肠出血性大肠杆菌O157:H7 TCCP蛋白研究进展

TCCP(內膜素受体偶联细胞骨架蛋白,Tir couple cytoskeleton protein)是近年研究新发现的EHEC(肠出血性大肠杆菌)O157∶H7致病分子,它经大肠杆菌Ⅲ型分泌系统转导入宿主细胞内,结合并活化宿主蛋白N-WASP(神经威奥综合症蛋白),引起肌动蛋白的聚集,最终诱导特征病理改变黏附、擦拭(A/E)损伤的形成。本文就近年来对它的研究情况作一简要综述。     

小鼠巨噬细胞RAW264.7 的培养技巧及经验总结

RAW264.7细胞具有很强的黏附和吞噬抗原的能力,是研究微生物学、免疫学的常用细胞株.很多研究者发现这种细胞形态极不稳定,细胞状态的评价也很困难.本文作者结合RAW264.7培养经历及文献资料探讨RAW264.7细胞培养的经验教训和评价细胞状态的方法,旨在为培养该细胞的科研工作者提供一定的借鉴.     

幽门螺杆菌hpaA基因RFLP研究*

用限制性片段长度多态性 (RFLP)的方法评价幽门螺杆菌不同菌株鞭毛粘附素基因(hpaA)的变异性。PCR扩增 9株幽门螺杆菌 710bp的hpaA基因 ,用HhaⅠ、HaeⅢ限制性内切酶对该基因片段进行酶切分析。hpaA基因HaeIII单酶切可见 4种带型 ,HhaI单酶切出现 5种带型。从临床分离的H. pylori菌株hpaARFLP互有差异 ,且不同于国际标准菌株 ;临床分     

O157∶H7大肠杆菌感染动物模型的建立

为了建立一个适合于O15 7∶H7大肠杆菌疫苗及药物评价的稳定有效、经济易行的动物模型 ,通过筛选获得耐链霉素的O15 7菌 ,并用其在BALB/c小鼠体内传代获得对小鼠的适应株O15 7 Sr1。 6只 6周龄雄性BALB/c小鼠用链霉素溶液预处理过后 ,以O15 7 Sr1培养菌液经口感染。从感染后第 2d到第 19d ,粪便细菌培养O15 7浓度一直维持在 10 7CFU/g粪便以上 ,到第 2 5d浓度在 10 5CFU/g以上 ,小鼠感染率为 10 0 % ,并且小鼠有排稀便现象。用耐链霉素并在小鼠体内传代过的O15 7菌感染BalB/c小鼠的方法成功地建立了动物模型 ,该模型粪便O15 7菌…     

rUreB亚单位疫苗中试产品的纯度检测和肽图分析

分析重组幽门螺杆菌尿素酶B亚单位疫苗 (rUreB)中试产品的纯度 ,制备肽指纹图 ,证明rUreB三批中试产品在一级结构上的一致性和生产工艺稳定性。利用面积归一法检测产品的纯度 ,在非还原条件下用TPCK处理过的胰蛋白酶水解 3批中试产品 ,用反相HPLC制备分析肽图。结果显示 ,rUreB的 3批中试产品的纯度达到中试质量要求和肽图分析要求 ,3批中试产品的肽指纹图基本一致 ,重现性好。     

日利用l基因工程培育成功耐高温植物

Nature Biotechnology 2000年18卷3期249页报道：日本九州大学的科学家们已培育成功一种可在高温下维持光合作用的转基因烟草(Science287,476～479,2000)。鉴于沙漠植物的叶绿体可在高温下减少三烯脂肪酸的合成,科学家们培育了含有来自拟南芥(Arabidopsis thaliana)的附加的叶绿体特异△-3去饱和酶(脱氢酶)基因的两个转基因烟草株系。互阻遏作用导致△-3去饱和酶基因在这些植株中的表达下降,以及与此伴随的三烯脂肪酸的相应减少。因此,这种转基因植株40℃高温下的光合作用活性可高于25℃下的活性(但40℃可极大地降低野生型植株的光合作用强度)。科学家们提示,利用内源基因可避免利－46用外源DNA进行基因操作时发生的有害效应。这个研究组的植物生理学家KohIba说：“此项研究给予我们的启迪是,利用基因操作技术可育成新的农作物或树木,以适应无可避免的全球性气候变化。例如可使寒冷地区的树木适应于高温环境”。汪开治     

