谷胱甘肽-铬-烟酸螯合物的制备与表征

以烟酸(NA)、谷胱甘肽(GSH)和CrCl3·6H2O为原料,制备高纯度GSH-Cr3+-NA2螯合物,分析影响合成螯合物的主要因素,获得最佳合成工艺,并对获得的螯合物进行表征,确定其螯合比例。结果表明,在Cr3+/NA/GSH(mol/mol/mol)=1∶2∶4,pH 5.0、温度60℃下反应3h,制备出Cr3+/NA/GSH(mol/mol/mol)=1∶2∶1的GSH-Cr3+-NA2螯合物;红外分析显示,与GSH相比,螯合物的-NH2、-NH-特征吸收峰发生蓝移,-NHC=O中-C=O的特征吸收峰红移,-SH的伸缩振动峰消失,说明GSH上的-NH-、NHC=O中-C=O、-SH均参与相互作用;与NA相比,螯合物的-C=O的伸缩振动峰发生红移,-OH的特征吸收峰消失了,说明NA上的-C=O和-OH参与相互作用。原子力显微镜形貌分析结果指出,由两分子NA和一分子GSH链围绕一Cr3+形成GSH-Cr3+-NA2螯合物。     

野生青果的防腐作用研究

本文对野生青果的药用成分进行了鉴定及制备,证明了该成分具有较强的抑菌作用,并同常用的合成防腐剂苯甲酸钠、山梨酸钾的防腐性能进行了比较。     

微生物转谷氨酰胺酶(MTGase)的AOT反胶束纯化研究

研究微生物转谷氨酰胺酶(MTGase)反胶束纯化的工艺和条件,调节MTGase离心上清液等电点,除去部分杂蛋白,MTGase活力升高7.5倍;用截留分子量为10000的超滤膜除去小分子杂蛋白,MTGase活力升高1.33倍;用0.05mol/L的AOT/异辛烷反胶束进一步纯化MTGase,其最适萃取条件是粗MTGase蛋白质浓度20mg/mL,[Na ]0.12mol/L,水相pH4.80～5.20,相比1:1(v/v);荷载MTGase的AOT反胶束用2.0mol/LKCl进行反萃取,MTGase活力为14.2U/g,纯化8.875倍;冷冻干燥脱盐反萃取液,获得MTGase冻干粉,其活力为110.3U/g,与粗酶液相比较,纯化689.4倍。经过AOT/异辛烷反胶束萃取纯化的MTGase,其SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳为一条带。Ca2 与表面活性剂非极性尾上丁二酰羰基氧、极性头磺酸基硫氧基氧及MTGase分子表面具有孤电子对的基团的配位结合放大了AOT反胶束的另一种萃取作用——配位萃取,致使其对MTGase的萃取率高于K 而接近Na 。     

褐变蚕蛹分离蛋白脱色与改性研究

研究了褐变蚕蛹分离蛋白脱色方法及其酸酐、硫酸锆改性。用酸性乙酸酐法处理蚕蛹分离蛋白质 ,可获得白色脱色物 ,其最佳条件是 ,蚕蛹分离蛋白∶乙酸酐∶H2 O2 =1∶1.2 5∶1.5、温度≥ 80℃、时间≥ 30min。过氧乙酸的作用可能是使参与褐变的赖氨酸ε 氨基重新游离并断开胱氨酸之间的二硫键。乙酸酐或顺丁烯二酸酐修饰赖氨酸ε 氨基的最适条件是 :脱色蛋白∶乙酸酐 (或顺丁烯二酸酐 ) =1∶0 .3(或 0 4 )、pH 9.0～ 9.5、温度≤ 4 5℃、时间 6 0min。硫酸锆修饰氨基和羧基的最适条件是 :脱色蛋白∶硫酸锆 =1∶0 .0 4、pH≤ 3.0、温度≥ 80℃、时间 10min。脱色蛋白经过乙酸酐或顺丁烯二酸酐、硫酸锆修饰 ,其白色可稳定 ,在pH 2～ 12及 80℃条件下均不变色。在碱性条件下 ,H2 O2 可部分氧化蚕蛹分离蛋白褐色 ,获得乳黄色脱色物 ,其最适条件是 ,蚕蛹蛋白∶H2 O2 =1∶1.5、pH 9.0～ 9.5、温度≥ 80℃、时间≥30min。蚕蛹蛋白褐变的原因可能主要是其赖氨酸ε 氨基与氨基葡萄糖在碱性加热条件下发生Marl laid反应所致。此外 ,蛋白质中游离α 氨基、谷氨酸γ 羧基及天门冬氨酸β 羧基可能也参与了褐变反应     

