eIF4A1与TrkA相互作用后抑制TrkA的泛素化（英文）

神经生长因子(NGF)结合细胞表面受体p75NTR (p75神经营养素受体)和TrkA (酪氨酸蛋白激酶A)后介导了细胞分化、细胞生存、凋亡、增殖和侵袭等多个重要的生理病理过程. TrKA能与细胞内多个蛋白质相互作用,但是由于NGF信号通路的复杂性,现在仍有必要发现与之相互作用的蛋白质以更准确地了解NGF信号通路.本研究中我们通过酵母双杂交的方法筛选到了一个新的与TrKA相互作用的蛋白质——真核生物翻译起始因子4A1 (eIF4A1),然后通过谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白沉降实验(GST-pull-down)和免疫共沉淀实验(Co-IP)证明了TrkA和eIF4A1的相互作用.此外NGF能够增强TrkA和eIF4A1的相互作用.在鉴定相互作用位点实验中,我们发现eIF4A1的氨基端结构域和TrkA的TK结构域参与了相互作用. TrkA和e IF4A1共定位在细胞膜上. NGF能够引起TrkA与泛素蛋白63位的赖氨酸连接,而eIF4A1与TrkA相互作用后能够抑制TrkA与泛素蛋白63位的赖氨酸连接.综上,得出结论 e IF4A1通过与TrkA相互作用抑制其泛素化调控NGF信号通路.     

eIF4A1与TrkA相互作用后抑制TrkA的泛素化

神经生长因子（NGF）结合细胞表面受体p75NTR(p75神经营养素受体)和TrkA（酪氨酸蛋白激酶A）后介导了细胞分化、细胞生存、凋亡、增殖和侵袭等多个重要的生理病理过程. TrKA能与细胞内多个蛋白质相互作用,但是由于NGF信号通路的复杂性,现在仍有必要发现与之相互作用的蛋白质以更准确地了解NGF信号通路. 本研究中我们通过酵母双杂交的方法筛选到了一个新的与TrKA相互作用的蛋白质——真核生物翻译起始因子4A1（eIF4A1）,然后通过谷胱甘肽巯基转移酶融合蛋白沉降实验（GST-pull-down）和免疫共沉淀实验（Co-IP）证明了TrkA和eIF4A1的相互作用. 此外NGF能够增强TrkA和eIF4A1的相互作用. 在鉴定相互作用位点实验中,我们发现eIF4A1的氨基端结构域和TrkA的TK结构域参与了相互作用. TrkA和eIF4A1共定位在细胞膜上. NGF能够引起TrkA与泛素蛋白63位的赖氨酸连接,而eIF4A1与TrkA相互作用后能够抑制TrkA与泛素蛋白63位的赖氨酸连接. 综上,得出结论 eIF4A1通过与TrkA相互作用抑制其泛素化调控NGF信号通路.     

shRNA干扰eIF4A1基因对胶质瘤细胞体内外生物学特征的影响

胶质瘤是颅内常见的肿瘤,其中恶性脑胶质瘤成弥漫性生长,尽管给予手术、放疗或化疗等综合治疗,仍极易复发,迫切需要探索新的治疗方法.但是胶质瘤的治疗靶点匮乏,因此探索有效的靶点对其治疗具有重要的意义.本研究中首先利用中国脑胶质瘤基因组图谱计划数据库(Chinese glioma genome altas, CGGA)分析了真核生物翻译起始因子中eIF4A1与脑胶质瘤的关系.生物信息学分析显示, eIF4A与胶质瘤病理分级相关并且在胶质瘤细胞中高表达. eIF4A1的抑制剂Silvestrol明显抑制胶质瘤细胞的增殖能力.利用慢病毒感染胶质瘤细胞建立shRNA干扰eIF4A1基因的胶质瘤细胞株,进行了一系列体内外生物学特征的实验,研究结果发现, shRNA干扰eIF4A1基因后能够有效抑制胶质瘤细胞的增殖、克隆形成、细胞侵袭和迁移.因此,本实验研究证实eIF4A1是胶质瘤治疗的有效靶点,为胶质瘤的临床治疗提供可靠的理论基础.     

单孔腹腔镜直肠癌根治术的临床疗效及对患者血清HO-1、CEA、YKL-40和sIL-2R的影响

目的:探讨单孔腹腔镜直肠癌根治术的临床疗效及对患者血清血红素氧化酶(HO)-1、癌胚抗原(CEA)、人类软骨糖蛋白39(YKL-40)、可溶性白介素-2受体(s IL-2R)的影响。方法:选择2013年1月至2015年1月我院接诊的92例直肠癌患者,通过随机数表法分为观察组(n=46)和对照组(n=46),对照组使用传统多孔腹腔镜直肠癌根治术,观察组使用单孔腹腔镜直肠癌根治术。比较两组围术期情况及术后并发症的发生情况,手术前24 h、手术后24 h血清HO-1、CEA、YKL-40、s IL-2R水平的变化,并随访2年,比较两组的生存率。结果:两组手术时间、淋巴结切除个数比较差异无统计学意义(P0.05),观察组术中出血量显著少于对照组,术后排气时间、住院时间明显短于对照组(P0.05)。手术后24 h,两组血清HO-1、YKL-40、s IL-2R水平均较手术前显著升高(P0.05),血清CEA水平较手术前明显降低(P0.05),且观察组血清HO-1、YKL-40、s IL-2R水平均明显低于对照组(P0.05),两组手术后血清CEA水平比较差异无统计学意义(P0.05);观察组吻合口瘘、尿潴留、切口感染、肺部感染总发生率明显低于对照组(P0.05),两组术后2年生存率比较差异无统计学意义(P0.05)。结论:采用单孔腹腔镜直肠癌根治术治疗直肠癌患者的临床效果明显优于传统多孔腹腔镜直肠癌根治术,且安全性更高,患者术后恢复更快,可能与其有效降低患者血清HO-1、YKL-40、s IL-2R、CEA水平有关。