氨基酸含量比较接近,而人乳与其他两种动物有较大的差异.  相似文献   
4.
双歧杆菌及其微胶囊化的现状研究   总被引:2,自引:1,他引:1  
近年来.益生菌(Probiotic)作为一类对人本有益的细菌.已成为微生物学的研究热点。特别是,作为对人体健康有益的肠内重要菌之一的双歧杆菌,由于其特定的生理保健作用,它的微胶囊化也愈来愈受人类的关注。双歧杆菌是由法国巴斯德研究院德Tisser学者于1899年采用厌氧培养法首次从健康母乳婴幼儿的粪便中分离出来的一种专性厌氧菌,它是一种人体重要的益生菌,是健康人肠道内定植且数量占优势的一种细菌 .  相似文献   
5.
CCL25和CCL28是cc趋化因子家族成员,主要表达于胸腺树突状细胞和黏膜上皮细胞,CCL25和CCL28相应的受体分别是CCR9和CCR10,表达于T淋巴细胞和B淋巴细胞。CCL25和CCL28及其相应受体对循环IgA浆母细胞和T淋巴细胞的归巢起重要作用,而且CCL28还具有广谱的抗微生物活性。  相似文献   
6.
生长抑素在大鼠乳腺组织中的分布和定位   总被引:1,自引:0,他引:1  
目的研究生长抑素在大鼠乳腺组织中的分布和定位。方法本实验应用即用型快速免疫组化方法对处女期、妊娠6 d、12 d、18 d和泌乳6 d、12 d、18 d的SD大鼠的乳腺进行生长抑素检测。结果发现从处女期到泌乳期大鼠乳腺组织中均有生长抑素的表达,且主要分布于上皮细胞的胞质和腺泡的分泌物中。结论大鼠乳腺上皮细胞的胞质和腺泡的分泌物中有生长抑素的分布。  相似文献   
7.
双歧杆菌属特征性酶F6PPK测定条件的优化   总被引:2,自引:0,他引:2  
以两歧双歧杆菌为材料,进行了双歧杆菌属特征性酶F6PPK测定条件的优化。实验首先改良了原初文献(Scardovi法)F6PPK酶活测定中对照反应管的设置,又对双岐杆菌培养时间、细胞破碎方法、底物浓度、比色波长、反应温度等条件进行了优化。实验表明,双岐杆菌培养18 h,收集菌体,以超声波法破碎细胞制备粗酶液,采用4%的底物浓度,将酶液与底物于40℃保温30 min,最终反应物于500 nm比色,所得F6PPK酶活测定结果更可靠。  相似文献   
8.
实验采用荧光定量PCR方法研究了小鼠在妊娠和泌乳过程中葡萄糖转运载体SLC2A1、SLC2A4与SLC5A1 mRNA的表达规律.结果表明与妊娠期相比,SLC2A1在泌乳期的表达量上调,泌乳18 d是妊娠18 d表达量的11倍(P〈0.01);SLC2A4的表达在妊娠和泌乳期无显著差异;SLCSA1的表达量从妊娠至泌乳期呈上升趋势,泌乳18 d是妊娠18 d表达量的2.5倍(P〈0.01).SLC2A1是小鼠乳腺泌乳时主要的葡萄糖转运载体,SLCSA1在乳腺葡萄糖的转运过程中也发挥重要作用.  相似文献   
9.
10.
猪肌肉素基因的cDNA克隆与表达   总被引:1,自引:0,他引:1  
从人肌肉素基因出发, 在dbEST数据库中进行同源性搜索, 找到七个有较高同源性的Expressed Sequence Tag(DY426490, CF787546, AJ660979, AJ664670, AJ663820, AJ680159, DN106254)。通过拼接和进一步RT-PCR实验验证, 获得猪肌肉素基因全长cDNA序列, 其全长651 bp, 开放阅读框为54~452 bp, 编码有132个氨基酸。同源性分析结果表明, 与人、小鼠和大鼠的肌肉素基因cDNA编码区(CDS)同源性分别为87.2%、77.6%和77.9%。利用克隆出的猪肌肉素cDNA, 构建表达载体pGEX-4T-1-musclin, 并在BL21大肠杆菌中成功表达和纯化了分子量为38.59 kD的融合蛋白GST-Musclin, 并运用蛋白印迹技术进行鉴定。  相似文献   
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