基于CRISPR-Cas9技术构建橡胶树胶孢炭疽菌的基因敲除系统

[背景]CRISPR-Cas9基因组编辑技术为病原真菌的基因敲除、敲入及定点编辑提供了新的思路。[目的]建立适用于橡胶树胶孢炭疽菌的CRISPR-Cas9基因敲除系统。[方法]通过大肠杆菌原核表达系统合成含有细胞核定位信号的Cas9蛋白;以URA5为靶标基因,预测该基因中Cas9的切割位点,并在体外转录合成相应的SgRNA;体外构建Cas9-SgRNA复合体,并将该复合体转入橡胶树胶孢炭疽菌原生质体;通过表型筛选及测序鉴定,筛选URA5的敲除突变体菌株。[结果]体外表达的Cas9蛋白与SgRNA能够形成复合体,并在体外对目标基因URA5的DNA序列进行切割;Cas9-SgRNA复合体能够成功转入橡胶树胶孢炭疽菌原生质体,并完成对URA5的敲除;敲除突变株表现出尿嘧啶缺陷表现型。[结论]建立了适用于橡胶树胶孢炭疽菌的基因敲除系统。     

档案图书防霉条件研究及防霉剂的筛选

对档案图书保藏过程中引起霉变的微生物种类、引起霉变的主要环境因素和防霉剂的筛选进行了试验研究。结果表明：曲霉属微生物是档案图书霉变的主要霉腐菌,发生霉变的环境温度条件和能够引发霉变的孢子浓度范围较宽,环境相对湿度对霉变起关键作用。安全防霉条件为：控制环境相对湿度低于65％,温度10℃～25℃;低毒防霉剂对硝基苯甲醛和仲丁胺可以应用于档案图书的防霉过程。     

棉花粉蚧以初孵若虫转换寄主后的适应能力研究

在我国棉花粉蚧Phenacoccus solenopsis Tinsley是一种重要的外来入侵害虫。其寄主范围广,对多种经济作物、园林观赏植物等存在严重威胁。本文观察研究了在寄主转换过程中该虫的主要生物学特征包括发育历期、存活率、雌成虫大小、产仔量等,结果表明:初孵若虫存活率以烟草上最高(87.9%),扶桑、棉花、蜀葵上较高,分别为76.0%、66.2%、66.7%,马缨丹上最低(35.4%);若虫发育历期以马缨丹上最长,为42.1 d,扶桑、棉花、蜀葵、烟草上分别为27.6、20.8、20.8、16.2 d;在马缨丹(8.7 d)、扶桑(9.3 d)、蜀葵(9.6 d)上蛹历期较长,在烟草(6.7 d)、棉花(6.9 d)上较短。烟草上雌成虫个体显著较大,体长为2 349.3μm;棉花(2 017.5μm)、扶桑(1 813.9μm)次之,马缨丹(1 658.0μm)、蜀葵(1 719.4μm)较小。雌成虫产仔量烟草、蜀葵、棉花、扶桑和马缨丹上分别为376.5粒/雌、209.2粒/雌、177.8粒/雌、94.0粒/雌、27.3粒/雌。转换至马缨丹上后棉花粉蚧从第2代开始生长发育进入稳定状态,但其生物学适应性显著较低,若虫发育历期均显著延长(36.4-40.5 d),存活率显著降低(31.0%-36.0%),单雌产仔量降低至25.9粒-35.0粒。从马缨丹转移至扶桑、棉花后3个世代,除了棉花上第2代、第3代若虫发育历期变短外,棉花粉蚧其他主要生物学参数均未有显著变化。     

物理诱变技术及其在香蕉育种中的研究进展

我国是世界产蕉大国,香蕉总产量已居世界第2位,香蕉产业已成为我国南亚热带地区农民脱贫致富的重要支柱产业。但目前我国香蕉品种更新缓慢,现有品种的高产性、抗寒性、抗病性均存在一定程度的缺陷,而物理诱变技术在培育改良品种特性上具有独特的优势。本文综述了物理诱变技术及其在香蕉育种中的研究进展,包括物理诱变定义、种类及应用等方面,以期对香蕉诱变研究及新品种选育实践提供参考。     

