聚苯乙烯暴露和清除对黑斑侧褶蛙蝌蚪身体大小和脏器系数的影响

探究不同粒径（50 nm、200 nm和1 000 nm）、浓度（清水组、低浓度组、中浓度组和高浓度组）荧光聚苯乙烯微球溶液组合对37期黑斑侧褶蛙（Pelophylax nigromaculatus）蝌蚪身体大小和脏器系数的影响,连续测定了暴露7 d时,之后清水清除饲养7 d（14 d时）和14 d（21 d时）,其体重与体全长的比值（重长比）、小肠长度以及心、肝湿重的变化。重长比在200 nm粒径条件下不受聚苯乙烯微球暴露和清除影响（P > 0.05）;50 nm清水组14 d时低于其他浓度组（P < 0.05）;1 000 nm中浓度组7 d时和14 d时高于21 d时（P < 0.05）,7 d时高浓度组低于其他浓度组（P < 0.05）,21 d时清水组和低浓度组都高于中浓度组（P < 0.05）。小肠长度系数在200 nm高浓度组随时间而变化,7 d时至14 d时显著增加,21 d时陡降（P < 0.05）,1 000 nm中浓度组7 d时和14 d时都显著高于21 d时（P < 0.05）;7 d时,1 000 nm高浓度组显著低于其他浓度组（P < 0.05）,50 nm、200 nm均无组间差异（P > 0.05）。心、肝湿重系数均不随处理时间而变化（P > 0.05）;心湿重系数只在50 nm 14 d时变化显著,清水组最高,高、中浓度组其次,低浓度组最低（P < 0.05）,肝湿重系数只在50 nm和200 nm 14 d时清水组低于其他浓度组（P < 0.05）。50 nm、200 nm和1 000 nm处理分别影响重长比、心和肝湿重系数,小肠长度系数和肝湿重系数,以及重长比和小肠长度系数,但与粒径和浓度均不呈线性关系。     

水位变化影响蝌蚪存活、形态表型和植物血凝素反应

为探究黑斑侧褶蛙蝌蚪形态和生理特征对水位变化的响应,对480只大小相似的蝌蚪进行快速、中速和慢速干涸处理,统计各发育时期时长和存活率,测定变态完成后幼蛙的身体和内脏器官大小,以及对植物血凝素(PHA-P)的反应。结果表明: 对照组蝌蚪的变态时长最长,显著长于快速、中速和慢速干涸组;不同处理变态存活率在72.5%～90.8%,其中对照组最高,快速干涸组最低。对照和慢速干涸组幼蛙的体重和体长均显著高于中速和快速干涸组,快速干涸组体宽、体重与体长的比值、胴体湿重以及肺和脂肪体的湿重系数均最低,但心、脾、肾和消化器官的湿重系数和消化道各段的长度系数均无明显的组间差异。不同处理幼蛙对PHA-P的最大反应值均出现于注射后3 h,且中速和慢速干涸组的最大反应值均显著高于对照组,而快速干涸组与各组均无显著差异。表明黑斑侧褶蛙蝌蚪可通过加速变态发育进程来应对干旱胁迫,但会出现个体变小、细胞介导的免疫能力下降,不利于其成功登陆。     

荧光聚苯乙烯微球对蝌蚪应激水平和免疫功能的影响

为探究纳米塑料对黑斑侧褶蛙(Pelophylax nigromaculatus)37期蝌蚪健康状态的影响,将其暴露于50 nm粒径低、中和高浓度荧光聚苯乙烯微球溶液(fluorescent polystyrene microsphere solution, FPM_S)7 d(7 d时),之后分别移至清水中饲养7 d(14 d时)或14 d(21 d时),以清水组为对照组,测定了每一取样时间点不同浓度组、同一浓度组不同取样时间点的体重与体全长的比值(重长比)、嗜中性粒细胞与淋巴细胞的比值(N/L)和对植物血凝素(phytohemagglutinin, PHA-P)的反应差异。结果表明：重长比只在14 d时清水组显著低于其他浓度组;N/L只在21 d时清水组低于其他浓度组,低、中和高浓度组都从7 d时至21 d时显著增加;7 d时各浓度组蝌蚪对PHA-P的最大反应值出现于注射后3 h或4 h, 14 d时前移至2 h或3 h, 21 d时又恢复至3 h或4 h,只有21 d时高浓度组高于低浓度组和中浓度组;FPMs暴露和初次清除对黑斑侧褶蛙蝌蚪的生长发育有明显的促进作...     

干扰素α-2bHis89/His159的分子获得及性能分析

目的：通过结构分析和定点突变，构建干扰素α-2bHis89/His159(IFNα-2bHis89/His159)，以期获得高性能干扰素突变体。方法：采用PCR体外定点突变技术，使干扰素α-2b基因的第89位密码子由编码酪氨酸的TAC突变为编码组氨酸的CAC，第159位密码子由编码谷氨酸的GAA突变为编码组氨酸的CAC。将扩增片段克隆入pET23b表达载体，重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)。表达的IFNα-2bHis89/His159经包涵体变性、复性、DEAE层析和CM层析纯化后，用WISH-VSV系统进行生物活性测定。以SD大鼠进行初步药代动力学研究。结果：IFNα-2bHis89/His159主要以包涵体形式表达，表达量占菌体总蛋白的40%以上。纯化后，IFNα-2bHis89/His159的纯度大于95%，比活性大于2.8×108IU/mg。相对于IFNα-2b较短的消除半衰期，IFNα-2bHis89/His159的消除半衰期得到延长，为2.34±0.27h。结论：构建了IFNα-2bHis89/His159的重组表达载体，并成功地在大肠杆菌中实现了高效表达，建立了IFNα-2bHis89/His159的纯化工艺，获得了体外活性增高并且体内稳定性得到改善的新型干扰素α-2b突变体。