类鼻疽伯克霍尔德菌bopA基因敲除株的构建及生物学特征

【【背景】类鼻疽杆菌是一种能够引起人类疾病甚至死亡的胞内寄生菌,Ⅲ型分泌系统在该菌入侵上皮细胞、逃避宿主免疫以及毒力因子的分泌过程中发挥重要作用,其中bopA基因为TTSS-3基因编码的重要效应蛋白,在类鼻疽杆菌的免疫逃逸中发挥重要作用。【目的】构建类鼻疽杆菌bopA基因敲除菌株,并对其生物学特征进行初步研究。【方法】构建pK18mobSacB-ΔbopA自杀质粒,通过大肠杆菌S17-1λpair以接合的方式转入类鼻疽杆菌,利用同源重组敲除了bopA基因,并用蔗糖平板筛选出菌株,最后在细胞和动物水平检测敲除菌株的表型变化。【结果】构建了bopA敲除的类鼻疽菌株,并通过细胞和动物实验证实敲除bopA基因后,细菌的细胞侵袭和胞内存活以及体内定殖能力都显著降低。【结论】利用同源重组成功构建类鼻疽bopA基因敲除株,为深入研究该基因的作用靶点奠定了实验基础。     

蛋白质抗原表位研究进展

本文综述了蛋白质抗原表位的种类及特性,回顾了近几年来实验确定和理论预测B细胞蛋白质抗原表位的常用方法,介绍了表位作图和表位疫苗的研究现状。     

BiPAP正压无创呼吸机辅助治疗老年AECOPD的临床疗效及对患者肺功能、血清炎性因子和预后指标的影响

摘要 目的：观察双水平正压无创通气（bi-level positive airway pressure,BiPAP）辅助治疗老年慢性阻塞性肺疾病急性加重期（Acute Exacerbation of Chronic Obstructive Pulmonary Disease,AECOPD）的临床疗效以及患者治疗前后肺功能、血清炎性因子和预后指标的变化。方法：选择本院在2017年8月至2020年7月期间收治的150例AECOPD患者,采用随机数字表法分为对照组和研究组,每组75例。给予两组抗感染、祛痰、纠正水电解质紊乱、营养支持等基础治疗,在此基础上给予对照组患者低流量吸氧治疗,给予研究组患者选择合适面罩进行BiPAP治疗。比较两组治疗总有效率以及治疗前和治疗后肺功能指标[1 s用力呼气量（1 s forced expiratory volume,FEV₁）、FEV₁/用力肺活量（FEV₁/forced vital capacity,FEV₁/FVC）和FEV1占预计值百分比（FEV₁ as a percentage of predicted value,FEV₁%）]、血气指标[动脉血氧分压（Arterial partial pressure of oxygen,PaO₂）和动脉二氧化碳分压（arterial partial pressure of carbon dioxide,PaCO₂）]、血清炎性因子[白细胞介素-6（Interleukin-6,IL-6）、IL-8和肿瘤坏死因子α（TNF-α）水平]、可溶性髓样细胞触发受体-1（soluble triggering receptor expressed on myeloid cells-1,sTREM-1）以及全身性炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome,SIRS）量化评分。结果：研究组和对照组患者治疗总有率分别为92.00 %和74.67 %（P<0.05）。两组治疗后FEV₁、FEV₁/FVC、FEV₁%、PaCO₂、SIRS评分以及血清IL-6、IL-8、TNF-α和sTREM-1水平都明显低于治疗前,PaO₂明显高于治疗前（P<0.05）。研究组治疗后FEV₁、FEV₁/FVC、FEV₁%、PaCO₂、SIRS评分以及血清IL-6、IL-8、TNF-α和sTREM-1水平都明显低于对照组,PaO₂明显高于对照组（P<0.05）。结论：BiPAP能够提高老年AECOPD患者临床疗效,改善肺功能、血气水平和预后,缓解炎症状态。