档案图书防霉条件研究及防霉剂的筛选*

对档案图书保藏过程中引起霉变的微生物种类、引起霉变的主要环境因素和防霉剂的筛选进行了试验研究。结果表明:曲霉属微生物是档案图书霉变的主要霉腐菌,发生霉变的环境温度条件和能够引发霉变的孢子浓度范围较宽,环境相对湿度对霉变起关键作用。安全防霉条件为:控制环境相对湿度低于65%,温度10℃～25℃;低毒防霉剂对硝基苯甲醛和仲丁胺可以应用于档案图书的防霉过程。     

超氧化物歧化酶在癌细胞毒性中的作用

超氧化物歧化酶(SOD)的抑制剂二乙基二硫代氨基甲酸钠(DDC)既能加强抗癌药的药效,又能提高细胞的辐射敏感性,因此是一种有希望的肿瘤化疗及放疗综合疗法的试剂。我们曾发现它能使癌细胞的SOD活性下降,癌细胞的存活率下降,对癌细胞集落形成率、DNA合成和细胞形态都呈双时相毒性。它也能抑制癌细胞的增殖率,延长细胞倍增时间。由于SOD活性与DNA合成的变化密切相关,因而SOD活性的大小对癌细胞受DDC中毒时能否存活起重要作用。本文着重研究DDC对癌细胞SOD活性的影响以及SOD在细胞中毒中的作用。     

二乙基二硫代氨基甲酸钠对癌细胞的毒性及其与超氧化物歧化酶的关系

3×10~(-3)M二乙基二硫代氨基甲酸钠[DDC,(C_2H_5)_2NCS_2Na]抑制癌细胞的增殖率、延长细胞倍增时间。受DDC处理1小时后,癌细胞的超氧化物歧化酶(SOD)活性与DNA合成受到明显抑制,即使清洗后,二者仍继续下降,直到清洗后3小时,二者才逐渐恢复。一天后,二者达到或超过对照。SOD活性与DNA合成的变化趋势密切相关,这表明SOD活性的高低似乎是癌细胞中毒后能否存活的重要因素。外加Cu-ZnSOD对癌细胞的存活没有影响,也许它不被细胞所吸收。     

基于SPR生物传感器的免疫学检测

利用一种全新的生物大分子相互作用检测仪表面等离子激元共振（SPR）生物传感器,对乙肝表面抗原,抗体,破伤风类毒素,抗体等生物制品进行生物特异性相互作用分析（BIA）,并对其在免疫学检测上的特征进行了探讨。     

香蕉寒害研究现状及展望

我国绝大部分香蕉种植区域属于香蕉非最适宜种植区,容易受到冬春寒流的侵袭而造成重大经济损失。寒害已成为制约我国香蕉产业健康发展的主要灾害之一。对香蕉寒害症状和类型、香蕉抗寒生理生化研究、防寒措施、抗寒相关基因的挖掘等方面进行了综述,简述了香蕉寒害研究存在的问题和发展现状,以期对香蕉寒害的基础研究及生产应用提供参考。     

香蕉泛素结合酶基因MaUCE2在非生物胁迫下的表达分析

为了研究泛素结合酶(ubiquitin-conjugating enzyme)E2和植物抗逆性的关系,对香蕉苗进行了非生物胁迫(干旱、低温、盐胁迫)处理,利用荧光定量PCR技术分析了香蕉泛素结合酶基因MaUCE2在不同胁迫条件下的表达特性。结果表明,MaUCE2表达量随着干旱程度的加重而逐步上升,在高度干旱胁迫下MaUCE2的表达量最高;低温胁迫可以诱导MaUCE2的表达,其表达量随着温度的降低而逐步升高,当温度降低到5℃时,MaUCE2的表达量最高;而在盐胁迫下,MaUCE2的表达量与对照相比略有上升,上述结果表明MaUCE2基因表达受非生物胁迫的诱导。