外源抗坏血酸缓解水稻幼苗的铝胁迫效应

为探讨外源抗坏血酸对铝胁迫下水稻氧化损伤的影响,该文以峰1A(不育系,籼稻)和滇优35号(杂交,粳稻)两个水稻品种为材料,采用溶液培养法研究外源抗坏血酸(AsA)对50μmol·L~(-1)Al~(3+)胁迫下水稻根尖H_2O_2和内源AsA含量以及抗氧化酶活性的影响。结果表明:铝胁迫24 h时,水稻根尖内源AsA含量为对照的0.90倍,与对照相比,根尖H_2O_2增加了0.55倍至1.3倍,SOD、POD、CAT及APX活性分别增加了0.83倍至1.6倍、1.0倍至1.3倍、0.85倍至1.2倍、1.0倍至1.8倍;外源AsA处理铝胁迫水稻24 h,水稻根尖内源AsA含量为对照的1.2倍,SOD、POD、CAT及APX活性分别增加了1.2倍至2.2倍、1.5倍至1.6倍、1.3倍至1.7倍、1.2倍至2.6倍,根尖H_2O_2含量增加了0.1倍至0.6倍。这些研究结果说明铝胁迫加剧了细胞膜的过氧化程度,并诱导抗氧化酶活性以清除活性氧,外源AsA通过提高抗氧化酶活性和内源AsA含量以缓解水稻Al~(3+)胁迫引起的氧化损伤,降低细胞膜系统伤害,促进水稻生长,为外源AsA提高水稻适应铝胁迫能力提供了理论依据。     

蔗糖酶和葡萄糖氧化酶的共固化

＃ 本文研究了用吸附交联技术共固定化蔗糖酶和葡萄糖氧化酶(GOD)的方法,考查了共固定化酶的动力学性质。试验结果表明:与溶液酶相比较,固定化蔗糖酶和GOD的响应滞迟期分别为3分钟和2分钟,稳态响应时间增加了6分钟和4分钟,Km值增大,pH—活力曲线变宽,最适pH值分别增大0.7和0.64,最适温度则降低7.3℃和16℃。 以活性氧化铝作载体,戊二醛作交联剂制备的共固定化蔗糖酶和GOD,其蛋白质固定化率为62.9％,分解葡萄糖的总速度为441.6IU,当蔗糖浓度为0.2％,以内时其反应速度与蔗糖的浓度呈正相关(r=0.996),使用半衰期1623次,在4℃下保存120天活力残存为83.7％。     

HZ-841吸附树脂精制银杏叶总黄酮

本文研究了用HZ-841吸附树脂精制银杏叶总黄酮的工艺。用10 BV 70％的乙醇分三次提取脱脂银杏叶粉中的银杏叶总黄酮,其收得率为4．8％,纯度为21．7％;用30BV纯净水、微波解冻提取30min,银杏叶总黄酮的收得率及纯度分别是2．63％和13．4％。HZ-841树脂对银杏叶总黄酮的动态吸附容量在pH=7．0时为0．265g／mL,树脂,动态吸附平衡时间为10min。酸度对HZ-841树脂吸附银杏叶总黄酮有显著影响,当pH=5．0时,其静态吸附量可达到0．322g／mL。吸附了银杏叶总黄酮的HZ-841树脂可用乙醇洗脱,当洗脱液pH=9．0、乙醇浓度为90％、洗脱流速3BV／h时,5BV洗脱液的收得率为1．8％。用无水乙醇洗脱的银杏叶总黄酮经过真空浓缩、干燥,获得的浅黄色粉末中银杏叶总黄酮含量为37．3％,产品收得率为2．41％。     

太子参脱病毒技术研究

采用茎尖分生组织法、热处理结合茎尖法、病毒唑处理结合茎尖法对6个不同产地的太子参[Pseudostellaria heterophylla (Miq.) Pax ex Pax et Hoffm.]组培苗进行了脱病毒研究. 经生物检测、 ELISA法和电镜检测表明, 热处理结合茎尖法脱病毒效果最好,脱毒率高达 100%;病毒唑处理结合茎尖法和茎尖分生组织法脱毒率分别为 79.64%和74.29%.不同产地太子参的脱病毒效果不同.根据实验结果提出了太子参的脱病毒繁育程序,其中复壮培养基中PP333的最适浓度为0.5～1.0 mg·L-1,最适生根培养基为1/2 MS 0.3 mg·L-1 NAA.     

HD-8树脂分离天花粉中的L-瓜氨酸

本文研究了用HD8阳离子交换树脂从天花粉中分离L瓜氨酸的工艺条件。采用HD8阳离子交换树脂从天花粉水提取液中交换L瓜氨酸,该树脂对L瓜氨酸的静态交换容量为50.8mg·mL1。在流速为3BV·h1,提取液中L瓜氨酸浓度为9.64mg·mL1时,HD8树脂对L瓜氨酸的动态交换容量为46.8mg·mL1树脂,其动态平衡时间为12min。NH4OH洗脱HD8树脂载荷的L瓜氨酸效果好。控制洗脱液流速为5BV·h1,用8BV0.25mol·L1的NH4OH即可完全洗脱L瓜氨酸。采用HZ803大孔径吸附树脂吸附L瓜氨酸洗脱液中的色素,真空浓缩,并在pH=5.97、4℃条件下结晶L瓜氨酸,其收得率为7.24%,其中L瓜氨酸含量为82.7%。与等电点法相比,产品纯度提高2.36倍。     

半胱氨酸和巯基乙酸的弱氧化动力学特性研究

为探索研究半胱氨酸和巯基乙酸弱氧化反应之间的异同,选取H_2O_2稀溶液来弱氧化巯基化合物,考察温度、H_2O_2浓度对反应的影响,并进行巯基反应速率分析。结果表明,在低浓度H_2O_2下,增加H_2O_2浓度,半胱氨酸和巯基乙酸的反应速率均明显提高;在20~27.5℃区间,半胱氨酸的平均反应速率高于巯基乙酸。同时通过数据模拟,得到了在T=20℃,pH=6的条件下,H_2O_2弱氧化半胱氨酸和巯基乙酸的动力学方程。